Kuća, dizajn, adaptacija, uređenje.  Dvorište i vrt.  Svojim vlastitim rukama

Kuća, dizajn, adaptacija, uređenje. Dvorište i vrt. Svojim vlastitim rukama

» Stafilokok (Staphylococcus). Privatna mikrobiologija

Stafilokok (Staphylococcus). Privatna mikrobiologija

Mikrobiologija: bilješke s predavanja Tkachenko Ksenia Viktorovna

1. Stafilokoki

1. Stafilokoki

Porodica Staphilococcoceae, rod Staphilicoccus.

Oni su uzročnici stafilokokne upale pluća, stafilokoka novorođenčeta, sepse, pemfigusa.

To su male gram-pozitivne koke. U razmazima se nalaze u grozdovima, često uviformni. Oni ne stvaraju spor, oni su nepomični. Formirajte mikrokapsule. Oni su fakultativni anaerobi.

Nezahtjevni za hranjive medije, dobro rastu na jednostavnim medijima, daju kolonije pigmenta. Izborni medij za stafilokoke je agar žumanjka, rjeđe mliječni solni agar.

Stafilokoki su otporni na visoke koncentracije natrijevog klorida.

Za razliku od mikrokoka, stafilokoki su u stanju razgraditi glukozu u anaerobnim uvjetima, glicerin u aerobnim uvjetima. Osjetljive su na lizostafin, jer njihova stanična stijenka sadrži posebne teihoične kiseline - ribitol teihoičnu.

Stafilokoki su biokemijski aktivni, imaju proteolitičko i saharolitičko djelovanje. Prema svojim biokemijskim svojstvima dijele se na vrste:

1) Sv. aureus (ima mnogo čimbenika patogenosti, može imati različite lokalizacije lezija);

2) sv. epidermidis (utječe na kožu);

Za razlikovanje ove tri vrste koriste se tri testa:

1) fermentacija manitola u anaerobnim uvjetima;

2) proizvodnju plazmakoagulaze;

3) osjetljivost na antibiotik novobiocin.

Za sv. aureus sva tri testa su pozitivna, za St. saprophiticus sva tri testa su negativna, St. epidermidis je osjetljiv na novobiocin.

Stafilokokni antigeni se dijele na:

1) ekstracelularni (varijantno-specifični proteini egzotoksina i egzoenzima);

2) stanični:

a) površinski (glikoproteini) - varijantno-specifični;

b) duboke (teihoične kiseline) – specifične za skupinu.

Čimbenici patogenosti stafilokoka.

1. Ulogu adhezina obavljaju kompleksi površinskih proteina stanične stijenke s teihoinskim kiselinama.

2. Hijaluronidaza je faktor invazije tkiva u međustanične prostore stanica.

3. Enzimi agresije:

1) plazmakoagulaza;

2) fibrinolizin;

3) lecitinaza;

4) fosfataza;

5) fosfotidaza;

6) egzonukleaze;

7) proteaze.

4. Toksini:

1) hematolizini (a, b, g, d, e); uzrokuju hemolizu ljudskih eritrocita, imaju dermatonekrotski učinak;

2) hemotoksini; odgovoran za razvoj toksičnog šoka;

3) leukocidin; sastoji se od dvije frakcije; za jednu su mete makrofagi, za drugu - polimorfonuklearni leukociti;

4) egzofolativni egzotoksin; uzrokuje višestruke lezije kože;

5) enterotoksini (A, B, C, D, E); s alimentarnim putem infekcije izazivaju toksikozu hranom ili trovanje hranom u djece, oštećuju enterocite.

dijagnostika:

1) bakteriološki pregled. srijeda - krv, žumanjak-solni agar;

2) serodijagnostika. Protutijela na α-hemotoksin otkrivaju se u reakciji neutralizacije toksina.

1. Kemoterapija - antibiotici, sulfonamidi, nitrofurani.

2. Fagoterapija - polivalentni fagi.

taksonomija: pripadaju odjelu Firmicutes, obitelji Micrococcacae, rodu Staphylococcus. Ovaj rod uključuje 3 vrste: S. aureus, S. epidermidis i S. saprophyticus.

Morfološka svojstva: Sve vrste stafilokoka su okrugle stanice. U razmazu su raspoređeni u asimetrične grozdove. Stanična stijenka sadrži veliku količinu peptidoglikana, teihoične kiseline povezane s njim, protein A. Gram-pozitivan. Ne formiraju spor, nemaju flagele. Kod nekih sojeva može se naći kapsula. Može formirati L-oblike.

Kulturna svojstva: Stafilokoki su fakultativni anaerobi. Dobro rastu u jednostavnim okruženjima. Na gustim podlogama tvore glatke, konveksne kolonije s raznim pigmentima koji nemaju taksonomski značaj. Može rasti na agaru s visokim sadržajem NaCl. Imaju saharolitičke i proteolitičke enzime. Stafilokoki mogu proizvoditi hemolizine, fibrinolizin, fosfatazu, laktamazu, bakteriocine, enterotoksine, koagulazu.

Stafilokoki su plastični, brzo stječu otpornost na antibakterijske lijekove. Bitnu ulogu u tome imaju plazmidi koji se prenose transduciranjem faga iz jedne stanice u drugu. R-plazmidi određuju otpornost na jedan ili više antibiotika kroz proizvodnju β-laktamaze.

Antigenska struktura... Oko 30 antigena, a to su proteini, polisaharidi i teihoične kiseline. Stanična stijenka stafilokoka sadrži protein A koji se može čvrsto vezati za Fc-fragment molekule imunoglobulina, dok Fab-fragment ostaje slobodan i može se vezati za specifični antigen. Osjetljivost na bakteriofage (tip faga) posljedica je površinskih receptora. Mnogi sojevi stafilokoka su lizogeni (tvorba nekih toksina događa se uz sudjelovanje profaga).

Faktori patogenosti: Uvjetno patogeno. Mikrokapsula štiti od fagocitoze, potiče prianjanje mikroba; komponente stanične stijenke - potiču razvoj upalnih procesa. Enzimi agresije: katalaza – štiti bakterije od djelovanja fagocita, β-laktamaza – uništava molekule antibiotika.

Otpornost. Otpornost na okoliš i osjetljivost na dezinficijense su česte.

Patogeneza. Izvor stafilokokne infekcije su ljudi i neke vrste životinja (bolesnici ili nositelji). Mehanizmi prijenosa - respiratorni, kontaktno-kućanski, prehrambeni.

Imunitet: P ostinfektivan - stanično-humoralan, nestabilan, nije pod stresom.

Klinika. Oko 120 kliničkih manifestacija koje su lokalne, sustavne ili generalizirane. To uključuje gnojno-upalne bolesti kože i mekih tkiva (čirevi, apscesi), lezije očiju, uha, nazofarinksa, urogenitalnog trakta, probavnog sustava (opijanje).


