100 RUR ilk sifariş bonusu
İşin növünü seçin Diplom işi Dövr işi Referat Magistrlik dissertasiyası Təcrübə hesabatı Məqalə Hesabatı İcmal İmtahan işi Monoqrafiya Problemlərin həlli Biznes plan Sualların cavabları Yaradıcı iş İnşalar Rəsm İnşalar Tərcümə Təqdimatlar Mətbəx Digər Mətnin unikallığının artırılması PhD dissertasiyası Laboratoriya işi Onlayn köməklik
Qiyməti öyrənin
Xəstəxanalarda stafilokokkoz 40-60%
Hal-hazırda Staphylococcus cinsi artıq Micrococcaceae ailəsinə aid deyil (90-cı illərin əvvəllərindən). Micrococcaceae ailəsi mövcud deyil (onun komponentləri arasında genetik əlaqə olmadığı üçün). Onlar yalnız bir neçə müstəvidə bölünərək qram-müsbət aerob və fakultativ anaerob kokklar əsasında birləşdilər.
Mikrokoklar genetik olaraq aktinomisetlərlə əlaqəlidir.
Staphylococcus genetik olaraq Clostridia ilə əlaqəlidir.
Oksigensiz bir mühitdə fusobakteriyaları, pravotellaları, bakterioidləri (sərt anaeroblar) araşdırarkən, antibiotiklər (aminoqlikozidlər) olan bir mühitdən istifadə etməsəniz, stafilokoklar (və enterobakteriyalar) hər şeyi öldürəcək !!!
Tükənmə əkin üsulu
Stafilokoklar fakultativ anaeroblardır. Micrococcus - sərt aeroblar
Fərqləndirmə aerob və anaerob qlükoza parçalanması ilə bir testdir. Bütün Staphylococcus qlükoza + hələ də vazelin yağı altında. Mikrokok deyil.
Staphylococcus - 30-dan çox növ, alt növləri ilə - 44. Onlar 33 testlə fərqlənirlər.
Halotolerans həddi 7,5% və daha çox NaCl olan mühitdir.
Micrococcus - hələ də 6,5% artır və yalnız Staphylococcus daha yüksəkdir. (LSA - 10% NaCl). Bəzi növlər 15% NaCl-dir.
Süd-duz agar - mikrokoklar böyüyür, çünki aşağıda NaCl var.
Burjuaziya - Çapman mühiti - mannitol-duzlu agar (1% mannitol) - 7,5% NaCl. Mannitol = qliserin kimi mannitol = qliserin
Stafilokokların məqsədli izolyasiyası (məsələn, sanitar və bakterioloji tədqiqatlar zamanı). Turşu əmələ gəlməsi səbəbindən sarılıq zonası. Onun alternativi olaraq bizdə var - ZhSA.
Bunlar. kokkuları ≥ 7,5 NaCl olan mühitdə təcrid etsək, onlar həmişə qlükoza + olur, çünki bu Staphylococcus və Micrococcus inkişaf etmir
Mikrokokların morfologiyası stafilokoklardan bir qədər fərqlidir - həm koloniyalar, həm də hüceyrələr. daha böyük stafilokokklara nisbətən.
Hər bir insanın dərisində 7-10 növ mikrokok var (və ümumilikdə təxminən 15 növ var), M. luteus üstünlük təşkil edir - maneə törətməyən mühitlərdə böyük sarı koloniyalar (köhnə adı hava sarcinləridir, əsl sarsinlər böyümür. aerob şərait !!!). Qrama görə bərabər rənglənirlər. Yığınlar, dəftərlər, paketlər şəklində. Digərləri ağ, rəngsiz və s. M.livi - emaye ağ. M.cristi - qırmızı koloniyalar.
Staphylococcus aureus qrama görə qeyri-bərabər boyalar (çintz rəngi). Dəstələr - tez-tez S. aureus istehsal edir, həmçinin yığınlar, dəftərlər, bağlamalar və s. Maye stendləri olan stafilokoklar - tək, cüt, yığın.
Sarısı olmayan mühitlərdə S. aureus piqmenti əmələ gəlmir və koloniyalar boz rəngdədir.
Karotenoidlər suda həll olunmur və koloniya ətrafındakı mühit heç vaxt Staphylococcus və Micrococcus ilə ləkələnmir.
Angelina Hess - 19-cu əsrin ortalarında çərşənbələrə ağar gətirdi
Mikrokok həm də UPMF - sepsisdir. In vitro hər şeyə həssasdır. Heyvanlarda penisilin - bir enjeksiyon üçün 5 vahid - penisilin ixtirası səviyyəsində - sepsisi müalicə edir. Amma in vivo müalicə çox çətindir. Kardiyak bypass əməliyyatı olan xəstələrdə sepsis. Ürək-ağciyər aparatına girsələr.
Planokokklar - bizi maraqlandırmır - onlar dəniz suyunda və insanlar üçün təhlükəli deyil
Stomatokoklar - 1 növ. Onlar CA-da yaxşı böyüyürlər (CA-da hər şey böyüyür), lakin duz mühitində böyümürlər. Onların heç bir xüsusi klinik əhəmiyyəti yoxdur. UPMF. Çox nadir hallarda gingivit və stomatitə səbəb olur (lakin daha tez-tez bu xəstəliklər anaeroblar və viruslar tərəfindən törədilir).
S. aureus subsp. aureus
S. aureus subsp. anaerobius - aerob şəraitdə böyümür (ciddi anaerob)
Stafilokoklar arasında saprofitlər yoxdur - hamısı fürsətçi... Xəstəliyin 86-dan çox nozoloji forması.
S. aureus və S. epidermidis - bütün stafilokokkozların 45% -i. Qida zəhərlənməsi - yalnız S. aureus (S. epidermidis - yalnız körpələrdə səbəb ola bilər). Enterotoksinlər yalnız S. aureus tərəfindən istehsal olunur.
Hər bir insanın dərisində 10-12 növ stafilokok yaşayır.
Burnun ön hissələri əsas biotopdur. Vahid sahəyə ən çoxu var.
S. epidermidis də S. aureus ilə birlikdə nozokomial infeksiyaların yayılmasına səbəb ola bilər.
Yenidoğulmuşlarda: 70-ci illərdə Moskvada əvvəllər konjonktivit S. epidermidis; xəstəxanada pnevmoniya S. epidermidis indi.
Plazmidlər təxminən 2 saat sürətlə ötürülür (Staphylococcus aureus 2 saat başqa bir insanın dərisində qaldı və yeni plazmid aldı).
Daşıyıcı.
Doğum müəssisələrində stafilokokk üçün müntəzəm tədqiqat aparılmır (yalnız alovlanma halında) - 345 nömrəli əmr. Cərrahi profildə indiyə qədər 720 sifariş var (dünyanın heç bir yerində həyata keçirilmir). Stafilokok infeksiyalarının sayı həm "burjua", həm də ölkəmizdə sanitariyadan asılı olmayaraq eynidir.
Test sistemlərinə görə 12-15 növə qədər stafilokokk və bir neçə növ mikrokokk fərqləndirilə bilər.
691 sifariş - doğum evləri üçün ləğv edildi. Yeni 345 əmrin bakterioloji hissəsi yoxdur, buna görə də bakteriologiyada hər kəs hələ də 691 əmri rəhbər tutur.
Stafilokokk daşıyıcılığı üçün adi müayinə ləğv edilib.
Koaqulaz-müsbət stafilokoklar indi 5 növdür.
|
koaqulaz |
maltoza |
flokulyasiya |
İnsan qanı ilə CA-da hemoliz |
||||
|
W / W gün |
Demək olar ki, 100% |
||||||
|
± 50% -dən az |
|||||||
|
W/W gecəsi |
S. aureus çox nadir hallarda koaqulaz vermir - kütləvi antibiotik terapiyası olan bir xəstənin ilkin mədəniyyətləri ilə. Buna görə də, biz tıxacın üzərinə yenidən səpdik və sonra plazmanı yenidən taxdıq. Əgər yoxsa, S. aureus deyil.
Yüksək protein tərkibli və işıqlı media üzərində piqment (YSA, zülallı zərdab mühiti)
Koaqulaz-mənfi stafilokoklar arasında bəziləri də piqment əmələ gətirə bilər. S promagenes - istənilən mühitdə sarı piqment əmələ gətirir
Asetoin = asetilmetilkarbinol - VP (Voges-Proskauer) reaksiyası
Onun qlükoza ilə mühiti yarı mayedir. Şoran ilə aşılandıqda, həmişə qlükoza müsbətdir, ən azı sütunun yuxarı hissəsində.
Qlükoza ilə yarı maye His ortasına son mənfi cavab yalnız 5-ci gündə verilir.
Qaz varsa - biz stafilokokların qarışıq və ya olmadığını güman edirik.
Mannitol ilə yarı maye mühit 1974-cü ildə xaric edildi - son mənfi cavab yalnız 5-ci gündə idi. Yalnız kuboka yerləşdirilir - səhər cavabı.
Gliserin (1%) ilə sıx mühit (hər hansı şəkər və spirt ilə əvəz edilə bilər). Staphylococcus və Micrococcus cinsləri daxilində diferensiasiya üçün maye və yarı maye mühitlər heç vaxt istifadə edilmir. Göstərici - bromothymol mavi, pH - neytral; və ya bromkresol qırmızı, bromotimol qırmızı. Lövhələrlə əkirik - hər qabda 10 mədəniyyətə qədər. Radial zolaq - hər qabda 6 mədəniyyətə qədər. Stafilokok ətrafında - sarılıq. Mikrokoklar qliserindən istifadə etmirlər.
