Úvod
Kapitola 1. Základní principy farmaceutické analýzy
1.1 Kritéria farmaceutické analýzy
1.2 Chyby ve farmaceutické analýze
1.3 Obecné zásady testování pravosti léčivých látek
1.4 Zdroje a příčiny špatné kvality léčivých látek
1.5 Obecné požadavky pro testování čistoty
1.6 Metody farmaceutické analýzy a jejich klasifikace
Kapitola 2. Fyzikální metody analýzy
2.1 Ověření fyzikální vlastnosti nebo měření fyzikálních konstant léčivých látek
2.2 Nastavení pH média
2.3 Stanovení čirosti a zákalu roztoků
2.4 Odhad chemických konstant
Kapitola 3. Chemické metody analýzy
3.1 Vlastnosti chemických metod analýzy
3.2 Gravimetrická (váhová) metoda
3.3 Titrační (objemové) metody
3.4 Gasometrická analýza
3.5 Kvantitativní elementární analýza
Kapitola 4. Fyzikální a chemické metody analýzy
4.1 Vlastnosti fyzikálně-chemických metod analýzy
4.2 Optické metody
4.3 Absorpční metody
4.4 Metody založené na emisi záření
4.5 Metody založené na využití magnetického pole
4.6 Elektrochemické metody
4.7 Separační metody
4.8 Tepelné metody analýzy
Kapitola 5
5.1 Kontrola biologické kvality léky
5.2 Mikrobiologická kontrola léčivých přípravků
Seznam použité literatury
Úvod
Farmaceutická analýza je věda o chemické charakterizaci a měření biologicky aktivních látek ve všech fázích výroby: od kontroly surovin až po posouzení kvality výsledné léčivé látky, studium její stability, stanovení dat expirace a standardizace hotové lékové formy. Farmaceutická analýza má své specifické rysy, které ji odlišují od jiných typů analýz. Tyto vlastnosti spočívají v tom, že jsou analyzovány látky různé chemické povahy: anorganické, organoprvkové, radioaktivní, organické sloučeniny od jednoduchých alifatických až po složité přírodní biologicky aktivní látky. Rozsah koncentrací analytů je extrémně široký. Předmětem farmaceutické analýzy nejsou pouze jednotlivé léčivé látky, ale také směsi obsahující různý počet složek. Léků každým rokem přibývá. To vyžaduje vývoj nových metod analýzy.
Metody farmaceutických rozborů je nutné systematicky zdokonalovat vzhledem k neustálému zvyšování požadavků na kvalitu léčiv a rostou požadavky jak na stupeň čistoty léčivých látek, tak na kvantitativní obsah. Proto je nutné široce využívat nejen chemické, ale i citlivější fyzikální a chemické metody posuzování kvality léčiv.
Požadavky na farmaceutickou analýzu jsou vysoké. Měl by být dostatečně konkrétní a citlivý, přesný ve vztahu ke standardům stanoveným Globálním fondem XI, VFS, FS a dalšími NTD, prováděný v krátkých časových úsecích s minimálním počtem subjektů léky a činidla.
Farmaceutická analýza v závislosti na úkolech zahrnuje různé formy kontroly kvality léčiv: lékopisnou analýzu, postupnou kontrolu výroby léčiv, analýzu jednotlivých lékových forem, expresní analýzu v lékárně a biofarmaceutický rozbor.
Lékopisná analýza je nedílnou součástí farmaceutické analýzy. Jde o soubor metod pro studium léčiv a lékových forem uvedených ve Státním lékopisu nebo jiné regulační a technické dokumentaci (VFS, FS). Na základě výsledků získaných během lékopisné analýzy je učiněn závěr o souladu léčivého přípravku s požadavky Globálního fondu nebo jiné regulační a technické dokumentace. V případě odchylky od těchto požadavků není povoleno použití léku.
Závěr o kvalitě léčivého přípravku lze učinit pouze na základě rozboru vzorku (vzorku). Postup jeho výběru je uveden buď v soukromém článku, nebo v obecném článku Global Fund XI (vydání 2). Odběr vzorků se provádí pouze z nepoškozených zapečetěných a zabalených v souladu s požadavky obalových jednotek NTD. Současně je třeba důsledně dodržovat požadavky na preventivní opatření pro práci s jedovatými a omamnými látkami, jakož i na toxicitu, hořlavost, výbušnost, hygroskopičnost a další vlastnosti drog. Pro testování shody s požadavky NTD se provádí vícestupňové vzorkování. Počet kroků je určen typem balení. V poslední fázi (po kontrole od vzhled) odeberte vzorek v množství potřebném pro čtyři kompletní fyzikální a chemické analýzy(pokud se vzorek odebírá za kontrolní organizace, pak za šest takových analýz).