Mikrobiološka dijagnostika . Materijal za istraživanje - gnoj, krv, urin, sputum, stolica.

Bakterioskopska metoda: od ispitivanog materijala (osim krvi) pripremaju se razmazi, obojeni po Gramu. Prisutnost gram "+" uviform koka, smještenih u obliku grozdova.

Bakteriološka metoda: Materijal se inokulira petljom na pločice s krvlju i slanom otopinom žumanjaka kako bi se dobile izolirane kolonije. Usjevi se inkubiraju na 37°C tijekom 24 sata. Sljedeći dan, uzgojene kolonije se pregledavaju na oba medija. Na krvnom agaru bilježi se prisutnost ili odsutnost hemolize. S. aureus tvori zlatne okrugle konveksne neprozirne kolonije na JSA. Oko kolonija stafilokoka s aktivnošću lecitinaze formiraju se zone zamućenja s bisernom bojom. Za konačnu utvrđivanje vrste stafilokoka, 2-3 kolonije se subkulturiraju u epruvete s kosim hranjivim agarom kako bi se dobile čiste kulture uz naknadno određivanje njihovih diferencijalnih karakteristika. S.aureus - "+": stvaranje plazma koagulaze, leticinaze. Fermentacija: glc, minnita, stvaranje a-toksina.

Kako bi se utvrdio izvor bolničke infekcije, čiste kulture stafilokoka izoliraju se od pacijenata i nositelja bakterija, nakon čega se tipiziraju fagom pomoću skupa tipičnih stafilofaga. Fagi se razrijede do titra naznačenog na naljepnici. Svaka od proučavanih kultura se inokulira na hranjivi agar u Petrijevoj zdjelici s travnjakom, osuši, a zatim se kap odgovarajućeg faga nanese petljom na kvadrate (prema broju faga uključenih u set), prethodno označeno olovkom na dnu Petrijeve zdjelice. Usjevi se inkubiraju na 37°C. Rezultati se procjenjuju sljedećeg dana po prisutnosti lize kulture.

Serološka metoda: u slučajevima kronične infekcije utvrđuje se titar anti-a-toksina u krvnom serumu bolesnika. Odrediti titar AT do riboteihoične kiseline (komponenta stanične stijenke).

Liječenje i prevencija... Antibiotici širokog spektra (penicilini otporni na β-laktamazu). U slučaju teških stafilokoknih infekcija koje se ne mogu liječiti antibioticima, može se koristiti antitoksična antistafilokokna plazma ili imunoglobulin imuniziran adsorbiranim stafilokoknim toksoidom. Identifikacija, liječenje bolesnika; provođenje rutinskog pregleda medicinskog osoblja, cijepljenje stafilokoknim toksoidom.

Stafilokokni toksoid: dobiva se iz prirodnog toksoida taloženjem s trikloroctenom kiselinom i adsorpcijom na aluminijevom oksid hidratu.

Cjepivo protiv stafilokoka: suspenzija stafilokoka pozitivnih na koagulazu, inaktivirana zagrijavanjem. Koristi se za liječenje dugotrajnih tekućih bolesti.

Imunoglobulinski humani antistafilokokni : gama-globulinska frakcija krvnog seruma, sadrži stafilokokni toksoid. Pripremljeno od čovjeka. krv, bogata antitijelima. Koristi se za specifično liječenje.

56. Vrste i mehanizmi ishrane bakterija.

Vrste hrane. Mikroorganizmi trebaju ugljikohidrate, dušik, sumpor, fosfor, kalij i druge elemente. Ovisno o izvorima ugljika za ishranu, bakterije se dijele na autotrofi korištenjem ugljičnog dioksida CO2 i drugih anorganskih spojeva za izgradnju svojih stanica, i heterotrofi hraneći se gotovim organskim spojevima. Autotrofne bakterije su nitrifikacijske bakterije koje se nalaze u tlu; sumporne bakterije koje žive u vodi sa sumporovodikom; željezne bakterije koje žive u vodi s željeznim željezom itd.

Ovisno o podlozi koja se oksidira, koji se naziva donor elektrona ili vodika, mikroorganizmi se dijele u dvije skupine. Mikroorganizmi koji koriste anorganske spojeve kao donore vodika nazivaju se litotrofni (od grčkog lithos - kamen), a mikroorganizmi koji koriste organske spojeve kao donore vodika nazivaju se organotrofi.

S obzirom na izvor energije, među bakterijama se razlikuju fototrofi, t.j. fotosintetski (na primjer, modrozelene alge koje koriste svjetlosnu energiju) i kemotrofi, koji zahtijevaju kemijske izvore energije.

Prehrambeni mehanizmi. Ulazak različitih tvari u bakterijsku stanicu ovisi o veličini i topljivosti njihovih molekula u lipidima ili vodi, pH medija, koncentraciji tvari, različitim čimbenicima propusnosti membrane itd. Stanična stijenka omogućuje male molekule i ione. proći kroz hvatanje makromolekula težine veće od 600 D. Glavni regulator unosa tvari u stanicu je citoplazmatska membrana. Konvencionalno se mogu razlikovati četiri mehanizma za prodiranje hranjivih tvari u bakterijsku stanicu.: to je jednostavna difuzija, olakšana difuzija, aktivni transport, grupna translokacija.

Najjednostavniji mehanizam ulaska tvari u stanicu je jednostavna difuzija, u kojem se kretanje tvari događa zbog razlike u njihovoj koncentraciji s obje strane citoplazmatske membrane. Tvari prolaze kroz lipidni dio citoplazmatske membrane (organske molekule, lijekovi) i rjeđe kroz kanale ispunjene vodom u citoplazmatskoj membrani. Pasivna difuzija odvija se bez potrošnje energije.

Olakšana difuzija također nastaje kao posljedica razlike u koncentraciji tvari s obje strane citoplazmatske membrane. Međutim, taj se proces provodi uz pomoć molekula nosača koji su lokalizirani u citoplazmatskoj membrani i posjeduju specifičnost. Svaki nosač prenosi odgovarajuću tvar kroz membranu ili prenosi na drugu komponentu citoplazmatske membrane – samog nosača. Proteini nosači mogu biti permeaze čije je mjesto sinteze citoplazmatska membrana. Olakšana difuzija odvija se bez potrošnje energije, tvari prelaze iz veće koncentracije u nižu.

Aktivni transport javlja se uz pomoć permeaza i usmjeren je na prijenos tvari iz niže koncentracije u višu, t.j. kao da je protiv toka, dakle, ovaj proces prati utrošak metaboličke energije (ATP), koja nastaje kao rezultat redoks reakcija u stanici.

Prijenos (translokacija) grupe je sličan aktivnom transportu, a razlikuje se po tome što se prenesena molekula modificira tijekom procesa prijenosa, na primjer, fosforilira se.