Test sistemlərində S. aurecularis, S. aureus ilə 95-99% oxşarlıq verir və yalnız plazma laxtalanma reaksiyası ilə fərqləndirilə bilər.
Koaqulaz-mənfi stafilokoklar
Müəyyən şərtlər altında piqment istehsal edə bilərlər.
Stafilokoklarda 1-2 testlə növlərə differensiasiya etmək mümkün deyil.
Plazmada Mannitol + lopa şəklində böyüyür, cəmi 6-7 növ.
|
koaqulaz |
Qələvi fosfataza |
trehaloza |
||||
|
20% -dən çox suşlar |
||||||
|
5-10% suşlar |
||||||
|
95-100% suşlar |
||||||
|
5% suşlar |
||||||
|
S. saprophiticus |
5% suşlar |
S. aureusun 100%-i hemolitik aktivliyə malikdir.
S. saprophiticus çox nadirdir. Gənc qadınlarda sistit və uretrit - antibiotiklərə və kemoterapiyaya həssasdır
Koaqulaz-mənfi olanlar koaqulaz-müsbət ola bilməz.
S. epidermidis, 720-ci sırada nə yazılsa da, heç vaxt koaqulaz müsbət olmur
Spor olmayan hüceyrə 10-12 gün yaşaya bilər.
Qələvi fosfataz yalnız S. epidermidis üçün xarakterikdir.
Qələvi fosfataz - biokimyada ALP testlərindən paranitrofenol fosfat və ya fenolftalein fosfat - 100 ml agara 50 mq, boşqab başına 20 ştama qədər.
Para-nitrofenol fosfat → para-nitrofenol (sarı) və mühitin rəngi limon sarısıdır.
Fenolftalein fosfat → fenolftalein (rəngsiz). 3-10% ammonyak məhlulunu qələviləşdirin (stəkan qapağına damcılayın) Moruq koloniyaları.
10% fenolftalein fosfat məhlulu ala bilərsiniz. İllərlə soyuducuda saxlanılır. 100 ml agara 0,5 ml məhlul.
S. epidermidis təbii olaraq novobiosinə həssasdır.
Lesitovitelaza (yolk faktoru) - beynəlxalq təsnifatda istifadə edilmir, yalnız burada.
20-25% S. epidermidis lesitinaz müsbətdir.
S. aureusun 80% - insan mənşəli - lesitovitelaza verir. Lesitinaz-mənfi S. aureus - heyvanlardan.
Digər stafilokoklar da verə bilər. Yəni lecitovitelase +, onda 80% S. aureus, 20% digər stafilokoklardır.
Luminal ALCA fincanları - təmizləyici zona (proteaz) - bizim üçün vacib deyil.
Bulanıqlıq - lipazlar üstünlük təşkil edir - də vacib deyil.
Burjua qan mühiti - qoyun eritrositlərindən. S. aureusun insan ştammlarının yalnız α-hemotoksin istehsal etdiyi düşünülürdü, lakin indi β-hemotoksin də var. Bu, yalnız qoyun eritrositlərində sökülə bilər.
β-hemotoksin bir gün ərzində natamam hemoliz zonası verir və sonra onu iş gününün sonuna qədər soyuducuya qoysanız, zona tamamilə parlaq olacaq.
S. aureus 2 ferment istehsal edir
1) termolabil DNaz (nükleaz) - bütün stafilokoklarda və digər mikrobların əksəriyyətində olur.
2) Termostabil DNase (nukleaz) - yalnız S. aureusda mövcuddur. Qaynatma və hətta qısa müddətli avtoklavlama ilə məhv edilməyəcək.
Və əmrlərimizə görə, yalnız termolabil DNase müəyyən edilir (heç bir mənası yoxdur).
Qızdırılmış qidada (PTI faktı gizlədildikdə) stafilokok məhv edilir, lakin toksinlər qalır. Termostabil DNazın olması ilə S. aureusun olub-olmadığını müəyyən etmək olar.
Yüksək polimerləşdirilmiş DNT sifarişləri ilə 1 ml mühitə 1-2 mq (pH = 8.0). Lövhə mədəniyyəti (və ya inyeksiya). 24 saat. Biz inkişaf edirik, 3N HCl-ni bir fincana tökürük, HCl ilə DNT çöküntüsü əmələ gəlir və DNase işlədiyi yerdə təmizlənmə zonasını görürük. S.aureusda onun radiusu 10-12 mm, S.epidermidisdə 4-5 mm-dir. S. aureusun öldürülmüş mədəniyyəti ilə çuxurun ətrafında - 7-8 mm.
S. epidermidis yalnız termolabil DNase, S. aureus - hər iki DNase - zona daha böyükdür.
Səhifə 38/91
ÖZƏL TIBBİ MİKROBİOLOGİYA
PATOGEN KOKKİ
İnsanlarda müxtəlif klinik təzahürlü xəstəliklərə səbəb olan patogen kokklara aşağıdakılar daxildir: 1) stafilokoklar, 2) streptokoklar, 3) pnevmokoklar, 4) meningokokklar və 5) qonokoklar.
Onları tinktorial əlamətinə (rənglənməsinə) görə iki alt qrupa bölmək olar: qram-müsbət kokklar (stafilokoklar, streptokoklar və pnevmokoklar), qram-mənfi kokklar (meningokokklar və qonokokklar).
Bütün patogen kokların xarakterik xüsusiyyəti irinli iltihabi proseslərə səbəb olmaq qabiliyyətidir, buna görə də onları piogen (piogen) kokklar da adlandırırlar.
Ən kəskin və davamlı piogenik xüsusiyyətlər stafilokoklarda ifadə edilir.
STAFİLOKOKKLAR
Morfologiyası və tinktorial xüsusiyyətləri. Stafilokoklar - Stafilokoklar (ilk dəfə 1880-ci ildə Paster tərəfindən təcrid olunmuşdur) orta diametri 0,8-0,9 mikron olan müntəzəm toplar formasına malikdir. Təmiz kulturadan alınan yaxmada stafilokoklar üzüm salxımını xatırladan yığınlar və salxımlar şəklində düzülür (şək. 60). İrin və digər patoloji materialda tez-tez tək kokklara, qoşalaşmış və hətta qısa zəncirlərə rast gəlmək olar. Əsas anilin boyaları ilə yaxşı rənglənirlər, qram-müsbətdirlər, sporlar əmələ gətirmirlər, kapsullar əmələ gətirmirlər və hərəkətsizdirlər.
Mədəni və biokimyəvi xassələri. Stafilokoklar həm sərbəst oksigenin mövcudluğunda, həm də olmadıqda şərti qida mühitində yaxşı inkişaf edir. Optimal temperatur 37 °.
düyü. 60. Stafilokokk (a) və streptokokk (b) təmiz kulturada.
düyü. 61. Mesopatamiya ağarında stafilokok koloniyaları. Uv. iyirmi.
düyü. 62. Jelatinə inyeksiya yolu ilə səpin.
Ağarın səthindəki fərdi koloniyalar orta ölçülü, qabarıq, nəmli, qeyri-şəffaf, homojen və ya incə dənəli quruluşlu dəyirmi disklərdir (bax. Şəkil 01). Koloniyaların rəngi stafilokokların yaratdığı piqmentdən asılıdır və qızılı (Staphylococcus aureus), limon sarısı (Staphylococcus citreus) və ağ (Staphylococcus albus) ola bilər. Ağar maili üzərində zolaqlar çəkdikdə, piqmentli Staphylococcus aureus-un bol böyüməsi əmələ gəlir.
Stafilokok piqmentləri lipoxromlardır, suda həll olunmur və mədəni mühiti deyil, yalnız mədəniyyəti ləkələyir. Mikroorqanizmlər oksigenin iştirakı ilə, otaq temperaturunda, işıqda böyüdükdə piqment əmələ gəlməsi intensiv olur.
Böyümənin 2-3-cü günündə jelatinə inyeksiya ilə əkin edərkən, mühitin səthində mayeləşmə zonası nəzərə çarpır. Kultura mayeləşdikcə pambıqlı çöküntü şəklində dibə düşür (şək. 62).
Bulyonda stafilokoklar bol artım verir. Termostatda 24 saatdan sonra bulyon buludlu olur və sınaq borusunun dibində çöküntü əmələ gəlir.
Stafilokoklar südü tez kəsdirərək ona turşu reaksiya verir.
Fermentlər (qazsız) laktoza, qlükoza, maltoza, mannitol. Mannitolu parçalamaq qabiliyyəti adətən stafilokokların patogen suşlarını xarakterizə edir.
Qanlı agar lövhələrindəki patogen stafilokoklar hemoliz zonası ilə əhatə olunmuş koloniyalar əmələ gətirir və sitratlanmış qan plazmasını laxtalanır.
Müqavimət. Staphylococcus aureus çox davamlı mikroblardan biridir. 80 ° temperatur onu 10 dəqiqə ərzində yaş olduqda öldürür. 70 ° stafilokokun temperaturu 1 saata qədər saxlanılır. Karbol turşusu (3-5% məhlul) onları 15-30 dəqiqə ərzində öldürür. İrində qızıl stafilokok uzun müddət davam edir.