Z „angro“ obalu se odebírají bodové vzorky odebrané ve stejném množství z horní, střední a spodní vrstvy každé obalové jednotky. Po ustavení homogenity se všechny tyto vzorky smíchají. Sypké a viskózní drogy se odebírají pomocí vzorníku vyrobeného z inertní materiál. Tekuté léčivé přípravky se před odběrem vzorků důkladně promíchají. Pokud je to obtížné, odebírají se bodové vzorky z různých vrstev. Výběr vzorků hotových léčivých přípravků se provádí v souladu s požadavky soukromých článků nebo kontrolních pokynů schválených Ministerstvem zdravotnictví Ruské federace.
Provedení lékopisné analýzy umožňuje stanovit pravost léčiva, jeho čistotu, určit kvantitativní obsah farmakologicky účinné látky nebo složek, které tvoří lékovou formu. I když má každá z těchto fází svůj specifický účel, nelze na ně pohlížet izolovaně. Navzájem spolu souvisí a doplňují se. Tedy například bod tání, rozpustnost, pH média vodný roztok atd. jsou kritéria pro autenticitu i čistotu léčivé látky.
Kapitola 1. Základní principy farmaceutické analýzy
1.1 Kritéria farmaceutické analýzy
V různých fázích farmaceutické analýzy jsou v závislosti na nastavených úkolech důležitá kritéria jako selektivita, citlivost, přesnost, čas strávený analýzou a množství analyzovaného léčiva (dávková forma).
Selektivita metody je velmi důležitá při analýze směsí látek, protože umožňuje získat skutečné hodnoty každé ze složek. Pouze selektivní metody analýzy umožňují stanovit obsah hlavní složky v přítomnosti produktů rozkladu a jiných nečistot.
Požadavky na přesnost a citlivost farmaceutické analýzy závisí na předmětu a účelu studie. Při testování stupně čistoty léčiva se používají metody vysoce citlivé, umožňující nastavit minimální obsah nečistot.
Při provádění krokové kontroly výroby, stejně jako při provádění expresních analýz v lékárně důležitá role má faktor času, který je vynaložený na provedení analýzy. K tomu jsou voleny metody, které umožňují provádět rozbor v co nejkratších časových intervalech a zároveň s dostatečnou přesností.
Při kvantitativním stanovení léčivé látky se používá metoda, která se vyznačuje selektivitou a vysokou přesností. Citlivost metody je zanedbávána vzhledem k možnosti provedení analýzy s velkým vzorkem léčiva.
Měřítkem citlivosti reakce je mez detekce. Znamená nejnižší obsah, při kterém lze touto metodou detekovat přítomnost stanovované složky s danou hladinou spolehlivosti. Místo takového pojmu jako „objevené minimum“ byl zaveden termín „mez detekce“, používá se také místo termínu „citlivost.“ Citlivost kvalitativních reakcí je ovlivněna takovými faktory, jako jsou objemy roztoků reagujících složek. , koncentrace činidel, pH média, teplota, doba trvání To je třeba vzít v úvahu při vývoji metod pro kvalitativní farmaceutickou analýzu. Ke stanovení citlivosti reakcí se stále více používá index absorbance (specifický nebo molární) stanovený spektrofotometrickou metodou. . chemický rozbor citlivost se nastavuje hodnotou meze detekce dané reakce. Vyznačují se vysokou citlivostí fyzikální a chemické metody analýza. Nejcitlivější jsou radiochemické a hmotnostní spektrální metody, které umožňují stanovit 10-810-9 % analytu, polarografické a fluorimetrické 10-610-9 %; citlivost spektrofotometrických metod Yu-310-6%, potenciometrické 10-2%.