Oslobađanje tvari iz stanice provodi se difuzijom i uz sudjelovanje transportnih sustava.

STYLAB nudi testne sustave za analizu sadržaja Staphylococcus aureus u hrani i okolišu mikrobiološkim metodama, kao i za određivanje DNK ove bakterije PCR-om.

Staphylococcus aureus ( Stafilokokaureus) je sveprisutna gram-pozitivna nepokretna fakultativno anaerobna bakterija koja ne tvori spore koja pripada koki - globularnim bakterijama. Ovaj mikroorganizam je dio normalne mikroflore kože i sluznice u 15-50% zdravih ljudi i životinja.

Neki sojevi ove bakterije su otporni na. Najpoznatiji od njih je Staphylococcus aureus otporan na meticilin (MRSA). Dugo se smatrao uzročnikom bolničkih infekcija, ali se od sredine 90-ih godina prošlog stoljeća zna za bolesti kod ljudi koji nisu bili u bolnicama. Najčešće su to bile gnojne lezije kože, međutim, prilikom češanja lezija, MRSA je ušla u krvotok i zahvatila druge organe. Staphylococcus aureus otporan na meticilin bio je osjetljiv na vankomicin, otrovni antibiotik koji ipak uništava organizam.

Druga bakterija otporna na antibiotike je Staphylococcus aureus (VRSA) otporna na vankomicin. Liječnici i znanstvenici su očekivali ovaj organizam otkad su saznali za postojanje MRSA-e i enterokoka otpornog na vankomicin (VRE), nepatogenog organizma koji živi u crijevima, budući da je horizontalni prijenos omogućio razmjenu gena između ovih bakterija. VRSA je prvi put otkrivena 2002. godine i doista je bila otporna na sve moćne antibiotike koji su postojali u to vrijeme. Ipak, slaba mu je točka bila osjetljivost na stari sulfonamide – baktrim.

Staphylococcus aureus se nalazi u tlu i vodi, često kontaminira hranu i može zaraziti sva tkiva i organe: kožu, potkožno tkivo, pluća, središnji živčani sustav, kosti i zglobove itd. Ova bakterija može uzrokovati sepsu, gnojne lezije kože i infekcije rana.

Optimalna temperatura za Staphylococcus aureus je 30-37 ° C. Može izdržati zagrijavanje do 70-80 ° C 20-30 minuta, suhu toplinu - do 2 sata. Ova bakterija je otporna na isušivanje i salinizaciju i može rasti na podlogama s 5-10% udjela kuhinjske soli, uključujući riblji i mesni balik i druge proizvode. Većina dezinficijensa ubija Staphylococcus aureus.

Staphylococcus aureus luči širok spektar toksina. Membranotoksini (hemolizini) četiri vrste osiguravaju hemolizu; osim toga, membranotoksin α u pokusima uzrokuje nekrozu kože, a kada se primjenjuje intravenozno, smrt životinja. Dva tipa pilinga oštećuju stanice kože. Leukocidin (Panton-Valentinov toksin) uzrokuje poremećaj ravnoteže vode i elektrolita u stanicama leukocita, posebice makrofaga, neutrofila i monocita, što dovodi do njihove smrti.

U skladu s TR CU 021/2011 i drugim dokumentima, sadržaj koagulazno pozitivnih stafilokoka također je ograničen u hrani. To su bakterije koje proizvode koagulazu, enzim koji uzrokuje zgrušavanje krvne plazme. Osim toga S. aureus To uključuje S. delphini, S. hyicus, S. intermedius, S. lutrae, S. pseudintermedius i S. schleiferi podvrsta. koagulansi... Prema nekim izvještajima, S. leei je također koagusalno pozitivna.

Za određivanje Staphylococcus aureus u uzorcima koriste se i mikrobiološke metode, uključujući selektivne medije, i DNK analiza PCR metodom.

Književnost

  1. U REDU. Pozdeev. Medicinska mikrobiologija. Moskva, GEOTAR-MED, 2001.
  2. Jessica Sachs. Klice su dobre i loše. Po. s engleskog Petra Petrova - Moskva: AST: CORPUS, 2013. - 496 str.
  3. Martin M. Dinges, Paul M. Orwin i Patrick M. Schlievert. „Egzotoksini Staphylococcus aureus"Clinical Microbiology Reviews (2000) 13 (1): 16-34.
  4. Jin M, Rosario W, Watler E, Calhoun DH. Razvoj velikog pročišćavanja ureaze na bazi HPLC-a Staphylococcus leei i određivanje strukture podjedinica. Protein Expr Purif. 2004. ožujak; 34 (1): 111-7.

Staphylococcus aureus je 1878. otkrio R. Koch, a 1880. L. Pasteur u gnojnom materijalu. L. Pasteur, zarazivši zeca, konačno je dokazao ulogu stafilokoka kao uzročnika gnojne upale. Naziv "staphylococcus" dao je 1881. A. Ogston (zbog karakterističnog rasporeda stanica), a 1884. F. Rosenbach je detaljno opisao njegova svojstva. Stafilokoki su gram-pozitivne, pravilne geometrijske sferične stanice promjera 0,5 - 1,5 mikrona, obično smještene u obliku nakupina (vidi boju uklj., sl. 92), pozitivne na katalazu, reduciraju nitrate u nitrite, aktivno hidroliziraju proteine ​​i masti, fermentiraju glukozu u anaerobnim uvjetima kako bi se stvorila kiselina bez plina. Obično mogu rasti u prisutnosti 15% NaCl i na 45°C. Sadržaj G + C u DNK je 30 - 39 mol%. Stafilokoki nemaju flagele, ne stvaraju spore. U prirodi su rasprostranjeni. Njihov glavni rezervoar je koža ljudi i životinja i njihove sluznice, komunicirajući s vanjskim okruženjem. Stafilokoki su fakultativni anaerobi, samo jedna vrsta ( Staphylococcus saccharolyticus) Strogi je anaerobik. Stafilokoki nisu zahtjevni za hranjive podloge, dobro rastu na običnim medijima, optimalna temperatura za rast je 35 - 37 ° C, pH 6,2 - 8,4. Kolonije su okrugle, promjera 2 - 4 mm, glatkih rubova, konveksne, neprozirne, obojene u boju nastalog pigmenta. Rast u tekućoj kulturi prati ujednačeno zamućenje, a tijekom vremena nastaje labav talog. Kada rastu na konvencionalnim podlogama, stafilokoki ne stvaraju kapsule, međutim, kada se ubrizgavaju u polutekući agar s plazmom ili serumom, većina sojeva S. aureus tvori kapsulu. Sojevi bez kapsula u polutekućem agaru rastu u obliku kompaktnih kolonija, sojevi u kapsulama - formiraju difuzne kolonije.