Stafilokokların toksinləri, fermentləri, onların heyvanlar üçün patogenliyi. Patogen stafilokoklar bir sıra toksinlər və fermentlər istehsal edir. Staphylococcal hemolicin qırmızı qan hüceyrələrini həll edir. Bu toksin termolabildir (55°-də parçalanır), ekzotoksinlərə aiddir və onunla heyvanları immunizasiya edərkən antitoksin əldə etmək olar. Stafilokokk kulturalarının filtratı da nekrotik və öldürücü təsirə malikdir. İndi sübut edilmişdir ki, hemolizin, nekrotoksin və öldürücü toksin tək bir stafilokok ekzotoksininin komponentləridir. Bu toksinlər bir-birindən ayrılmazdır və onlardan birinin aşkarlanması təcrid olunmuş stafilokokun patogenliyinin sübutu kimi xidmət edir. Staphylococcus aureusun bəzi hemolitik ştammları kəskin qastroenterite səbəb olan enterotoksin istehsal edir. Stafilokokk kulturalarının filtratlarında tez-tez leykositləri məhv edən zəhər olan leykosidin tapılır. Patogen stafilokoklar fermentlərdən təcrid olunur: 1) plazma koaqul az y - laxtalanma plazması, 2) fibrinolizin - fibrin laxtalarını həll edən, 3) hialuronidaza - birləşdirici toxuma elementlərini yapışdıran maddə olan hialuron turşusunu həll edən, 4) penisilinazanı aktivləşdirən - 5) sarısı-duzlu agarda (Çistoviç mühiti) koloniyaların ətrafında penisilinaz buludluluq zonası.
Laboratoriya heyvanlarından dovşanlar və daha az dərəcədə qvineya donuzları və siçanlar stafilokoklara ən çox həssasdırlar. Dovşanlarda mədəniyyətin intradermal yeridilməsi ilə açıq nekroz görünür, subkutan inyeksiya ilə abseslər inkişaf edir və stafilokokların yüksək virulent ştammları ilə infeksiya sepsisə və heyvanların ölümünə səbəb olur. Emzikli pişiklər və gənc siçanlar stafilokok enterotoksininə ən həssasdır.
Stafilokokların təsnifatı. Stafilokokların ifraz etdiyi piqmentə görə köhnə təsnifatı (qızıl, ağ və limon sarısı) onların patogenliyini düzgün müəyyən etməyə imkan vermir. Buna görə də, hazırda Qrossun təklif etdiyi stafilokokların təsnifatı ən düzgün hesab olunur. Bu təsnifata görə, bütün stafilokoklar üç qrupa bölünür: patogen, bir qədər patogen və qeyri-patogen.
Birinci qrup - patogen stafilokoklar:
a) 5%-li qan agarı olan lövhələrdə aydın hemoliz zonası əmələ gəlir;
b) bir dovşana intradermally tətbiq edildikdə, onlar bəzən heyvanın ölümü ilə bitən açıq nekroz fenomenlərinə səbəb olurlar;
c) 2 saat ərzində plazma laxtalanmasına səbəb olan plazmakoaqulaza fermentini istehsal edir;
d) əsasən sepsis və ya kəskin irinli infeksiyası olan xəstələrdən ayrılır.
İkinci qrup zəif patogen stafilokoklardır:
a) qanlı agar lövhələrində yüngül natamam hemoliz zonası əmələ gəlir;
b) intradermal yolla yeridildikdə, dovşan inyeksiya yerində dərinin qızarmasına, bəzən infiltrasiyaya, daha tez-tez nekrozsuzluğa səbəb olur;
c) sitrat plazmasına vurulduqda 6 saat ərzində və sonra laxtalanmaya səbəb olurlar;
d) follikulit zamanı dərinin səthindən, yuxarı tənəffüs yollarının katarası zamanı selikli qişalardan, yaraların səthindən ifraz olunur, lakin onların dərinliyindən deyil.
Üçüncü qrup patogen olmayan stafilokoklardır:
a) qanlı agar lövhələrində hemoliz aşkar edilməmişdir;
b) bir dovşana intradermal tətbiqi ilə nekroz və infiltrasiya hadisələri müşahidə edilmir, bəzi hallarda dərinin qızartı görünür;
c) plazma laxtalanmasının reaksiyası mənfidir;
d) daim sağlam dəridə, farenks, burun selikli qişalarında və havada olur.
İnsanlarda patogenezi və xəstəlikləri. Stafilokoklar çox yayılmış mikroblardır. Onlar havada, suda və torpaqda, insanlarda - demək olar ki, daim dəri və selikli qişalarda olur. Bu, staphylococcus aureus-un bütün növ irinləmənin ən çox yayılmış törədicisi olduğunu izah edir. Dərinin və selikli qişaların zədələnməsi və ya onların müqavimətinin azalması stafilokok infeksiyası üçün “qapı”nı açır.
Çox vaxt dəri təsirlənir. Stafilokoklar furunkulların törədicisi - saç follikullarının irinli iltihabıdır. Əgər furunkuloz təbiətdə çoxalırsa, xəstəliyə furunkuloz deyilir. Bir neçə qaynaq birləşərək daha geniş irinli infiltrat meydana gətirdikdə, karbunkul meydana gəlir.
Stafilokoklar abseslərdə (abseslərdə), irinli yaralarda, selikli qişaların katarasında, septisemi və septikopemiyada (daxili orqanlarda irinli ocaqların əmələ gəlməsi ilə sepsis) rast gəlinir. Staphylococcus aureusun enterotoksik suşları qida zəhərlənməsinə səbəb ola bilər. Sonuncular, stafilokokk ilə yoluxmuş süd və digər süd məhsullarının, qaymaqlı tortların və s. istehlakı nəticəsində müşahidə olunur, çünki bu məhsullarda stafilokokk çoxalması üçün optimal şərait tapır. Patogen stafilokoklar ya mastitli inəklərdən, ya da piodermadan əziyyət çəkən südçülərin əlindən südə daxil ola bilər.
İmmunitet. İnsanlarda stafilokoklara qarşı fitri immunitet yoxdur. Bununla belə, bir insanın bu mikroorqanizmə qarşı əhəmiyyətli müqaviməti var, bu, dərinin qoruyucu rolu və qanda antikorların olması ilə izah olunur.
Göründüyü kimi, əldə edilmiş toxunulmazlıq baş verə bilər, bunu xəstələrdə və sağalmışlarda antikor titrinin artması sübut edir. Ancaq bu toxunulmazlıq qeyri-sabitdir. Bundan əlavə, furunkuloz keçirmiş bir çox insanın stafilokoklara qarşı həssaslığının artdığı qeyd edilmişdir.
Stafilokoklara qarşı müqavimət müxtəlif səbəblərə görə zəifləyə bilər - diabet, travma, zəiflədən xəstəliklər və s.
Mikrobioloji diaqnostika. İrin öyrənilməsi. Çox vaxt irin mikrobioloji tədqiqat üçün materialdır. Bu məqsədlə, açıq yaralarla, yara səthinin steril pambıq çubuqla ilkin təmizlənməsindən sonra yaranın daha dərin yerlərindən axıntı çıxarılır. Qapalı proseslərdə (furunkul, abses) eyni məqsədlə dərini dezinfeksiya etdikdən sonra steril bir şpris ilə irin ocağının ponksiyonu aparılır. Yaranan irindən yaxmalar hazırlanır, mavi və qramla boyanır və mikroskoplanır.
Kokkların yerləşdiyi yerə və tinktorial xassələrə görə, stafilokoklar və streptokokkları fərqləndirmək çətindir, buna görə də onlar bakterioloji tədqiqata, yəni sadə qanlı agarda, sarısı-duzlu agarda plitələrdə irin peyvənd edilməsinə başlayırlar (bölməyə baxın " Sanitary Microbiology”, səh. 454) və zənginləşdirici mühitdə (şəkər bulyonu). Toxumlu fincanlar, tərs çevrilir və bulyon 1-2 gün ərzində 37 ° temperaturda bir termostata yerləşdirilir.
Qanlı agar plitələrində koloniyalar hemoliz zonaları əmələ gətirir, onların diametri çox vaxt koloniyanın diametrindən bir neçə dəfə çox olur. Bu şəffaf rəngsiz hemoliz zonaları stafilokokal hemotoksinin yaratdığı qırmızı qan hüceyrələrinin əriməsi nəticəsində əmələ gəlmişdir. Sarısı-duzlu agar olan plitələrdə patogen stafilokoklar qızıl piqmentin və buludlu bir zonanın meydana gəlməsi ilə böyüyür - koloniyanın ətrafında göy qurşağı tacı şəklində. Koloniyalardan birindən preparat hazırlanır, Qram üsulu ilə boyanır və mikroskopla aparılır. Üzüm salxımları şəklində yerləşən preparatda qram-müsbət kokkların aşkar edilməsi təxmini müsbət nəticə vermək hüququ verir. Sonra koloniyanın qalan hissəsi təmiz kultura əldə etmək üçün agar maili üzərində subkulturasiya edilir. Patogen stafilokokkları qeyri-patogendən diferensiallaşdırmaq, yəni qanlı agarda, sarı-duzlu agarda böyüməsini öyrənmək, nitrat plazmasına səpmək və heyvanlarda toksikliyini müəyyən etmək lazımdır.
Plazma laxtalanma testi. Plazma laxtalanma reaksiyası üçün G.V. Vygodchikov aşağıdakı texnikanı tövsiyə edir. Dovşanın ürəyindən 10 ml qan alınır, 1 ml 5%-li natrium sitrat məhlulu olan sınaq borusuna qoyulur. Qan sentrifuqalanır və plazma aspire edilir. Təcrübədən əvvəl alınan plazma 1: 4 şoran ilə seyreltilir və 0,5 ml steril borulara tökülür. Stafilokokların koloniyaları nitrat dovşan plazması olan borulara bir döngə ilə aşılanır, 37 ° temperaturda termostata yerləşdirilir və plazma laxtalanması hər 2-3 saatda yoxlanılır. Patogen stafilokoklar plazmanı 2-10 saat ərzində, əksər hallarda 4 saat ərzində laxtalanır.