Termín "přesnost analýzy" současně zahrnuje dva pojmy: reprodukovatelnost a správnost získaných výsledků. Reprodukovatelnost charakterizuje rozptyl výsledků analýzy ve srovnání s průměrem. Správnost odráží rozdíl mezi skutečným a zjištěným obsahem látky. Přesnost analýzy pro každou metodu je odlišná a závisí na mnoha faktorech: kalibraci měřicích přístrojů, přesnosti vážení nebo měření, zkušenostech analytika atd. Přesnost výsledku analýzy nemůže být vyšší než přesnost nejméně přesného měření.
Takže při výpočtu výsledků titrimetrických stanovení je nejméně přesným číslem počet milimetrů.
5 / 5 (hlasy: 1 )
Dnes je zcela běžné najít nekvalitní léky a falešné pilulky, které způsobují, že spotřebitel pochybuje o jejich účinnosti. Existují určité metody analýzy léčiv, které umožňují určit složení léčiva, jeho vlastnosti s maximální přesností, a to odhalí míru vlivu léčiva na lidské tělo. Pokud máte určité stížnosti na drogu, pak její chemická analýza a objektivní stanovisko mohou být důkazem v jakémkoli soudním řízení.
Ke stanovení kvalitativních a kvantitativních charakteristik léku ve specializovaných laboratořích se široce používají následující metody:
Metody analýzy léčiv umožní stanovit pravost složení deklarovaného výrobcem a určit nejmenší odchylky od norem a výrobní technologie. Laboratoř ANO „Centrum chemických expertíz“ má vše potřebné vybavení pro přesné vyšetření jakéhokoli druhu léku. Vysoce kvalifikovaní specialisté používají k analýze léčiv různé metody a v co nejkratším čase poskytnou objektivní odborný posudek.
Strana 1
Jedním z nejdůležitějších úkolů farmaceutické chemie je vývoj a zdokonalování metod hodnocení kvality léčiv.
Pro stanovení čistoty léčivých látek se používají různé fyzikální, fyzikálně-chemické, chemické metody analýzy nebo jejich kombinace. GF nabízí následující metody kontroly kvality léčiv.
Fyzikální a fyzikálně-chemické metody. Patří mezi ně: stanovení teplot tání a tuhnutí, jakož i teplotních limitů destilace; stanovení hustoty, indexy lomu (refraktometrie), optická rotace (polarimetrie); spektrofotometrie - ultrafialová, infračervená; fotokolorimetrie, emisní a atomová absorpční spektrometrie, fluorimetrie, nukleární magnetická rezonanční spektroskopie, hmotnostní spektrometrie; chromatografie - adsorpční, distribuční, iontoměničová, plynová, vysoce výkonná kapalina; elektroforéza (frontální, zonální, kapilární); elektrometrické metody (potenciometrické stanovení pH, potenciometrická titrace, amperometrická titrace, voltametrie).
Kromě toho je možné použít metody, které jsou alternativou k lékopisným metodám, které mají někdy pokročilejší analytické vlastnosti (rychlost, přesnost analýzy, automatizace). V některých případech farmaceutická společnost zakoupí zařízení založené na metodě, která ještě není zahrnuta do lékopisu (například metoda Ramanovy spektroskopie - optický dichroismus). Někdy je vhodné při zjišťování pravosti nebo testování na čistotu nahradit chromatografickou metodu spektrofotometrickou. Lékopisný způsob stanovení nečistot těžkých kovů jejich srážením ve formě sulfidů nebo thioacetamidů má řadu nevýhod. Pro stanovení nečistot z těžkých kovů zavádí mnoho výrobců fyzikálně-chemické metody analýzy, jako je atomová absorpční spektrometrie a atomová emisní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem.
Důležitou fyzikální konstantou, která charakterizuje pravost a stupeň čistoty drog, je bod tání. Čistá látka má zřetelný bod tání, který se mění v přítomnosti nečistot. U léčivých látek obsahujících určité množství přípustných nečistot reguluje GF rozsah teplot tání do 2 °C. Ale v souladu s Raoultovým zákonem (AT = iK3C, kde AT je pokles teploty krystalizace; K3 je kryoskopická konstanta; C je koncentrace) při i = 1 (neelektrolyt), hodnota AT nemůže být stejná. pro všechny látky. Souvisí to nejen s obsahem nečistot, ale i s povahou léčiva samotného, tedy s hodnotou kryoskopické konstanty K3, která odráží molární pokles teploty tání léčiva. Tedy, při stejné AT = 2"C pro kafr (K3 = 40) a fenol (K3 = 7,3), hmotnostní podíly nečistot nejsou stejné a činí 0,76 a 2,5 %, v tomto pořadí.