Stafilokoki imaju visoku biokemijsku aktivnost: fermentiraju s oslobađanjem kiseline (bez plina) glicerina, glukoze, maltoze, laktoze, saharoze, manitola; tvore različite enzime (plazma koagulaza, fibrinolizin, lecitinaza, lizozim, alkalna fosfataza, DNaza, hijaluronidaza, telurit reduktaza, proteinaza, želatinaza itd.). Ovi enzimi igraju važnu ulogu u metabolizmu stafilokoka i uvelike određuju njihovu patogenost. Enzimi kao što su fibrinolizin i hijaluronidaza odgovorni su za visoku invazivnost stafilokoka. Plazma koagulaza je glavni čimbenik njihove patogenosti: štiti od fagocitoze i pretvara protrombin u trombin, što uzrokuje koagulaciju fibrinogena, uslijed čega je svaka stanica prekrivena proteinskim filmom koji štiti od fagocita.

Klasifikacija. Rod Stafilokok uključuje više od 20 vrsta, koje su podijeljene u dvije skupine - koagulaza-pozitivne i koagulaza-negativne stafilokoke. Za razlikovanje vrsta koriste se različiti znakovi (tablica 22).


Tablica 22

Diferencijalni znakovi glavnih vrsta stafilokoka

Bilješka. (+) - pozitivan znak; (-) - predznak je negativan; + (-) - je prevrtljiv znak ;? - nepoznato.


I. Koagulaza-pozitivni stafilokoki:

1.S. aureus***.

2.S. intermedius**.

3.S. hyicusa.

II. Koagulazno negativni stafilokoki:



* Patogen samo za ljude.

** Patogen samo za životinje.

*** Patogeno za ljude i životinje.

a Nisu svi sojevi S. hyicus imaju koagulazu.


Patogeni za ljude su uglavnom koagulaza-pozitivni stafilokoki, ali mnogi koagulaza-negativni stafilokoki su također sposobni uzrokovati bolesti, osobito u novorođenčadi (neonatalni konjunktivitis, endokarditis, sepsa, bolesti mokraćnog sustava, akutni gastroenteritis itd.). S. aureus ovisno o tome tko mu je glavni nositelj, dijeli se na 10 ekovara ( hominis, bovis, ovis i tako dalje.).

U stafilokoku je pronađeno više od 50 vrsta antigena, u tijelu se stvaraju protutijela na svaki od njih, mnogi od antigena imaju alergena svojstva. Prema specifičnosti, antigeni se dijele na generičke (zajedničke za cijeli rod Stafilokok); križna reakcija - antigeni zajednički s izoantigenima ljudskih eritrocita, kože i bubrega (s njima su povezane autoimune bolesti); vrste i tip-specifični antigeni. Prema tip-specifičnim antigenima otkrivenim u reakciji aglutinacije, stafilokoki su podijeljeni u više od 30 serovarijanti. Međutim, serološka metoda tipizacije stafilokoka još nije dobila široku primjenu. Specifične vrste uključuju protein A koji se formira S. aureus... Ovaj protein se nalazi površno, kovalentno je vezan za peptidoglikan, njegova molekularna težina je oko 42 kDa. Protein A se posebno aktivno sintetizira u logaritamskoj fazi rasta pri 41 °C, termolabilan je i ne uništava ga tripsin; njegovo jedinstveno svojstvo je sposobnost vezanja za Fc-fragment IgG imunoglobulina (IgG 1, IgG 2, IgG 4), u manjoj mjeri za IgM i IgA. Na površini proteina A identificirano je nekoliko regija koje se mogu vezati na regiju polipeptidnog lanca imunoglobulina smještenu na granici CH2 i CH3 domene. Ovo svojstvo našlo je široku primjenu u reakciji koaglutinacije: stafilokoki, napunjeni specifičnim antitijelima, u kojima aktivni centri ostaju slobodni, u interakciji s antigenom daju brzu reakciju aglutinacije.

Interakcija proteina A s imunoglobulinima dovodi do poremećaja u radu sustava komplementa i fagocita u tijelu bolesnika. Ima antigena svojstva, jak je alergen i inducira umnožavanje T i B limfocita. Njegova uloga u patogenezi stafilokoknih bolesti još nije u potpunosti razjašnjena.

Naprezanja S. aureus razlikuju se po osjetljivosti na stafilokokne fage. Za tipkanje S. aureus koristiti međunarodni skup od 23 umjerena faga, koji su podijeljeni u četiri skupine:

1. skupina - fagi 29, 52, 52A, 79, 80;

2. skupina - fagi 3A, 3C, 55, 71;

3. skupina - fagi 6, 42E, 47, 53, 54, 75, 77, 83A, 84, 85;

4. skupina - fagi 94, 95, 96;

izvan grupa - fag 81.

Odnos stafilokoka i faga je osebujan: jedan te isti soj može se lizirati ili jednim fagom, ili istovremeno s nekoliko. No budući da je njihova osjetljivost na fage relativno stabilan znak, fagotipizacija stafilokoka je od velikog epidemiološkog značaja. Nedostatak ove metode je što se ne može upisati više od 65 - 70%. S. aureus... Posljednjih godina dobiveni su setovi specifičnih faga za tipizaciju S. epidermidis.

Čimbenici patogenosti stafilokoka. Staphylococcus aureus je jedinstven mikroorganizam. Može uzrokovati više od 100 različitih bolesti koje pripadaju jedanaest klasa prema Međunarodnoj klasifikaciji iz 1968. Stafilokoki mogu zahvatiti bilo koje tkivo, bilo koji organ. Ovo svojstvo stafilokoka posljedica je prisutnosti velikog kompleksa patogenih čimbenika u njima.

1. Čimbenici adhezije - vezanje stafilokoka za stanice tkiva posljedica je njihove hidrofobnosti (što je veća, to su jača adhezivna svojstva), kao i adhezivnih svojstava polisaharida, moguće i proteina A, te sposobnosti vezanja. fibronektin (receptor nekih stanica).

2. Razni enzimi koji imaju ulogu faktora "agresije i obrane": plazma koagulaza (glavni faktor patogenosti), hijaluronidaza, fibrinolizin, DNaza, enzim sličan lizozimu, lecitinaza, fosfataza, proteinaza itd.