Toksigenlik testi. Stafilokok mədəniyyətlərinin toksikliyi dovşanlarda, enterotoksin isə süd verən pişiklərdə təcrübə ilə müəyyən edilir. Şoran məhlulda mikrobların suspenziyası maili ağarda bir dəyirmi stafilokokkdan hazırlanır və 1 ml suspenziyada 2 milyard mikrob cisminin hesablanması ilə optik standarta uyğun olaraq təyin edilir. Dovşanın yan və ya arxa tərəfində yun qoparılır və heyvana 0,2 ml mikrob süspansiyonu intradermal yeridilir. Müsbət reaksiya ilə inyeksiya yerində bir infiltrat, sonra isə nekroz əmələ gəlir.
Ölümcül toksini aşkar etmək üçün dovşana 1 kq bədən çəkisi üçün 0,75 ml nisbətində stafilokokk bulyon kulturasının filtratı venadaxili yeridilir. Heyvanın ölümü 15 dəqiqədən sonra baş verir.
Enterotoksini müəyyən etmək üçün 1,5-2 aylıq pişiklər (çəkisi 400 q) orijinal çirklənmiş məhsul və ya stafilokok süd mədəniyyəti ilə qidalanır. Zəhərlənmə əlamətləri (ishal, bəzən qusma) 30-60 dəqiqə ərzində baş verir. Müşahidə 4-6 saat ərzində aparılır və bu müddət ərzində pişiklərdə heç bir reaksiya yoxdursa, bioloji test mənfi hesab olunur.
Qan analizi. Xəstə sepsisdən şübhələnirsə, şprisdən istifadə edərək dirsək venasından 10 ml qan alınır və 100-200 ml şəkər bulyonu ilə aşılanır. Əkin bir termostatda 24-48 saat zənginləşdirmə üçün yerləşdirilir. Müsbət halda mühit buludlu olur və ondan gələn yaxmalarda xarakterik forması və yeri olan qram-müsbət kokklar aşkar edilir. Bulyon qanlı agar ilə boşqabda subkulturasiya edilir və yuxarıda göstərildiyi kimi əlavə tədqiqatlar aparılır. Bulyon termostatda 10 gün saxlanılır, hər 2 gündən bir 5% qanlı ağarda səpilir.
Digər materialların tədqiqi. Çoxlu sayda yad mikroblarla (nəcis, bəlğəm) çirklənmiş materialları tədqiq edərkən 7,5% natrium xlorid olan agardan istifadə etmək tövsiyə olunur, ona 10% ilıq yağsız süd əlavə edilir (Petroviç mühiti). Belə agarda kənar mikrofloranın böyüməsi əhəmiyyətli dərəcədə yatırılır.
Faq tipləmə. Fajların yazılması dörd qrupa bölünmüş 21 faqdan ibarət tipik stafilokokal faqlar dəstindən istifadə edir. Hər bir tipik faq yalnız müvafiq stafilokok ştamında çoxalmağa qadirdir. Stafilokokların faj tipləşdirilməsi xüsusi əhəmiyyət kəsb edir
infeksiya mənbəyini müəyyən etmək və epidemik əlaqələr yaratmaq üçün qida məhsullarının sanitar-bakterioloji müayinəsi.
Xüsusi terapiya və kemoterapi. Stafilokok peyvəndi furunkuloz kimi təkrarlanan və xroniki infeksiyaların müalicəsində geniş istifadə olunur. Bu xəstəliklərin qarşısının alınması üçün toksoid istifadə olunur.
Stafilokok infeksiyalarının müalicəsində sulfanilamid seriyasının kemoterapevtik dərmanları (norsulfazol, sulfodimezin və s.), antibiotiklər (böyük dozalarda penisilin, eritromisin, oksasilin və s.), stafilokok bakteriofaqları (dəri lezyonları üçün də uğurla istifadə olunur). Şiddətli stafilokok sepsisində hiperimmun antistafilokokk plazma və toksoidlə immunlaşdırılmış donorlardan alınan qamma-qlobulin tövsiyə olunur.
Üst tənəffüs yollarının xəstəliyindən başlayaraq geniş yayılmış stafilokok infeksiyaları bütün bədənə hücum edə bilər. Müəyyən orqanların üstünlük təşkil edən zədələnməsi səbəbindən stafilokok infeksiyalarında tədqiqat üçün material bəlğəm, irin, qan, durulama nazofarenksin yuyulması, sidik yollarının axıdılması, qida (əsasən süd və qənnadı məmulatları), yoluxmuş səthlərdən yuyulma, qusma, eksudatlar ola bilər. , aspekt qaydalarına ciddi uyğun olaraq seçilir.
Materialı təhlil edərkən mikroskopik, bakterioloji (mikrobların təmiz mədəniyyətinin təcrid edilməsi və onların identifikasiyası) və bioloji üsullardan istifadə olunur.
I. MİKROSKOPİK METOD
Mikroskopik üsul yalnız sağlam bir insanda steril olan materiallarla (məsələn, qan, serebrospinal maye) aseptik iş üçün müstəqil əhəmiyyət kəsb edir. Bu vəziyyətdə stafilokokların aşkarlanması müstəqil diaqnostik dəyərə malikdir. Digər hallarda, mikroskopik üsul ilkin, təxmini olaraq istifadə olunur. Onu istifadə edərkən, hər bir görmə sahəsindəki mikroorqanizmlərin sayına (stafilokok xəstəlikləri ilə patogen patogen mikrofloranın qalan hissəsini sıxışdıra bilər və çox miqdarda ləkələrdə tapıla bilər), dəstələrin ölçüsünə diqqət yetirmək lazımdır. (yüksək patogenliyi ilə stafilokoklar intensiv şəkildə bölünür, fərdlərin dağılmağa və böyük qruplar - qruplar verməyə vaxtları yoxdur), fərdi şəxslərin ölçüsü (patogen stafilokoklar əsasən çox kiçikdir).
II. BAKTERİOLOJİ ÜSUL
Bakterioloji üsul patogenlərin təmiz mədəniyyətinin təcrid edilməsi və onların identifikasiyasıdır.
Stafilokoklar ən çox yayılmış mikroorqanizmlər sırasındadır. Onlar sağlam insanda da olur. Buna görə də, xəstəliyin diaqnozu, onun stafilokok təbiətinin qurulması üçün təcrid olunmuş bakteriyaların patogenliyini sübut etmək çox vacibdir. Eyni zamanda, diaqnostik problemin həlli bu infeksiyanın epidemiologiyası, müalicəsi və qarşısının alınması məsələlərinin aydınlaşdırılması ilə sıx bağlıdır. Bu əsasda bakterioloji üsul bir neçə mərhələdən və istiqamətlərdən ibarətdir.
Tədqiqatın yuxarıdakı bütün mərhələləri diaqramda əks olunur:
Patojenin təmiz mədəniyyətinin təcrid edilməsi onun mədəni xüsusiyyətlərini nəzərə alaraq həyata keçirilməlidir halofillik (digər mikrofloranın eyni vaxtda basdırılması ilə süfrə duzunun artıq məzmunu olduqda yaxşı inkişaf), zülallara və karbohidratlara yüksək ehtiyac. Bu, eyni zamanda diferensial diaqnostika funksiyalarını yerinə yetirən seçmə qida mühitinin istifadəsi ilə əldə edilir.
STAFİLOKOKKLAR ÜÇÜN QİDALANMA MÜSİTİNİN TƏRKİBİ
Təhlil apararkən, stafilokokların tipik xüsusiyyətlərindən aşağıdakı sapmaları nəzərə almaq lazımdır.
VİRULENSİNİN ƏSAS GÖSTƏRİŞLƏRİNİN MƏYYƏNDİRİLMƏSİ
Stafilokokların virulentliyinin əsas göstəriciləri hemolitik aktivlik, plazma koaqulaz fermentinin istehsalı və nekrotoksiklikdir.
Mədəniyyətlərin patogenlik dərəcəsini qiymətləndirərkən, bütün stafilokokkları üç qrupa bölmək olar ki, ümumi testlər geniş istifadə olunur. Şübhəsiz patogen stafilokokların birinci qrupuna (kəskin hemolizləşdirici fəaliyyətə malik, sitrat plazmasını 1-2 saat ərzində laxtalanan və açıq nekrotik xüsusiyyətlərə malik olan bakteriyalar daxildir. İkinci qrup fürsətçi və ya orta dərəcədə patogen stafilokokklar, aqar5% ilə əhəmiyyətsiz hemoliz verən ştamplardır. dovşan və ya quzu qanı, laxtalanma plazması 6 saatdan sonra və dovşana dəridaxili olaraq tətbiq edildikdə, qızartı və infiltrasiyaya səbəb olur. Üçüncü qrup patogen olmayan stafilokoklara eritrositləri hemoliz etməyən, plazmanı laxtalanmayan və nekrotikləşdirici xüsusiyyətlərə malik olmayan kulturalar daxildir.
Beləliklə, təcrid olunmuş stafilokokun virulentliyinin qiymətləndirilməsi patogen təsirin üç göstəricisinin hərtərəfli testinə əsaslanır.
Eyni zamanda, stafilokokkların laktik turşu məhsullarından, xüsusən də soyuducuda uzun müddət saxlanılan məhsullardan təcrid edildikdə, bütövlükdə toksinlər əmələ gətirmə qabiliyyətini saxlayaraq patogenliyin fərdi əlamətləri yox ola biləcəyinə dair rəsmi göstəricilər var. Nəticə etibarilə, patogenlik əlamətlərindən birinin düşdüyü stafilokoklar patogen hesab edilməlidir (Erisman İnstitutunun 1967-ci il təlimat məktubu).