U látek tajících rozkladem se obvykle uvádí teplota, při které se látka rozkládá a dochází k prudké změně jejího vzhledu.
Kritéria čistoty jsou také barva léčiva a/nebo průhlednost kapalných lékových forem.
Fyzikální konstanty, jako je index lomu světelného paprsku v roztoku testované látky (refraktometrie) a specifická rotace způsobená schopností řady látek nebo jejich roztoků otáčet polarizační rovinu, když jimi prochází gausicky polarizované světlo ( polarimetrie) může sloužit jako určité kritérium pro čistotu léčiva. Metody pro stanovení těchto konstant souvisejí s optickými metodami analýzy a používají se také pro stanovení pravosti a kvantitativní analýzy léčiv a jejich dávkových forem.
Důležitým kritériem dobré kvality řady léčiv je jejich obsah vody. Změna tohoto indikátoru (zejména během skladování) může změnit koncentraci účinné látky a následně i farmakologickou aktivitu a učinit lék nevhodným pro použití.
Chemické metody. Patří sem: kvalitativní reakce na pravost, rozpustnost, stanovení těkavých látek a vody, stanovení obsahu dusíku v organických sloučeninách, titrační metody (acidobazická titrace, titrace v nevodných rozpouštědlech, komplexometrie), nitritometrie, číslo kyselosti, číslo saponifikace , etherové číslo, jodové číslo atd.
biologické metody. Biologické metody kontroly kvality léčiv jsou velmi rozmanité. Jsou mezi nimi testy na toxicitu, sterilitu, mikrobiologickou čistotu.
Plošné zavádění principů medicíny založené na důkazech do klinické praxe je z velké části dáno ekonomickým aspektem. Správné rozdělení finančních prostředků závisí na tom, jak přesvědčivé jsou vědecké údaje o klinické a nákladové efektivitě metod diagnostiky, léčby a prevence. Konkrétní rozhodnutí by v klinické praxi neměla být činěna ani tak na základě osobních zkušeností nebo názoru odborníků, ale na základě důsledně ověřených vědeckých údajů. Pozornost by měla být věnována nejen zbytečnosti, ale také nedostatku důkazů podložených důkazy o výhodách používání různých metod léčby a prevence. V současné době má toto ustanovení zvláštní význam, protože klinické studie financují především výrobci zdravotnického zboží a služeb.
Koncept „medicína založená na důkazech“ nebo „medicína založená na důkazech“ byl navržen kanadskými vědci z Mac Master University v Torontu v roce 1990. Medicína založená na důkazech není nová věda, ale spíše nový přístup, směr nebo technologie pro shromažďování, analýzu, shrnutí a interpretaci vědeckých informací. Potřeba medicíny založené na důkazech vyvstala především v souvislosti s nárůstem objemu vědeckých informací, zejména v oblasti klinické farmakologie. Každým rokem se do klinické praxe zavádí stále více nových léků. Jsou aktivně studovány v četných klinických studiích, jejichž výsledky jsou často nejednoznačné a někdy dokonce přímo opačné. Aby bylo možné získané informace použít, musí být nejen pečlivě analyzovány, ale také shrnuty.
Pro racionální použití nových léků, dosažení jejich maximálního terapeutického účinku a zabránění jejich nežádoucím účinkům je nutné již ve fázi testování získat komplexní popis léku, údaje o všech jeho terapeutických a případných negativních vlastnostech. Jedním z hlavních způsobů získávání nových léků je screening biologicky aktivních látek. Nutno podotknout, že tento způsob hledání a tvorby nových léků je časově velmi náročný – průměrně jeden lék hodný pozornosti připadá na 5-10 tisíc zkoumaných sloučenin. Prostřednictvím screeningu a náhodného pozorování byly nalezeny cenné léky, které se dostaly do lékařské praxe. Nahodilost však nemůže být hlavním principem při výběru nových léků. Jak se věda vyvíjela, bylo zcela zřejmé, že výroba léků by měla být založena na identifikaci biologicky aktivních látek zapojených do životně důležitých procesů, studiu patofyziologických a patochemických procesů, které jsou základem vývoje různých onemocnění, a také na hloubkové studii. mechanismů farmakologického účinku. Úspěchy v biomedicínských vědách umožňují stále více provádět přímou syntézu látek se zlepšenými vlastnostmi a určitou farmakologickou aktivitou.