3. Kompleks izlučenih egzotoksina:

eritrociti, nekroza kod intradermalne primjene kuniću, uništenje leukocita, smrt kunića kada se primjenjuje intravenozno. Međutim, pokazalo se da je taj učinak uzrokovan istim čimbenikom - toksinom koji oštećuje membranu. Ima citolitički učinak na različite vrste stanica, što se očituje na sljedeći način. Molekule ovog toksina najprije se vežu na nepoznate receptore membrane ciljne stanice ili se nespecifično apsorbiraju lipidima sadržanim u membrani, a zatim tvore heptamer gljive od 7 molekula, koji se sastoji od 3 domene. Domene koje tvore “kapu” i “rub” nalaze se na vanjskoj površini membrane, a domena “stabljike” služi kao transmembranski kanal pora. Preko njega dolazi do ulaska i izlaska malih molekula i iona, što dovodi do bubrenja i odumiranja stanica s jezgrom, te osmotske lize eritrocita. Pronađeno je nekoliko vrsta membrana oštećenih od ljudi, lizira eritrocite ljudi, zečeva i ovnova. Smrtonosni učinak kod kunića uzrokuje intravenska primjena nakon 3 - 5 minuta. Hemolizira eritrocite ljudi i mnogih životinjskih vrsta. Smrtonosni učinak na kunića pri intravenskoj primjeni uzrokuje nakon 16 - 24 - 48 sati. Vrlo često, kod stafilokoka, ob

b) eksfolijativni toksini A i B razlikuju se po antigenskim svojstvima, odnosu na temperaturu (A - termostabilan, B - termolabilan), lokalizaciji gena koji kontroliraju njihovu sintezu (A kontrolira kromosomski gen, B - plazmid gen). Često u istom soju S. aureus sintetiziraju se oba pilinga. S tim toksinima je povezana i sposobnost stafilokoka da izazovu pemfigus u novorođenčadi, bulozni impetigo, grimizni osip;

c) pravi leukocidin - toksin koji se razlikuje od hemolizina po antigenskim svojstvima, selektivno djeluje na leukocite, uništavajući ih;

d) egzotoksin koji uzrokuje sindrom toksičnog šoka (TSS). Ima svojstva superantigena. TSS karakterizira porast temperature, pad krvnog tlaka, osip na koži s naknadnim ljuštenjem na rukama i nogama, limfocitopenija, ponekad proljev, oštećenje bubrega itd. Više od 50% sojeva sposobno je proizvoditi i lučiti ovaj toksin S. aureus.

4. Jaka alergena svojstva, koja posjeduju i komponente stanične strukture i egzotoksini i drugi otpadni produkti koje izlučuju bakterije. Stafilokokni alergeni su sposobni uzrokovati reakcije preosjetljivosti odgođenog tipa (HPR) i reakcije preosjetljivosti neposrednog tipa (HPN). Stafilokoki su glavni krivci za kožne i respiratorne alergije (dermatitis, bronhijalna astma i dr.). Posebnost patogeneze stafilokokne infekcije i njezina sklonost prijelazu u kronični oblik ukorijenjeni su u učinku GHZ-a.

5. Antigeni unakrsne reakcije (s izoantigenima eritrocita A i B, bubrezi i koža - indukcija autoantitijela, razvoj autoimunih bolesti).

6. Čimbenici koji inhibiraju fagocitozu. Njihova prisutnost može se očitovati u supresiji kemotaksije, zaštiti stanica od apsorpcije fagocitima, u davanju stafilokoka sposobnosti razmnožavanja u fagocitima i blokiranju "oksidativnog praska". Fagocitozu inhibiraju kapsula, protein A, peptidoglikan, teihoične kiseline, toksini. Osim toga, stafilokoki induciraju sintezu supresora fagocitne aktivnosti nekih stanica tijela (na primjer, splenocita). Inhibicija fagocitoze ne samo da sprječava tijelo da očisti stafilokoke, već i remeti procesiranje i prezentaciju antigena T- i B-limfocitima, što dovodi do smanjenja snage imunološkog odgovora.

Prisutnost kapsule u stafilokoku povećava njihovu virulentnost za bijele miševe, čini ih otpornima na djelovanje faga, ne dopušta tipizaciju s aglutinirajućim serumima i maskira protein A.

Teihoične kiseline ne samo da štite stafilokoke od fagocitoze, već, očito, igraju bitnu ulogu u patogenezi stafilokoknih infekcija. Utvrđeno je da se u djece s endokarditisom u 100% slučajeva nalaze antitijela na teihoinsku kiselinu.

7. Mitogeni učinak stafilokoka u odnosu na limfocite (ovaj učinak imaju protein A, enterotoksini i drugi produkti koje luče stafilokoki).

8. Enterotoksini A, B, C1, C2, C3, D, E. Karakteriziraju ih antigenska specifičnost, termička stabilnost, otpornost na djelovanje formalina (ne pretvaraju se u toksoid) i probavni enzimi (tripsin i pepsin), su stabilan u pH rasponu od 4, 5 do 10,0. Enterotoksini su proteini male molekularne mase s molekulskom težinom od 26 do 34 kDa sa svojstvima superantigena.

Također je utvrđeno da postoje genetski uvjetovane razlike u osjetljivosti na stafilokoknu infekciju i prirodi njezina tijeka u ljudi. Konkretno, teške stafilokokne gnojno-septičke bolesti češće se nalaze u osoba s krvnim grupama A i AB, rjeđe u osoba 0 i B skupine.

Sposobnost stafilokoka da izazovu trovanje hranom, kao što je intoksikacija, povezana je sa sintezom enterotoksina. Najčešće su uzrokovani enterotoksinima A i D. Mehanizam djelovanja ovih enterotoksina slabo je poznat, ali se razlikuje od djelovanja drugih bakterijskih enterotoksina koji remete funkciju sustava adenilat ciklaze. Sve vrste stafilokoknih enterotoksina uzrokuju sličan obrazac trovanja: mučnina, povraćanje, bol u gušterači, proljev, ponekad glavobolja, groznica, grč mišića. Ova svojstva stafilokoknih enterotoksina posljedica su njihovih superantigenskih svojstava: izazivaju prekomjernu sintezu interleukina-2, što uzrokuje intoksikaciju. Enterotoksini stimuliraju glatke mišiće crijeva i povećavaju gastrointestinalni motilitet. Trovanje je najčešće povezano s upotrebom mliječnih proizvoda zaraženih stafilokokom (sladoled, peciva, kolači, sir, svježi sir i dr.) i konzervirane hrane s maslacem. Infekcija mliječnih proizvoda može biti povezana s mastitisom kod krava ili s pioinflamatornim bolestima kod ljudi povezanih s proizvodnjom hrane.

Dakle, obilje različitih patogenih čimbenika u stafilokoku i njihova visoka alergena svojstva određuju osobitosti patogeneze stafilokoknih bolesti, njihovu prirodu, lokalizaciju, težinu tijeka i kliničke manifestacije. Avitaminoza, dijabetes, smanjeni imunitet doprinose razvoju stafilokoknih bolesti.