HEMOTOKSİNİN MÜƏYYƏNDİRİLMƏSİ 5-10% defibrinləşdirilmiş dovşan və ya quzu qanı olan MPA qanına kulturanın birbaşa peyvənd edilməsi yolu ilə həyata keçirilir. İnsan qanının əlavə edilməsi arzuolunmazdır, çünki alfa-hemolizini ifraz edən stafilokokklar insan eritrositlərini məhv etmir və buna görə də xəstə bir insandan təcrid olunmuş bu ştamın patogenliyi ilə bağlı mülahizə etibarsız olacaqdır.
Bəzən stafilokokların dəyişkənliyi nəticəsində, eləcə də kulturaların əlverişsiz şəraitdə uzun müddət saxlanması zamanı sonuncunun hemolitik aktivliyi zəifləyir və ya tamamilə yox olur. Bakteriyaların hemolizetmə qabiliyyətini bərpa etmək üçün hemotoksisitenin yoxlanıldığı mühitə hər 10 ml mühit üçün 0,015 q nisbətində azaldıcı qarışıq əlavə etmək məsləhətdir. Qarışıq bir hissədən Na 2 SO 3 (natrium sulfat) və iki hissədən Na HSO 3 (natrium bisulfat) ibarətdir. Hazırlanmış qarışıq qaranlıqda saxlanılır və keçmiş ərimiş mühitə əlavə edilir. Stafilokokk kulturasında ekzotoksinin hemolitikliyini qorumaq üçün 100 ml kulturaya 100 ml doymuş Na 2 S 2 0 3 məhlulu (reduksiyaedici) və 250 ml hidrokinonun (stabilizator) doymuş məhlulu əlavə etmək tövsiyə olunur. süzün. VI Ioffe hemolitik aktivliyi bərpa etmək üçün hər 0,4 ml üçün yalnız 0,1 ml 1% natrium sulfat Na 2 SO 3 məhlulu əlavə etməyi təklif edir.
PLAZMOKOAQULAZANIN MÜƏYYƏNDİRİLMƏSİ 0,5 ml 5%-li dovşan və ya insan sitrat plazması ilə dar boruda stafilokokk kulturasının aşılanması yolu ilə həyata keçirilir. Bitkilər 1, 2, 3 və 6 saatdan sonra nəticələrin qeydiyyatı ilə 6-10 saat ərzində termostata yerləşdirilir. İnsan qan plazması uyğun olmayan nəticələr verir və qlükoza və mertiolat ilə donor plazması ümumiyyətlə uyğun deyil. İnsan plazmasını əvəz etmək mümkün olmadıqda, yalnız şoran ilə 10 qat seyreltildikdən sonra istifadə olunur.
Plazma koaqulazasını təyin etmək üçün klassik üsulla yanaşı, şüşə üzərində plazma laxtalanma reaksiyası və ya sürətləndirilmiş "sürüşmə testi" də istifadə olunur. Bu üsul koaqulaz aktiv stafilokokların qan plazması ilə birləşərək onu laxtalanma qabiliyyətinə əsaslanır. Koaqulaz-mənfi suşlar bu xüsusiyyətə malik deyildir. Reaksiyanı həyata keçirmək üçün bir damcı su götürün, içindəki sınaq mədəniyyətini dayandırın və sonra bir damcı seyreltilmiş dovşan və ya insan qan plazması əlavə edin. 15-60 saniyədən sonra plazma laxtası əmələ gəlir. Gecikmiş (bir dəqiqədən gec) reaksiya şübhəli, 3 dəqiqədən sonra baş vermiş reaksiya isə mənfi hesab olunur.
NEKROTOKSİNİN MÜƏYYƏNDİRİLMƏSİ dovşana 0,2 ml 2 mlrd suspenziya, şoran məhlulda gündəlik stafilokokk aqar kulturasının intradermal yeridilməsi ilə aparılır. Heyvanın müşahidəsi 24-48 saat ərzində aparılır. Yalnız sarımtıl mərkəzə, tünd kənara və sonrakı nekroz hadisələri ilə periferiya boyunca parlaq qırmızı haşiyəyə malik infiltrat müsbət reaksiya kimi qəbul edilir.
STAFİLOKOKLARIN PATOGENİYYƏTİNİN ƏLAVƏ GÖSTƏRİŞLƏRİNİN MƏYYƏNDİRİLMƏSİ
HİALURONİDAZA FERMANTININ MÜƏYYƏNDİRİLMƏSİ kulturanın tərkibində hialuron turşusu olan substratda sınaqdan keçirilməklə həyata keçirilir. Sonuncu kimi, yeni doğulmuş uşağın göbək bağından çıxarış istifadə olunur. Bunun üçün karbol turşusunun 0,5%-li məhluluna yığılmış 3-5 ədəd həcmində göbəklər qandan distillə edilmiş su ilə yaxşıca yuyulur, damarlardan təmizlənir, xırda doğranır və iki dəfə ətçəkən maşından keçirilir. Sonra ortaya çıxan kıyılmış ət çəkilir və bir yarım həcmdə distillə edilmiş su ilə tökülür, bundan sonra otaq temperaturunda 30 dəqiqə buraxılır, vaxtaşırı silkələnir. Sonra bütün bu kütlə 2-3 qat steril doka ilə bir huniyə tökülür, süzülür, sıxılır, bir dəqiqə qaynar suya atılır, kəmiyyətcə əzilmiş iplərin ilkin çəkisinə uyğun gəlir. Qoy qaynasın. Maye ikiqat steril cuna vasitəsilə tez bir zamanda steril borulara süzülür və konservasiya və substrat üçün onların hər birinə bir neçə damcı xloroform əlavə edilir. Sonra borular pambıq tıxacla bağlanır və konservasiya üçün soyuq yerə qoyulur. Çıxarış bir neçə ay ərzində bu şərtlərdə demək olar ki, dəyişməz qalır.
Hialuronidaza testi iki mərhələdə aparılır. Bunlardan birincisi hialuron turşusunun işçi dozasının təyini (təcrübə ekstrakt hazırlandıqdan sonra yalnız bir dəfə aparılır və uzunmüddətli saxlama zamanı ayda 1-2 dəfə təkrarlanır), ikincisi hialuronidazanın aşkarlanmasıdır. ferment.
| Hialuron turşusunun iş dozasını və titrini təyin etmək üçün sxem | ||||||
| Reagentlər | Sınaq boruları və onların məzmunu ml | |||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
| Hialuron turşusu ekstraktı | 0,1 | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0,5 | 0,6 |
| Pəhriz. su və ya nat. həll | 0,9 | 0,8 | 0,7 | 0,6 | 0,5 | 0,4 |
| 15 dəqiqə +37 ° C-də termostata daxil edin. | ||||||
| 15% sirkə məhlulu. turşu (göstərici) | 2 ilə | 2 ilə | 2 ilə | 2 ilə | 2 ilə | 2 ilə |
| Nəticə (laxtanın əmələ gəlməsi | - | + | + | + + | + + + | + + + + |
Borular 15 dəqiqə ərzində 37 ° C-də bir termostata yerləşdirilir, bundan sonra 2-3 damcı 15% sirkə turşusu məhlulu əlavə edilir, yumşaq silkələnir və laxtanın əmələ gəlməsi ilə nəticələr oxunur. Hialuron turşusunun titri onun minimum miqdarı hesab olunur, sirkə turşusunun təsiri altında şəffaf bir laxtalanma verir. Bu nümunədə hialuron substratının titri 0,2 ml-dir. Eyni miqdar işçi doza kimi qəbul edilir.
Mədəniyyətlərin hialuronidaz fəaliyyətini təyin etmək üçün sxemlər, aşağıya baxın.
Boruların bütün tərkibi qarışdırılır, əvvəlcə termostatda 15 dəqiqə, sonra soyuqda 5 dəqiqə qoyulur və 2-3 damcı 15% sirkə turşusu əlavə edilir. Bakteriyalarda hialuronidazın olması test nümunəsində laxtanın olmaması ilə qeydə alınır. Sağlam hialuron turşusunun olması səbəbindən nəzarət borusunda yaxşı bir laxtalanma görünməlidir.
Sınaq mədəniyyətinin hialuronidaza aktivliyinin daha dəqiq kəmiyyətcə müəyyən edilməsi üçün nümunə aşağıdakı müfəssəl sxemə uyğun olaraq yerləşdirilir.
| Kulturaların hialuronidaza aktivliyinin təyini sxemi | ||
| Komponentlər | Test boruları | |
| 1 | 2 | |
| (əsas nümunə) | hialuronidaza turşusuna nəzarət | |
| İşçi dozada hialuron turşusu ekstraktı (ml ilə) | 0,2 ml | 0,2 ml |
| Filtrat - bir ferment və ya şoran məhlulda 2 milyard mikrob süspansiyonu (ml ilə) | 0,3 ml | - |
| Distillə edilmiş. su və ya nat. məhlul (ml ilə) | 0,2 | 0,5 ml |
| Termostatda +37 ° C-də 15-30 dəqiqə, sonra fermentin fəaliyyətini dayandırmaq üçün soyuqda 5 dəqiqə | ||
| 15% sirkə turşusu məhlulu | 2 damcı | 2 damcı |
| Hialuronidaza aktivliyinin kəmiyyətcə təyini sxemi | ||||||
| Komponentlər ml | Test boruları | |||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
| hialuron turşusuna nəzarət | ||||||
| Qulda hialuron turşusu ekstraktı. doza (ml ilə) | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 |
| Bakteriyaların suspenziyası 2 milyard (ml ilə) | 0,5 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,1 | - |
| Distillə edilmiş. su və ya nat. ml-də həll | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0,5 | 0,6 | 0,7 |
| Bir termostatda saxlayın, soyuqda indikator 15% sirkə turşusu əlavə edin | ||||||
| Nəticə (laxtanın əmələ gəlməsi) | - | - | - | + | + | + |
Bu nümunədə mədəniyyətin hialuronidaza aktivliyinin titri 0,3 ml-dir.