Preklinické studium biologické aktivity látek se obvykle dělí na farmakologické a toxikologické. Takové rozdělení je podmíněné, protože tyto studie jsou vzájemně závislé a jsou založeny na stejných principech. Výsledky studie akutní toxicity léčivých látek poskytují informace pro následné farmakologické studie, které zase určují intenzitu a dobu trvání studie chronické toxicity látky.
Účelem farmakologických studií je určit terapeutickou aktivitu léčiva a také jeho účinek na hlavní anatomické a fyziologické systémy těla. V procesu studia farmakodynamiky látky je nejen stanovena její specifická aktivita, ale je také možná nežádoucí reakce spojené s farmakologickými účinky. Účinek zkoušeného léku na nemocné a zdravé organismy se může lišit, proto by farmakologické testy měly být prováděny na modelech příslušných onemocnění nebo patologických stavů.
V toxikologických studiích se stanoví povaha a závažnost možných škodlivých účinků léčiv na pokusná zvířata. Toxikologické studie mají tři fáze:
studie akutní toxicity látky s jednou injekcí;
stanovení chronické toxicity sloučeniny, která zahrnuje opakované použití léku po dobu 1 roku a někdy i více;
stanovení specifické toxicity léčiva - onkogenicita, mutagenita, embryotoxicita včetně teratogenních účinků, senzibilizační vlastnosti, ale i schopnost vyvolat lékovou závislost.
Studium škodlivého účinku studovaného léku na tělo pokusných zvířat nám umožňuje určit, které orgány a tkáně jsou na tuto látku nejcitlivější a čemu je třeba věnovat zvláštní pozornost v klinických studiích.
Účelem klinických studií je vyhodnotit terapeutickou nebo profylaktickou účinnost a snášenlivost nového farmakologického přípravku, stanovit nejracionálnější dávky a režimy jeho použití a také jej porovnat se stávajícími léky. Při hodnocení výsledků klinických studií je třeba vzít v úvahu následující charakteristiky: přítomnost kontrolní skupiny, jasná kritéria pro zařazení a vyloučení pacientů, zařazení pacientů do studií před volbou léčby, náhodný (slepý) výběr léčby , adekvátní metoda randomizace, slepá kontrola, slepé hodnocení výsledků léčby, informace o komplikacích a nežádoucích účincích, informace o kvalitě života pacientů, informace o počtu pacientů, kteří ze studie vypadli, adekvátní statistická analýza ukazující na názvy použitých textů a programů, statistická síla, informace o velikosti identifikovaného efektu.
Programy klinických studií pro různé skupiny léků se mohou výrazně lišit. Některá významná ustanovení však musí být vždy zohledněna. Cíle a cíle testu by měly být jasně uvedeny; stanovit kritéria pro výběr pacientů; uveďte způsob rozdělení pacientů do hlavní a kontrolní skupiny a počet pacientů v každé skupině; způsob stanovení účinných dávek léku, doba trvání studie; kontrolní metoda (otevřená, slepá, dvojitá atd.), srovnávací lék a placebo, metody pro kvantitativní analýzu účinku studovaných léků (indikátory podléhající registraci); metody statického zpracování dat.
Při hodnocení publikací o léčebných metodách je třeba mít na paměti, že vyřazovací kritéria pro pacienty ze studie jsou specifikována poměrně často a zařazovací kritéria jsou méně obvyklá. Pokud není jasné, na kterých pacientech byl lék studován, pak je obtížné hodnotit informační obsah získaných dat. Většina výzkumů se provádí ve specializovaných fakultních nemocnicích resp vědeckých center, kde se pacienti samozřejmě liší od pacientů na okresních ambulancích. Po úvodních testech se proto provádí další a další výzkumy. První - multicentrická, kdy se díky zapojení různých nemocnic a ambulantních rysů každé z nich vyhlazují. Poté otevřete. S každou fází se zvyšuje důvěra, že výsledky výzkumu budou aplikovatelné na jakoukoli nemocnici.