Otpornost na stafilokoke. Među bakterijama koje ne stvaraju spore, stafilokoki, poput mikobakterija, imaju najveću otpornost na vanjske čimbenike. Dobro podnose sušenje i ostaju održive i virulentne tjednima i mjesecima u suhoj finoj prašini, izvoru zaraze prašine. Izravna sunčeva svjetlost ih ubija samo na mnogo sati, dok difuzno svjetlo djeluje vrlo slabo. Također su otporni na visoke temperature: zagrijavanje do 80 ° C izdržavaju oko 30 minuta, suha toplina (110 ° C) ih ubija u roku od 2 sata; dobro podnose niske temperature. Osjetljivost na kemijska dezinficijensa jako varira, na primjer, 3% otopina fenola ih ubija u roku od 15 - 30 minuta, a 1% vodena otopina kloramina - za 2 - 5 minuta.

Značajke epidemiologije. Budući da su stafilokoki stalni stanovnici kože i sluznica, bolesti uzrokovane njima mogu biti ili autoinfekcije (s raznim ozljedama kože i sluznica, uključujući mikrotraume), ili egzogena infekcija uzrokovana kontaktnim kućanstvom, kapljicama u zraku, zrakom. prašinu ili alimentarne (za trovanje hranom) metode infekcije.

Prijenos patogenih stafilokoka je od posebne važnosti, jer nositelji, osobito u medicinskim ustanovama (razne kirurške klinike, rodilišta i dr.) iu zatvorenim skupinama, mogu uzrokovati stafilokokne infekcije. Nošenje patogenih stafilokoka može biti privremeno ili povremeno, ali osobe kod kojih je trajno (rezidentni nositelji) predstavljaju posebnu opasnost za druge. Kod takvih ljudi stafilokoki dugo i u velikom broju opstaju na sluznicama nosa i grla. Razlog dugotrajnog prijevoza nije sasvim jasan. Može biti posljedica slabljenja lokalnog imuniteta (nedostatak sekretornog IgA), disfunkcije sluznice, povećanja adhezivnih svojstava stafilokoka ili zbog nekog drugog svojstva.

Značajke patogeneze i kliničke slike. Stafilokoki lako ulaze u organizam i kroz najmanja oštećenja kože i sluznice te mogu uzrokovati razne bolesti – od juvenilnih akni (akni) do teškog peritonitisa, endokarditisa, sepse ili septikopiemije, kod kojih smrtnost doseže 80%. Stafilokoki uzrokuju čireve, hidradenitis, apscese, flegmon, osteomijelitis; u ratno vrijeme - česti krivci gnojnih komplikacija rana; stafilokoki imaju vodeću ulogu u gnojnoj kirurgiji. Posjedujući alergena svojstva, mogu uzrokovati psorijazu, hemoragični vaskulitis, erizipele, nespecifični poliartritis. Stafilokokna infekcija hrane čest je uzrok trovanja hranom. Stafilokoki su glavni krivci sepse, uključujući i novorođenčad. Za razliku od bakteremije (bakterije u krvi), koja je simptom bolesti i opažena je kod mnogih bakterijskih infekcija, sepsa (septikemija - truljenje) je samostalna bolest s određenom kliničkom slikom koja se temelji na oštećenju organa retikuloendotelni sustav (sustav mononuklearnih fagocita - SMF). Kod sepse postoji gnojni fokus, iz kojeg patogen povremeno ulazi u krvotok, širi se po cijelom tijelu i utječe na retikuloendotelni sustav (SMF), u čijim se stanicama umnožava, oslobađajući toksine i alergene. U ovom slučaju, klinička slika sepse slabo ovisi o vrsti patogena, ali je određena porazom određenih organa.

Septikopiemija je oblik sepse, u kojoj uzročnik uzrokuje gnojna žarišta u različitim organima i tkivima, odnosno sepsa je komplicirana gnojnim metastazama.

Bakterijemija u sepsi i septikopiemiji može biti kratkotrajna i dugotrajna.

Postinfektivni imunitet postoji, to je zbog humoralnih i staničnih čimbenika. Važnu ulogu u njemu imaju antitoksini, antimikrobna antitijela, antitijela protiv enzima, kao i T-limfociti i fagociti. Intenzitet i trajanje imuniteta na stafilokoke nisu dovoljno istraženi, jer je njihova antigenska struktura previše raznolika, a ne postoji unakrsna imunost.

Laboratorijska dijagnostika. Glavna metoda je bakteriološka; razvijene i implementirane serološke pretrage. Po potrebi (u slučaju intoksikacije) koristi se biološki uzorak. Materijal za bakteriološko ispitivanje je krv, gnoj, sluz iz grla, nosa, iscjedak iz rana, ispljuvak (kod stafilokokne upale pluća), izmet (kod stafilokoknog kolitisa), u slučaju trovanja hranom - povraćanje, izmet, ispiranje želuca, sumnjiva hrana . Materijal se inokulira na krvni agar (hemoliza), na mliječno-solni (mlijeko-žumanjak-sol) agar (naCl inhibira rast stranih bakterija, bolje se detektiraju pigment i lecitinaza). Izolirana kultura identificira se prema karakteristikama vrste, utvrđuje se prisutnost glavnih znakova i čimbenika patogenosti (zlatni pigment, fermentacija manitola, hemoliza, plazma koagulaza), provjerava se osjetljivost na antibiotike, ako je potrebno, provodi se tipizacija faga. Od seroloških reakcija, RPHA i IFM se koriste za dijagnosticiranje gnojno-septičkih bolesti, posebice za određivanje antitijela na teihoinsku kiselinu ili na antigene specifične za vrstu.

Za određivanje enterotoksigenosti stafilokoka koriste se tri metode:

1) serološki - uz pomoć specifičnih antitoksičnih seruma u reakciji precipitacije u gelu otkriva se enterotoksin i utvrđuje njegov tip;

2) biološka - intravenska primjena filtrata bujonske kulture stafilokoka mačkama u dozi od 2 - 3 ml po 1 kg tjelesne težine. Toksini izazivaju povraćanje i proljev kod mačaka;

3) neizravna bakteriološka metoda - izolacija čiste kulture stafilokoka iz sumnjivog proizvoda i određivanje čimbenika njegove patogenosti (formiranje enterotoksina korelira s prisutnošću drugih patogenih čimbenika, posebice RNAaze).

Najjednostavnija i najosjetljivija je serološka metoda za otkrivanje enterotoksina.

Liječenje. Za liječenje stafilokoknih bolesti uglavnom se koriste beta-laktamski antibiotici na koje prije svega treba odrediti osjetljivost. Kod teških i kroničnih stafilokoknih infekcija pozitivan učinak daje specifična terapija - primjena autovakcine, toksoida, antistafilokoknog imunoglobulina (ljudskog), antistafilokokne plazme.

Specifična profilaksa. Za stvaranje umjetne imunosti protiv stafilokokne infekcije koristi se stafilokokni toksoid (tekući i u tabletama), ali stvara antitoksični imunitet samo protiv stafilokoka, liziranih uglavnom fagima I. skupine. Korištenje cjepiva od ubijenih stafilokoka ili njihovih antigena, iako dovodi do pojave antimikrobnih protutijela, ali samo protiv onih serovarijanti od kojih je cjepivo napravljeno. Problem pronalaženja visoko imunogenog cjepiva učinkovitog protiv mnogih vrsta patogenih stafilokoka jedan je od najvažnijih problema moderne mikrobiologije.