Fibrinokinazanın təyini stafilokokkların təzə qanın fibrin laxtalarını parçalamaq qabiliyyətinə əsaslanır. Sınaq üçün stafilokokların gündəlik bulyon mədəniyyətindən 0,5 ml götürün, 0,2 ml təzə insan plazmasına və ya qanına 0,8 ml salin əlavə edin. Sonra 0,5 ml 0,25% kalsium xlorid məhlulu əlavə etdikdən sonra yumşaq qarışdırın. Bu reaksiyada nəzarət bütün komponentləri olan, lakin bakteriya olmayan bir sınaq borusudur. Borular 37 ° C-də bir termostata yerləşdirilir. Pıhtılaşma ilk 15 dəqiqə ərzində baş verir. Bu andan etibarən əmələ gələn laxtanın həllinin gedişi izlənilir. Tipik olaraq, patogen mədəniyyətlər 24 saat ərzində tam fibrinoliz təmin edir.
ƏTİNLƏRİN MÜHIT ÜZRƏ FƏRQƏLƏNMƏSİ ÇEPMENDİR. Mühitin hazırlanması: 1 litr 3,5% MPA-ya 3,3 ml 0,1% sulu gentian violet və ya kristal bənövşəyi məhlulu əlavə edilir. Hazırlanmış mühit stəkanlara tökülür. Sərtləşdikdən sonra boz-yasəmən rənginə malikdir. Patogen stafilokoklar üzərində bənövşəyi və ya narıncı koloniyalar verir, patogen olmayanlar - ağ və ya yasəmən.
PATOGEN STAFİLOKOKKLARIN MANITOLA BAĞLI FƏRQLƏNMƏSİ 0,5% çox atomlu spirt - mannitol olan maye Gyos mühitində aparılır. Mannitol patogen stafilokokları 36 saatdan sonra, patogen olmayanları isə daha sonra məhv edir. Bu əlamət çox qeyri-sabitdir və patogenliyin müstəqil göstəricisi deyil.
SÜRƏTLƏNMİŞ BAKTERİOLOJİ İZOLASYON ÜSULU
PİTER DANİLƏ GÖRƏ PATOGENİ STAFILOKOKKUN MÜƏYYƏNDİRİLMƏSİ
Metod adi qan MPA-nın quzu eritrositləri və resepti Petru Danila tərəfindən hazırlanmış mannitol, natrium xlorid və kalium tellurit ilə bir mühit ilə birgə istifadəsinə əsaslanır.
PETRO DANİLƏ ORTA AŞAĞIDAKİ TƏRKİBƏ VAR: distillə edilmiş su - 100 ml; pepton - 0,5 q; natrium xlorid - 10 q; mannitol və ya laktoza, 0,5 q; kalium tellurit - 0,5 q; bromtimoblau - 0,004 q.
Mühitin hazırlanması: ilıq suda peptonu və duzu həll edin, 2 ml bromotimolbau məhlulu (3,2 ml N / 20 natrium hidroksid məhlulu üçün 0,1 q və 50 ml distillə edilmiş su) əlavə edin, +120 ° C-də 15 dəqiqə sterilizasiya edin. Soyuduqdan sonra 5 ml 10% sulu mannitol və ya laktoza məhlulu əlavə edilir, qaynar sterilizasiya edilir və 5 ml natrium telluritin 1% sulu məhlulu avtoklavda sterilizasiya edilir. Orta tünd yaşıl, pH -7.6. Rəngi mavi olduqda, ona bir neçə damcı 10% hidroklor turşusu əlavə edilir. Mühit sınaq borularına tökülür, 1-2 ml.
Kultura səpildikdən 24 saat sonra Petru Danil üçün mühitin saralması və stafilokok koloniyaları ətrafında hemoliz olması patogen bakteriyaların sərbəst buraxılmasını göstərir.
PİTER DANİLƏ GÖRƏ PATOGENİ STAFILOKOKKUN SÜRƏTLƏNMİŞ HƏR KƏMİŞLİ MƏYYƏNDİRİLMƏSİ
Patogen stafilokokların differensiasiyası bir sınaq borusunda aparılır. Metod patogen stafilokokların insan plazmasının mövcudluğunda aglütinasiya etmək, onu laxtalaşdırmaq, həmçinin homoloji eritrositlərin aglütinasiyasına səbəb olmaq qabiliyyətinə əsaslanır. Testi həyata keçirmək üçün 1 ml nitrat insan plazmasına 10 ml fizioloji məhlul və plazmanın altında çökmüş 0,05 ml eritrosit kütləsi əlavə edilir. Boru silkələnir və 0,5 ml qarışıq başqa bir boruya tökülür. Buraya mümkün qədər çox stafilokokk mədəniyyəti daxil edilir, bu, maye substrata yaxın sınaq borusunun divarına diqqətlə sürtülür, səthinə bir az toxunur. Sürtünmə homojen bir süspansiyon alınana qədər davam etdirilir. Patogen staphylococcus aureus plazma ilə aglütinasiya olunur və homogenləşmə baş vermir, qeyri-patogen - vahid homojen kütlə əmələ gətirir.
Patogen stafilokokklar, mədəniyyət plazma substratına sürtüldükdə, dənəvər qeyri-homogen süspansiyon əmələ gətirir və termostatda inkubasiya edildikdən sonra eritrositlərin hemaqlütinasiyasına və plazma laxtalanmasına səbəb olur. Bu halda, patogen olmayan ştamplar vahid bulanıq süspansiyon təşkil edir və plazma laxtalanması və eritrositlərin yapışması baş vermir.
| Tab. 1. Faqların növləri | |
| Qrup | Bakteriofaqlar |
| I | 29, 52, 52A, 79, 80 |
| II | 3A, 3B, 36, 55, 71 |
| III | 6, 7, 42E, 47, 53, 54, 75, 77, 83A |
| IV | 42D |
| V | 81 və 187 |
STAFİLOKOKKUN FAQOTİPİ
Fərqli yerlərdə müxtəlif faj tipli stafilokoklar dövr edir. Buna görə də onların stafilokokk kulturalarında təyin edilməsi mümkün infeksiya mənbəyini və onun yayılma yollarını aydınlaşdırmaq üçün böyük əhəmiyyət kəsb edir.
Plazma koaqulyasiya edən stafilokoklar arasında Beynəlxalq Fageotipləşdirmə Komitəsinin nomenklaturasına görə 22 növ faq fərqləndirilir (Cədvəl 1):
Adlandırılmış bakteriofaqlar tərəfindən stafilokokların lizizabilitesinin təyini aşağıdakı kimi aparılır.
ƏTİNLƏRİN FAQOTİPLEŞMƏYƏ HAZIRLANMASI
FAQOTİPLAMA
Lizis dərəcəsi ən azı 2 plus bal ilə müəyyən edildikdə müsbət nəticə hesab olunur. Bu vəziyyətdə liziz zonası bakteriofaqların tətbiq olunduğu yerdəki ərazinin təxminən 50% -ni təşkil edir.
Bir çox hallarda stafilokok kulturaları bir deyil, bir neçə faq tərəfindən parçalanır və steril ləkələrdən bir növ faqomozaik əmələ gətirir. Eyni mozaikanı göstərən və ya 1 faqla fərqlənən stafilokoklar eyni hesab olunur.
BİOLOJİ METOD
Bioloji diaqnostika metodu yalnız enterotoksin buraxan enterotrop stafilokokların səbəb olduğu qida intoksikasiyasına şübhə olduqda istifadə olunur. Onun prinsipi stafilokokk infeksiyası şübhəli qida qalıqlarını qidalandırmaq, təcrid olunmuş mədəniyyət, yuyulma suyu ilə azaldılır. Ən yaxşı bioloji model 1,5-2 aylıq pişiklər (mədəniyyət araşdırması üçün) və yetkin pişiklərdir (enterotoksin aşkar edilərsə). Damcı stafilokok infeksiyaları ilə bu üsul istifadə edilmir.