Otázka stanovení dávky a režimu studovaného léku je velmi důležitá a obtížná. Existují pouze nejobecnější doporučení, především začít s nízkou dávkou, která se postupně zvyšuje, dokud se nedosáhne požadovaného nebo vedlejšího účinku. Při vývoji racionálních dávek a režimů pro studované léčivo je žádoucí stanovit šíři jeho terapeutického účinku, rozmezí mezi minimální a maximální bezpečnou terapeutickou dávkou. Délka užívání studovaného léčiva by neměla přesáhnout dobu trvání toxikologických testů na zvířatech.
V procesu klinických zkoušek nových léků se rozlišují 4 vzájemně související fáze (etapy).
Fáze prvních klinických studií se nazývá „pozorování“ nebo „klinicko-farmakologické“. Jeho účelem je stanovit snášenlivost studovaného léku a zda má terapeutický účinek.
Ve fázi II se provádějí klinické studie na 100-200 pacientech. Nezbytnou podmínkou je přítomnost kontrolní skupiny, která se výrazně neliší složením a velikostí od skupiny hlavní. Pacienti v experimentální skupině (hlavní) a kontrolní by měli být stejní, pokud jde o pohlaví, věk, počáteční základní léčbu (je žádoucí ji ukončit 2–4 týdny před začátkem studie). Skupiny jsou náhodně tvořeny pomocí tabulek náhodných čísel, ve kterých má každá číslice nebo každá kombinace číslic stejnou pravděpodobnost výběru. randomizace, popř náhodné rozdělení, - hlavní způsob zajištění srovnatelnosti srovnávacích skupin.
V klinických studiích se nové léky pokoušejí porovnávat s placebem, což umožňuje posoudit skutečnou účinnost terapie, například její vliv na délku života pacientů ve srovnání s žádnou léčbou. Potřeba dvojitě zaslepené metody je dána tím, že pokud lékaři vědí, jakou léčbu pacient dostává (aktivní lék nebo placebo), pak mohou nedobrovolně zbožné přání.
Nezbytnou podmínkou pro provedení adekvátních klinických studií je randomizace. Z úvahy je nutné rovnou vyloučit články o studiích, ve kterých rozdělení pacientů do srovnávacích skupin nebylo náhodné, nebo způsob rozdělení nevyhovoval (např. pacienti byli rozděleni podle dnů v týdnu přijetí do nemocnice). nemocnice) nebo o tom nejsou vůbec žádné informace. Ještě méně vypovídající jsou studie s historickou kontrolou (když se pro srovnání použijí dříve získaná data nebo výsledky studií provedených v jiných zdravotnických zařízeních). V mezinárodní literatuře je randomizace uváděna v 9/10 článků o farmakoterapii, ale pouze 1/3 článků specifikuje způsob randomizace. Pokud je kvalita randomizace na pochybách, pak experimentální a kontrolní skupina s největší pravděpodobností nejsou srovnatelné a je třeba hledat jiné zdroje informací.
Velký význam má klinická významnost a statistická významnost výsledků léčby. Výsledky klinické studie nebo populační studie jsou prezentovány formou informací o frekvenci výsledků a statistické významnosti rozdílů mezi skupinami pacientů. Uvádí autor statisticky významné, ale malé rozdíly jako klinicky významné? Statisticky významné je to, co skutečně s vysokou pravděpodobností existuje. Klinicky významné je, že svou velikostí (např. velikostí snížení úmrtnosti) přesvědčuje lékaře o nutnosti změny praxe ve prospěch nového způsobu léčby.
Před zahájením testu by měly být dohodnuty metody, kritéria pro hodnocení účinnosti léku, doba měření příslušných ukazatelů. Kritéria hodnocení jsou klinická, laboratorní, morfologická a instrumentální. Často se účinnost zkoumaného léku posuzuje snížením dávky jiných léků. Pro každou skupinu drog existují povinná a doplňková (nepovinná) kritéria.