Stafilokoki - sferni gram-pozitivni: nepokretne asporogene bakterije iz roda Staphylococcus iz porodice Micrococcaceae. Otkrili su 1880. nezavisno jedan od drugog L. Pasteur i A. Ogston, a detaljnije ih je proučio F. Rosenbach 1884. godine.

Godine 1976. sljedeće tri vrste službeno su odobrene od strane Međunarodnog odbora za taksonomiju stafilokoka: S. aureus, S. epidermidis i S. saprophyticus. Do danas je opisano 19 vrsta stafilokoka izoliranih od životinja i ljudi.

Stafilokoki su važni u zaraznoj patologiji životinja: ti mikrobi mogu zahvatiti gotovo svaki organ i svako tkivo. Uzrokuju čireve, apscese, flegmonu, osteomijelitis, mastitis, endometritis, bronhitis, upalu pluća, meningitis, pijemiju i septikemiju, enterokolitis, toksikozu hrane, stafilokokozu ptica.

Morfologija. Stafilokoki su sferne stanice promjera 0,5-1,5 mikrona. U pripravcima iz gnojnih i mladih bujonskih kultura nalaze se pojedinačno, u parovima, u kratkim pečenicama ili u malim hrpama; u razmazima iz agar kultura - i to u obliku zasebnih grozdova nepravilnog oblika, nalik na grozd. Nemaju flagele i kapsule, ne stvaraju spore. Dobro su obojene anilinskim bojama, gram-pozitivne, u starim kulturama pojedinačne stanice su obojene gram-negativnim.

Uzgoj. Fakultativni anaerobi. Dobro rastu na univerzalnim hranjivim podlogama. na temperaturi od 35-40 ° C (rast je moguć u rasponu od 6,5-46 ° C), optimalni pH je 7,0-7,5. Dodavanje glukoze ili krvi u hranjivi medij ubrzava rast stafilokoka. Karakteristično svojstvo većine sojeva je sposobnost rasta u prisutnosti 15% natrijevog klorida ili 40% žuči. Na MPA formiraju okrugle, blago uzdižuće se iznad površine agara, kolonije glatkih rubova, promjera 2-5 mm. Kolonije mogu biti obojene jer stafilokoki proizvode karotenoidne pigmente netopive u vodi. Najintenzivniji pigmenti nastaju na agaru s 10% obranog mlijeka nakon 24-satne inkubacije na 37°C i na krumpiru na temperaturi od 20-25"C u aerobnim uvjetima na svjetlu. S. aureus sintetizira zlatne ili narančaste pigmente, Također se nalaze sojevi bez pigmenta; S.epidermidis tipično proizvodi bijeli ili žuti pigment; većini sojeva S. saprophyticus nedostaje pigment.

Kada rastu s MP6, stafilokoki prvo uzrokuju difuzno zamućenje nakon čega slijedi taloženje labavog flokulantnog sedimenta. Raste karakteristično u stupcu želatine. Nakon 18-26 sati, uz obilan rast na injekciji, ocrtava se početno razrjeđenje medija, koje se zatim povećava, a do 4.-5. dana tijekom ubrizgavanja nastaje lijevak ispunjen tekućinom. Patogeni sojevi stafilokoka čine značajnu zonu hemolize na krvnom agaru.

Biokemijska svojstva. Stafilokoki fermentiraju s stvaranjem kiseline bez plina glukoze, maltoze, fruktoze, saharoze, ksiloze, glicerina, manitola i ne razgrađuju dulcit, salicin, inulin, rafinozu. Dodijelite amonijak i. sumporovodik, ne stvaraju indol, reduciraju nitrate u nitrite; proizvode katalazu, fosfatazu, ureazu; patogeni sojevi - arginaza. Koagulirajte i peptolizujte mlijeko, ukapnite želatinu, ponekad zgrušani krvni serum.

Međutim, proteolitička aktivnost stafilokoka može jako varirati.

Stvaranje toksina. Patogeni stafilokoki sintetiziraju i luče visoko aktivne egzotoksine i enzime. Među egzotoksinima postoje četiri vrste hemotoksina (stafilolizini), leukocidin i enterotoksini.

Hemotoksini uključuju alfa, beta, gama i delta hemolizine.

Alfa-hemolizin izaziva lizu eritrocita ovaca, svinja, pasa, ima smrtonosno i dermatonekrotično djelovanje, uništava leukocite, agregate i lizira trombocite.

Beta-hemolizin lizira eritrocite ljudi, ovaca, goveda i smrtonosan je za zečeve.

Gama-hemolizin se nalazi u sojevima izoliranim od ljudi, njegova biološka aktivnost je niska.

Delta-hemolizin uzrokuje lizu eritrocita kod ljudi, konja, ovaca, zečeva i uništava leukocite.

Svi stafilokokni hemolizini su membranski toksini: oni su u stanju lizirati membrane eukariotskih stanica.

Leukocidin je nehemolitički egzotoksin koji uzrokuje degranulaciju i uništavanje leukocita.

Entrotoksini - termostabilni polipeptidi, nastaju tijekom razmnožavanja enterotoksigenih stafilokoka u hranjivim medijima, hrani (mlijeko, vrhnje, svježi sir, itd.), crijevima. Otporan na djelovanje probavnih enzima. Poznato je šest antigenskih varijanti. Enterotoksini uzrokuju toksikozu hrane kod ljudi, mačke, osobito mačići, a na njih su osjetljivi i štenci pasa.

U čimbenike patogenosti stafilokoka ubrajaju se i enzimi koagulaza, hijaluronidaza, fibrinolizin, DNaza, lecitovitelaza itd. Koagulaza je bakterijska proteinaza koja koagulira krvnu plazmu životinja. Prisutnost koagulaze jedan je od najvažnijih i stalnih kriterija za patogenost stafilokoka.

Antigenska struktura. Kod stafilokoka, najbolje proučavani antigeni stanične stijenke: peptidoglikan, teihoične kiseline i protein A. Peptidoglikan je uobičajeni antigen vrste za stafilokoke. Teihoične kiseline su polisaharidni antigeni specifični za vrstu. S.aureus sadrži ribitol teihoičnu kiselinu (polisaharid A), S. epidermidis sadrži glicerol teihoinsku kiselinu koja se naziva polisaharid B. Protein A nalazi se u Staphylococcus aureusu. To je protein niske molekularne težine koji se veže na Fc fragmente IgG sisavaca. Sojevi koji proizvode velike količine proteina A otporniji su na fagocitozu. U mukoidnim sojevima Staphylococcus aureus također je identificiran kapsularni polipeptidni antigen.