Mənbə: Motavkina N.S., Pyanova R.E. Bəzi damcı infeksiyalarının və toksoplazmozun mikrobioloji diaqnostikası. Tələbələr üçün metodiki inkişaf. VSMU, 1973
Staphylococcus aureus 1878-ci ildə R.Koch və 1880-ci ildə L.Paster tərəfindən irinli materialda aşkar edilmişdir. L.Paster bir dovşanı yoluxduraraq, nəhayət, irinli iltihabın törədicisi kimi stafilokokun rolunu sübut etdi. "Stafilokokk" adını 1881-ci ildə A.Oqston (hüceyrələrin xarakterik düzülüşünə görə) vermiş və 1884-cü ildə F.Rozenbax onun xassələrini ətraflı təsvir etmişdir. Stafilokoklar qram-müsbət, 0,5 - 1,5 mikron diametrli müntəzəm həndəsi sferik hüceyrələrdir, adətən qruplar şəklində yerləşirlər (bax rəng daxil olmaqla, Şəkil 92), katalaza müsbətdir, nitratları nitritlərə qədər azaldır, zülalları aktiv şəkildə hidroliz edir və yağlar, qazsız turşu əmələ gətirmək üçün anaerob şəraitdə qlükozanı fermentləşdirir. Onlar adətən 15% NaCl varlığında və 45 ° C-də böyüyə bilərlər. DNT-də G+C-nin tərkibi 30 - 39 mol% təşkil edir. Stafilokoklarda bayraq yoxdur, sporlar əmələ gətirmir. Onlar təbiətdə geniş yayılmışdır. Onların əsas anbarı insan və heyvanların dərisi və onların xarici mühitlə əlaqə saxlayan selikli qişasıdır. Stafilokoklar fakultativ anaeroblardır, yalnız bir növ ( Staphylococcus saccharolyticus) Ciddi anaerobdur. Stafilokoklar qida mühitinə tələbkar deyil, adi mühitlərdə yaxşı inkişaf edir, böyümə üçün optimal temperatur 35 - 37 ° C, pH 6,2 - 8,4 təşkil edir. Koloniyalar yuvarlaq, diametri 2 - 4 mm, kənarları hamar, qabarıq, qeyri-şəffaf, əmələ gələn piqmentin rəngində rənglidir. Maye mədəniyyətdə böyümə vahid bulanıqlıqla müşayiət olunur və zamanla boş bir çöküntü meydana gəlir. Adi mühitlərdə böyüdükdə stafilokoklar kapsul əmələ gətirmir, lakin plazma və ya serum ilə yarı maye agara yeridildikdə əksər ştamlar S. aureus kapsul əmələ gətirir. Yarımmaye agarda kapsulsuz ştammlar yığcam koloniyalar şəklində böyüyür, kapsul ştammları diffuz koloniyalar əmələ gətirir.
Stafilokoklar yüksək biokimyəvi aktivliyə malikdirlər: turşu (qazsız) qliserin, qlükoza, maltoza, laktoza, saxaroza, mannitolun sərbəst buraxılması ilə mayalanır; müxtəlif fermentlər (plazma koaqulaza, fibrinolizin, lesitinaza, lizozim, qələvi fosfataza, DNaz, hialuronidaza, tellurit reduktaza, proteinaza, jelatinaza və s.) əmələ gətirir. Bu fermentlər stafilokokkların metabolizmində mühüm rol oynayır və onların patogenliyini böyük ölçüdə müəyyən edir. Fibrinolizin və hialuronidaza kimi fermentlər stafilokokların yüksək invazivliyindən məsuldur. Plazma koaqulaza onların patogenliyində əsas amildir: o, faqositozdan qoruyur və protrombini trombinə çevirir, bu da fibrinogenin laxtalanmasına səbəb olur, nəticədə hər bir hüceyrə faqositlərdən qoruyan zülal filmi ilə örtülür.
Təsnifat. Cins Stafilokok iki qrupa bölünən 20-dən çox növ daxildir - koaqulaz-müsbət və koaqulaza-mənfi stafilokoklar. Növləri fərqləndirmək üçün müxtəlif simvollardan istifadə olunur (Cədvəl 22).
Cədvəl 22
Stafilokokların əsas növlərinin diferensial əlamətləri
Qeyd. (+) - müsbət işarə; (-) - işarə mənfidir; + (-) - dəyişkən bir işarədir;? - naməlum.
I. Koaqulaz müsbət stafilokoklar:
1.S. aureus***.
2.S. intermedius**.
3.S. hyicusa.
II. Koaqulaz-mənfi stafilokoklar:
* Yalnız insanlar üçün patogendir.
** Yalnız heyvanlar üçün patogendir.
*** İnsanlar və heyvanlar üçün patogendir.
a Bütün suşlar deyil S. hyicus koaqulaz var.
İnsanlar üçün patogenlər əsasən koaqulaza-müsbət stafilokoklardır, lakin bir çox koaqulaz-mənfi stafilokoklar da xəstəliklərə səbəb ola bilir, xüsusən də yeni doğulmuş uşaqlarda (neonatal konyunktivit, endokardit, sepsis, sidik yollarının xəstəlikləri, kəskin qastroenterit və s.). S. aureusəsas daşıyıcısının kim olmasından asılı olaraq 10 ekovara bölünür ( hominis, bovis, ovis və s.).
Stafilokoklarda 50-dən çox növ antigen aşkar edilmişdir, onların hər birinə orqanizmdə antitellər əmələ gəlir, antigenlərin çoxu allergen xüsusiyyətlərə malikdir. Spesifikliyinə görə antigenlər ümumi (bütün cins üçün ümumi) bölünür Stafilokok); çarpaz reaksiya verən - insan eritrositlərinin, dəri və böyrəklərin izoantigenləri ilə ümumi olan antigenlər (otoimmün xəstəliklər onlarla əlaqələndirilir); növlər və tip spesifik antigenlər. Aqqlütinasiya reaksiyasında aşkar edilən spesifik antigenlərə görə stafilokoklar 30-dan çox serovariantlara bölünür. Bununla belə, stafilokokların yazılmasının seroloji üsulu hələ də geniş istifadə edilməmişdir. Növlərə xas olan protein A əmələ gətirir S. aureus... Bu zülal səthi yerləşir, peptidoqlikana kovalent bağlıdır, molekulyar çəkisi təxminən 42 kDa-dır. Protein A 41 ° C-də loqarifmik böyümə mərhələsində xüsusilə aktiv şəkildə sintez olunur, termolabildir və tripsin tərəfindən məhv edilmir; onun unikal xüsusiyyəti IgG immunoqlobulinlərinin Fc fraqmentinə (IgG 1, IgG 2, IgG 4), daha az dərəcədə IgM və IgA-ya bağlanma qabiliyyətidir. Protein A səthində CH 2 və CH 3 domenlərinin sərhədində yerləşən immunoqlobulin polipeptid zəncirinin bir bölgəsinə bağlana bilən bir neçə bölgə müəyyən edilmişdir. Bu xassə koaglütinasiya reaksiyasında geniş tətbiq tapmışdır: spesifik antikorlarla yüklənmiş, aktiv mərkəzlərin sərbəst qaldığı stafilokoklar, antigenlə qarşılıqlı əlaqədə olduqda sürətli aglütinasiya reaksiyası verir.
A proteininin immunoqlobulinlərlə qarşılıqlı təsiri xəstənin orqanizmində komplement sistemlərinin və faqositlərin disfunksiyalarına səbəb olur. Antigenik xüsusiyyətlərə malikdir, güclü allergendir və T və B limfositlərinin çoxalmasına səbəb olur. Onun stafilokok xəstəliklərinin patogenezindəki rolu hələ tam aydınlaşdırılmamışdır.
Ştammlar S. aureus stafilokok faqlarına qarşı həssaslığı ilə fərqlənir. Yazmaq üçün S. aureus dörd qrupa bölünən 23 mülayim faqdan ibarət beynəlxalq dəstdən istifadə edin:
1-ci qrup - faqlar 29, 52, 52A, 79, 80;
2-ci qrup - faqlar 3A, 3C, 55, 71;
3-cü qrup - 6, 42E, 47, 53, 54, 75, 77, 83A, 84, 85 faqlar;
4-cü qrup - 94, 95, 96-cı faqlar;
qruplardan kənarda - faq 81.
Stafilokokların faqlarla əlaqəsi özünəməxsusdur: bir və eyni ştam ya bir faq, ya da eyni vaxtda bir neçə tərəfindən parçalana bilər. Lakin onların faglara həssaslığı nisbətən sabit əlamət olduğundan, stafilokokların fag tipləşdirilməsi böyük epidemioloji əhəmiyyətə malikdir. Bu metodun dezavantajı ondan ibarətdir ki, 65 - 70% -dən çox yazmaq mümkün deyil. S. aureus... Son illərdə yazmaq üçün xüsusi faqlar dəstləri alınmışdır S. epidermidis.
Stafilokokların patogenlik faktorları. Staphylococcus aureus unikal mikroorqanizmdir. 1968-ci il Beynəlxalq Təsnifatına uyğun olaraq on bir sinifə aid 100-dən çox müxtəlif xəstəliyə səbəb ola bilər. Stafilokoklar istənilən toxuma, istənilən orqanlara təsir edə bilər. Stafilokokların bu xüsusiyyəti onlarda patogen amillərin böyük bir kompleksinin olması ilə əlaqədardır.
1. Yapışma faktorları - stafilokokların toxuma hüceyrələrinə yapışması onların hidrofobikliyi (nə qədər yüksəkdirsə, yapışdırıcı xüsusiyyətlər bir o qədər güclüdür), həmçinin polisaxaridlərin, ola bilsin ki, protein A-nın da yapışdırıcı xüsusiyyətləri və bağlanma qabiliyyəti ilə bağlıdır. fibronektin (bəzi hüceyrələrin reseptoru).
2. “Aqressiya və müdafiə” faktorları rolunu oynayan müxtəlif fermentlər: plazma koaqulaza (patogenliyin əsas amili), hialuronidaza, fibrinolizin, DNaz, lizozim kimi ferment, lesitinaza, fosfataza, proteinaza və s.