Účelem klinických studií fáze III je získat další údaje o účinnosti a vedlejší účinek farmakologické činidlo, jsou objasněny rysy účinku léčiva a jsou určeny relativně vzácné nežádoucí účinky. Vlastnosti léku u pacientů s poruchami krevního oběhu, funkce ledvin a jater se studují, hodnotí se interakce s jinými léky. Výsledky léčby se zaznamenávají do jednotlivých registračních karet. Na konci studie jsou výsledky shrnuty, statisticky zpracovány a prezentovány ve formě zprávy. Odpovídající ukazatele získané za stejné časové období v hlavní a kontrolní skupině jsou porovnány staticky. Pro každý indikátor se vypočítá průměrný rozdíl za studované časové období (ve srovnání s výchozí hodnotou před léčbou) a posoudí se spolehlivost zaznamenané dynamiky v každé skupině. Poté se porovnávají průměrné rozdíly v hodnotách specifických ukazatelů kontrolní a experimentální skupiny, aby se posoudil rozdíl v účinku zkoumané látky a placeba nebo srovnávacího léku. Zpráva o výsledcích klinických hodnocení nového léku je vypracována v souladu s požadavky Farmakologické komise a předložena komisi s konkrétními doporučeními. Doporučení pro klinické použití se považuje za oprávněné, pokud nový přípravek:
Účinnější než známé léky podobného účinku;
Má lepší toleranci než známé léky (se stejnou tolerancí);
Účinné v případech, kdy je léčba známými léky neúspěšná;
Cenově výhodnější, má jednoduchý způsob léčby nebo pohodlnější lékovou formu;
V kombinované terapii zvyšuje účinnost stávajících léků, aniž by zvyšovala jejich toxicitu.
Po schválení použití nového léku ve veterinární praxi a jeho zavedení nastupují studie fáze IV – účinek léku je studován v různých situacích v praxi.
V souladu s Global Fund XI jsou metody výzkumu léčiv rozděleny na fyzikální, fyzikálně-chemické a chemické.
Fyzikální metody. Zahrnují metody pro stanovení teploty tání, tuhnutí, hustoty (u kapalných látek), indexu lomu (refraktometrie), optické rotace (polarimetrie) atd.
Fyzikální a chemické metody. Lze je rozdělit do 3 hlavních skupin: elektrochemické (polarografie, potenciometrie), chromatografické a spektrální (UV a IR spektrofotometrie a fotokolorimetrie).
Polarografie je metoda pro studium elektrochemických procesů založená na stanovení závislosti síly proudu na napětí aplikovaném na studovaný systém. Elektrolýza studovaných roztoků se provádí v elektrolyzéru, jehož jedna z elektrod je kapací rtuťová elektroda a pomocná je rtuťová elektroda s velkým povrchem, jejíž potenciál se prakticky nemění při proudění nízká hustota projde. Výsledná polarografická křivka (polarogram) má tvar vlny. Vyčerpání vlny souvisí s koncentrací reaktantů. Metoda se používá pro kvantitativní stanovení mnoha organických sloučenin.
Potenciometrie - metoda stanovení pH a potenciometrická titrace.
Chromatografie je proces separace směsí látek, ke kterému dochází, když se pohybují v proudu mobilní fáze podél stacionárního sorbentu. K separaci dochází v důsledku rozdílu v určitých fyzikálně-chemických vlastnostech separovaných látek, což vede k jejich nestejné interakci s látkou stacionární fáze, tedy k rozdílu v době zdržení vrstvy sorbentu.
Podle mechanismu, který je základem separace, se rozlišuje adsorpční, rozdělovací a iontoměničová chromatografie. Podle způsobu separace a použitého zařízení se rozlišuje chromatografie na kolonách, na papíře v tenké vrstvě sorbentu, plynová a kapalinová chromatografie, vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC) atd.
Spektrální metody jsou založeny na selektivní absorpci elektromagnetického záření analyzovanou látkou. Existují spektrofotometrické metody založené na absorpci monochromatického UV a IR záření látkou, kolorimetrické a fotokolorimetrické metody založené na absorpci nemonochromatického záření ve viditelné části spektra látkou.
Chemické metody. Na základě použití chemické reakce pro identifikaci drog. U anorganických léčiv se používají reakce na kationty a anionty, u organických léčiv na funkční skupiny, přičemž se používají pouze takové reakce, které jsou doprovázeny vizuálním vnějším efektem: změna barvy roztoku, vývoj plynů, srážení, atd.
Pomocí chemických metod se stanovují číselné ukazatele olejů a esterů (číslo kyselosti, jodové číslo, číslo zmýdelnění), charakterizující jejich dobrou kvalitu.