Stabilnost. Stafilokoki su relativno otporni mikroorganizmi. Izravna sunčeva svjetlost će ih ubiti tek nakon nekoliko sati. U prašini ostaju 50-100 dana, u osušenom gnoju - više od 200 dana, u bujonskoj kulturi - 3-4 mjeseca, na polu-tekućem agaru - 6 mjeseci. U tekućem mediju na 70 ° C umiru nakon 1 sata, na 85 ° C - nakon 30 minuta, na 100 ° C - za nekoliko sekundi. Od dezinficijensa 1% otopina formalina i 2% otopina natrijevog hidroksida ubijaju ih u roku od 1 sata, 1% otopina kloramina - nakon 2-5 minuta. Stafilokoki su vrlo osjetljivi na briljantno zeleno i pioktanin.

Mnogi sojevi su osjetljivi na benzilpenicilin, polusintetske peniciline, streptomicin, kloramfenikol, tetraciklin, fuzidin i druge antibiotike, kao i lijekove nitrofurana. Međutim, postoje i mnogi sojevi otporni na antibiotike. Obično ih karakterizira rezistencija na više lijekova, koju kontrolira R-plazmid i može se širiti transdukcijom. Stafilokoki koji sintetiziraju penicilinazu (beta-laktamazu) sposobni su uništiti neke peniciline. Stafilokoki su vrlo otporni na sulfonamide.

Patogenost. Glavna uloga u zaraznoj patologiji životinja i ljudi pripada S. aureus. Stafilokokne infekcije također mogu uzrokovati S. epidermidis i S. saprophyticus. Stvaranje pigmenta i razgradnja ugljikohidrata ne može poslužiti kao kriterij za patogenost stafilokoka. Glavni čimbenici koji određuju patogenost ovih bakterija je sposobnost proizvodnje egzotoksina i enzima koagulaze, fibrinolizina i hijaluronidaze.

Na stafilokoke su osjetljivi konji, goveda i mali preživači, svinje, patke, guske, purice, kokoši, a od laboratorijskih životinja - zečevi, bijeli miševi, mačići. Kod intradermalne primjene kulture patogenih stafilokoka kunićima dolazi do razvoja upale, a potom i nekroze kože, pri intravenskom ubrizgavanju filtrata kulture u kunića dolazi do akutnog trovanja i smrti nakon nekoliko minuta.

Patogeneza. Stafilokoki ulaze u tijelo kroz oštećenu kožu i sluznicu, enterotoksini - s hranom.

Stafilokokne infekcije se češće razvijaju i teže su u uvjetima smanjenja prirodne otpornosti organizma i u stanjima imunodeficijencije. U patogenezi stafilokoknih procesa vodeću ulogu imaju egzotoksini i patogeni enzimi. Alergije također mogu biti važne. Svi ti čimbenici zajedno određuju hoće li se pojaviti lokalna gnojno-upalna žarišta, sustavne bolesti unutarnjih organa, sepsa ili toksikoza hranom.

Laboratorijska dijagnostika. Pregledati eksudat rane, gnoj apscesa, rane, mlijeko za mastitis, iscjedak iz genitalija s endometritisom, krv iz vratne vene sa septikemijom.

Od patološkog materijala se pripremaju brisevi, boje se po Gramu i mikroskopiraju. Izravna mikroskopija omogućuje samo preliminarni odgovor. Istodobno posijati materijal u krvne, mliječno-solne i žumanjčano-solne agar ploče.

Patogeni sojevi na krvnom agaru formiraju zonu hemolize oko kolonija. Formiranje pigmenta se broji na mliječno-solnim agar pločama. Na agaru od žumanjka i soli većina patogenih stafilokoka izaziva reakciju lecitovitelaze, koja se očituje stvaranjem zamućene zone oko kolonije s duginim vjenčićem duž periferije. Kako bi se dobila čista kultura i daljnje proučavanje, materijal iz karakteristične kolonije se probira na MPA. Mikroskopira se čista kultura, nakon čega se provodi reakcija koagulacije plazme s citratom krvne plazme kunića. U prisutnosti enzima koagulaze, plazma se zgrušava. Dodatno, DNA-aza i razgradnja manitola određuju se u anaerobnim uvjetima.

Otkrivaju se smrtonosna svojstva kulture na kunićima i provodi se dermatonekrotični test. U tu svrhu, 0,2 ml suspenzije kulture od 2 milijarde ubrizgava se intradermalno u obrijano područje kože kunića. U pozitivnom slučaju, na mjestu uboda nastaje infiltracija i dolazi do nekroze.

S. aureus, za razliku od drugih vrsta, fermentira manitol u anaerobnim uvjetima. Patogeni stafilokoki, osim hemolitičke i lecitinazne aktivnosti, imaju sposobnost koagulacije plazme, izazivanja nekroze kože i uništavanja DNK.

Smrt zeca ukazuje na prisutnost smrtonosnog učinka toksina.

Ako je potrebno utvrditi izvor stafilokokne infekcije i načine njezina širenja, izolirane kulture se podvrgavaju tipizaciji faga. Međunarodni skup stafilokoknih faga sastoji se od 22 tipa, podijeljenih u 4 skupine. Enterotoksini u hrani i usjevima određuju se u RDP sa stafilokoknim antiserumima na enterotoksine A, B, C, D, E, F.

Zbog široke rasprostranjenosti sojeva stafilokoka otpornih na lijekove, osjetljivost izoliranih kultura na antibiotike utvrđuje se na čvrstom mediju metodom papirnatih diskova ili replika. To je vrlo važno za odabir racionalne kemoterapije.

Imunitet. Zdrave životinje prirodno su otporne na stafilokokne infekcije. To je zbog barijerne funkcije kože, sluznice, fagocitoze i prisutnosti specifičnih antitijela sintetiziranih kao rezultat latentne imunizacije. Upalna reakcija na mjestu unošenja patogena također sprječava širenje mikroba u tijelu.

Imunitet kod stafilokoknih infekcija je pretežno antitoksičan, niske napetosti i kratkog vijeka. Stoga nisu isključeni česti recidivi. Ipak, visoki titri antitoksina u krvi životinja povećavaju njihovu otpornost na ponavljajuće bolesti. Antitoksini ne samo da neutraliziraju egzotoksine, već također uzrokuju brzu mobilizaciju fagocita.

Stafilokoki također izazivaju preosjetljivost odgođenog tipa. Poznato je da ponovljene stafilokokne lezije kože dovode do izraženijih destruktivnih promjena.

Biološka sredstva. Predloženi pročišćeni adsorbirani stafilokokni toksoid i autovakcina - zagrijani na 70-75 ° C ispiranje agar kulture stafilokoka izoliranog iz tijela bolesne životinje. Ponekad se lokalno koriste fag i antivirusni filtrat 2-3-tjedne kulture stafilokoka.