NA chemické metody kvantitativní analýza léčivých látek zahrnuje gravimetrickou (hmotnostní) metodu, titrimetrické (objemové) metody včetně acidobazické titrace ve vodném a nevodném prostředí, gazometrickou analýzu a kvantitativní elementární analýzu.
gravimetrická metoda. Z anorganických léčivých látek lze touto metodou stanovit sírany jejich přeměnou na nerozpustné barnaté soli a silikáty předkalcinací na oxid křemičitý. Gravimetrii je možné využít pro analýzu přípravků solí chininu, alkaloidů, některých vitamínů atd.
titrační metody. Toto je nejběžnější metoda ve farmaceutické analýze, která se vyznačuje nízkou pracností a poměrně vysokou přesností. Titrimetrické metody lze rozdělit na srážecí titrace, acidobazické titrace, redoxní titrace, kompleximetrii a nitritometrii. S jejich pomocí se provádí kvantitativní hodnocení stanovením jednotlivých prvků nebo funkčních skupin obsažených v molekule léčiva.
Titrace srážek (argentometrie, merkurimetrie, merkurometrie atd.).
Acid - zásaditá titrace (titrace ve vodném prostředí, acidimetrie - použití kyseliny jako titračního činidla, alkalimetrie - použití zásady k titraci, titrace ve směsných rozpouštědlech, nevodná titrace atd.).
Redoxní titrace (jodometrie, jodchlorometrie, bromatometrie, manganatometrie atd.).
Komplexometrie. Metoda je založena na tvorbě silných, ve vodě rozpustných komplexů kationtů kovů s Trilonem B nebo jinými komplexony. K interakci dochází ve stechiometrickém poměru 1:1 bez ohledu na náboj kationtu.
Nitritometrie. Metoda je založena na reakcích primárních a sekundárních aromatických aminů s dusitanem sodným, který se používá jako titrační činidlo. Primární aromatické aminy tvoří diazosloučeninu s dusitanem sodným v kyselém prostředí a sekundární aromatické aminy tvoří za těchto podmínek nitrososloučeniny.
Gasometrická analýza. Má omezené použití ve farmaceutické analýze. Předmětem této analýzy jsou dva plynné přípravky: kyslík a cyklopropan. Podstata plynometrické definice spočívá v interakci plynů s absorpčními roztoky.
Kvantitativní elementární analýza. Tato analýza se používá pro kvantitativní stanovení organických a organoprvkových sloučenin obsahujících dusík, halogeny, síru, dále arsen, vizmut, rtuť, antimon a další prvky.
Biologické metody kontroly kvality léčivých látek. Biologické hodnocení kvality léčiv se provádí podle jejich farmakologické aktivity nebo toxicity. Biologické mikrobiologické metody se používají v případech, kdy nelze použít fyzikální, chemické a fyzikálně-chemické metody k závěru, že lék je dobrý. Biologické testy se provádějí na zvířatech kočkách, psech, holubech, králících, žábách atd.), jednotlivých izolovaných orgánech (děložní roh, část kůže) a buněčných skupinách (krevní buňky, kmeny mikroorganismů atd.). Biologická aktivita se stanoví zpravidla porovnáním účinku testovaného a standardního vzorku.
Testům na mikrobiologickou čistotu jsou podrobeny léky, které nejsou při výrobě sterilizovány (tablety, kapsle, granule, roztoky, extrakty, masti atd.). Tyto testy jsou zaměřeny na stanovení složení a množství mikroflóry přítomné v LF. Současně je stanovena shoda s normami omezujícími mikrobiální kontaminaci (kontaminaci). Test zahrnuje kvantitativní stanovení životaschopných bakterií a hub, identifikaci určitých typů mikroorganismů, střevní flóry a stafylokoků. Test se provádí za aseptických podmínek v souladu s požadavky Global Fund XI (v. 2, str. 193) dvouvrstvou agarovou metodou v Petriho miskách.
Test sterility je založen na průkazu nepřítomnosti životaschopných mikroorganismů jakéhokoli druhu v léčivém přípravku a je jedním z klíčové ukazatele Bezpečnost LS. Těmto testům jsou podrobeny všechny léky pro parenterální podání, oční kapky, masti atd. Ke kontrole sterility se používá bioglykol a tekuté Sabouraudovo médium metodou přímé inokulace na živná média. Pokud má léčivo výrazný antimikrobiální účinek nebo je nalito do nádob o objemu více než 100 ml, použije se metoda membránové filtrace (GF, v. 2, s. 187).