3. İfraz olunan ekzotoksinlər kompleksi:
eritrositlər, dovşana dəridaxili yeridildikdə nekroz, leykositlərin məhv edilməsi, venadaxili yeridildikdə dovşanın ölümü. Ancaq məlum oldu ki, bu təsir eyni amildən - membranı zədələyən toksindən qaynaqlanır. Müxtəlif növ hüceyrələrə sitolitik təsir göstərir ki, bu da aşağıdakı kimi özünü göstərir. Bu toksinin molekulları əvvəlcə hədəf hüceyrə membranının naməlum reseptorlarına bağlanır və ya membranın tərkibində olan lipidlər tərəfindən qeyri-spesifik şəkildə sorulur, sonra isə 3 domendən ibarət 7 molekuldan ibarət göbələk heptamerini əmələ gətirir. "Qapaq" və "kənar" meydana gətirən sahələr membranların xarici səthində yerləşir və "gövdə" sahəsi transmembran məsamə kanalı kimi xidmət edir. Onun vasitəsilə kiçik molekulların və ionların daxil olması və çıxışı baş verir ki, bu da nüvəli hüceyrələrin şişməsinə və ölümünə və eritrositlərin osmotik lizisinə səbəb olur. İnsanlardan zədələnmiş bir neçə növ membran tapıldı, o, insanların, dovşanların və qoçların eritrositlərini parçalayır. Dovşanlarda öldürücü təsir 3 - 5 dəqiqədən sonra venadaxili administrasiya ilə yaranır. İnsan və bir çox heyvan növlərinin eritrositlərini hemoliz edir. 16 - 24 - 48 saatdan sonra venadaxili yeridildikdə dovşan üzərində ölümcül təsir yaranır.Çox tez-tez stafilokoklarda, ob.
b) eksfoliativ toksinlər A və B antigen xüsusiyyətləri, temperaturla əlaqəsi (A - termostabil, B - termolabil), sintezini idarə edən genlərin lokalizasiyası (A xromosom geni, B - plazmid geni tərəfindən idarə olunur) ilə fərqlənir. Tez-tez eyni gərginlikdə S. aureus hər iki exfoliatin sintez olunur. Bu toksinlərlə əlaqəli stafilokokların yeni doğulmuşlarda pemfiqus, büllöz impetiqo, qırmızı səpgilərə səbəb olma qabiliyyəti;
c) həqiqi leykosidin - antigenik xassələri ilə hemolizinlərdən fərqlənən, leykositlərə selektiv təsir göstərən, onları məhv edən toksin;
d) toksik şok sindromuna (TSS) səbəb olan ekzotoksin. Superantigen xüsusiyyətlərinə malikdir. TSS temperaturun artması, qan təzyiqinin azalması, əllərdə və ayaqlarda sonrakı soyulma ilə dəri səpgiləri, limfositopeniya, bəzən ishal, böyrəklərin zədələnməsi və s. S. aureus.
4. Hüceyrə quruluşunun həm komponentləri, həm də ekzotoksinlər və bakteriyaların ifraz etdiyi digər tullantı məhsulları olan güclü allergen xassələri. Stafilokok allergenləri həm gecikmiş tipli hiperhəssaslıq (HPR), həm də dərhal tipli həssaslıq (HPN) reaksiyalarına səbəb ola bilir. Stafilokoklar dəri və tənəffüs yolları allergiyasının (dermatit, bronxial astma və s.) əsas günahkarlarıdır. Stafilokok infeksiyasının patogenezinin özünəməxsusluğu və onun xroniki formaya keçmə meyli GHZ-nin təsirindən qaynaqlanır.
5. Çarpaz reaksiya verən antigenlər (A və B eritrositlərinin izoantigenləri ilə, böyrəklər və dəri - otoantikorların induksiyası, otoimmün xəstəliklərin inkişafı).
6. Faqositozun qarşısını alan amillər. Onların iştirakı kemotaksisin boğulmasında, hüceyrələrin faqositlər tərəfindən udulmasından qorunmasında, stafilokokların faqositlərdə çoxalma qabiliyyətinin təmin edilməsində və “oksidləşmə partlayışının” qarşısının alınmasında özünü göstərə bilər. Faqositoz kapsul, protein A, peptidoqlikan, teixoik turşular, toksinlər tərəfindən inhibə edilir. Bundan əlavə, stafilokoklar orqanizmin bəzi hüceyrələri (məsələn, splenositlər) tərəfindən faqositar aktivliyin bastırıcılarının sintezinə səbəb olur. Faqositozun inhibə edilməsi təkcə orqanizmin stafilokokkların təmizlənməsinə mane olmur, həm də antigenlərin T- və B-limfositlərə emalı və təqdim edilməsini pozur, bu da immun cavabın gücünün azalmasına səbəb olur.
Stafilokoklarda kapsulun olması onların ağ siçanlar üçün virulentliyini artırır, onları faqların təsirinə davamlı edir, aglütinasiya edən zərdablarla yazmağa imkan vermir və A proteinini maskalayır.
Teyxoik turşular nəinki stafilokokları faqositozdan qoruyur, həm də açıq-aydın stafilokok infeksiyalarının patogenezində mühüm rol oynayır. Müəyyən edilmişdir ki, endokarditli uşaqlarda 100% hallarda teixoik turşulara qarşı anticisimlər aşkar edilir.
7. Stafilokokların limfositlərə münasibətdə mitogen təsiri (protein A, enterotoksinlər və stafilokokların ifraz etdiyi digər məhsullar bu təsirə malikdir).
8. Enterotoksinlər A, B, C1, C2, C3, D, E. Onlar antigen spesifikliyi, istilik sabitliyi, formalin (toksoidə çevrilmir) və həzm fermentlərinin (tripsin və pepsin) təsirinə qarşı müqaviməti ilə xarakterizə olunur. pH 4, 5-dən 10.0-a qədər sabitdir. Enterotoksinlər superantigenlərin xassələri ilə molekulyar çəkisi 26-34 kDa olan aşağı molekulyar çəkili zülallardır.
Həmçinin müəyyən edilmişdir ki, insanlarda stafilokok infeksiyasına həssaslıq və onun gedişatının təbiətində genetik cəhətdən müəyyən edilmiş fərqlər vardır. Xüsusilə, ağır stafilokokk irinli-septik xəstəliklər A və AB qan qrupları olan insanlarda daha çox, 0 və B qruplarında daha az rast gəlinir.
Stafilokokların intoksikasiya kimi qida zəhərlənməsinə səbəb olma qabiliyyəti enterotoksinlərin sintezi ilə bağlıdır. Ən tez-tez onlar enterotoksinlər A və D. səbəb bu enterotoksins fəaliyyət mexanizmi zəif başa düşülür, lakin adenilat siklaz sisteminin funksiyasını pozan digər bakterial enterotoksinlərin fəaliyyətindən fərqlənir. Bütün növ stafilokok enterotoksinləri oxşar zəhərlənmə nümunəsinə səbəb olur: ürəkbulanma, qusma, mədəaltı vəzində ağrı, ishal, bəzən baş ağrısı, qızdırma, əzələ spazmı. Stafilokok enterotoksinlərinin bu xüsusiyyətləri onların superantigenik xüsusiyyətləri ilə bağlıdır: onlar intoksikasiyaya səbəb olan interleykin-2-nin həddindən artıq sintezinə səbəb olurlar. Enterotoksinlər bağırsağın hamar əzələlərini stimullaşdırır və mədə-bağırsaq hərəkətliliyini artırır. Zəhərlənmə ən çox stafilokokk ilə yoluxmuş süd məhsulları (dondurma, xəmir, tortlar, pendir, kəsmik və s.) və kərə yağı ilə konservləşdirilmiş qidaların istifadəsi ilə əlaqələndirilir. Süd məhsullarının infeksiyası inəklərdə mastit və ya qida istehsalı ilə əlaqəli insanlarda piyoinflamatuar xəstəliklərlə əlaqələndirilə bilər.
Beləliklə, stafilokoklarda müxtəlif patogen amillərin çoxluğu və onların yüksək allergen xüsusiyyətləri stafilokok xəstəliklərinin patogenezinin xüsusiyyətlərini, təbiətini, lokalizasiyasını, gedişatının şiddətini və klinik təzahürlərini müəyyən edir. Avitaminoz, diabet, toxunulmazlığın azalması stafilokok xəstəliklərinin inkişafına kömək edir.
Stafilokoklara qarşı müqavimət. Spor əmələ gətirməyən bakteriyalar arasında, mikobakteriyalar kimi stafilokoklar xarici amillərə qarşı ən böyük müqavimətə malikdirlər. Onlar qurumağa yaxşı dözürlər və toz infeksiyası mənbəyi olan quru incə tozda həftələr və aylar ərzində canlı və virulent qalırlar. Birbaşa günəş işığı onları yalnız bir neçə saat öldürür və yayılmış işıq çox zəif təsir göstərir. Onlar yüksək temperatura da davamlıdırlar: 80 ° C-ə qədər qızdırmaq təxminən 30 dəqiqə davam edir, quru istilik (110 ° C) onları 2 saat ərzində öldürür; aşağı temperaturlara yaxşı dözürlər. Kimyəvi dezinfeksiyaedici maddələrə həssaslıq çox dəyişir, məsələn, 3% fenol məhlulu onları 15 - 30 dəqiqə, xloraminin 1% sulu məhlulu isə 2 - 5 dəqiqə ərzində öldürür.
Epidemiologiyanın xüsusiyyətləri. Stafilokoklar dərinin və selikli qişaların daimi sakinləri olduğundan, onların törətdiyi xəstəliklər ya avtoinfeksiya (dəri və selikli qişaların müxtəlif zədələri, o cümlədən mikrotravmalar) və ya məişət təması, hava damcıları, hava-toz nəticəsində yaranan ekzogen infeksiya ola bilər. və ya alimentar (qida zəhərlənməsi üçün) yoluxma üsulları.
Xüsusilə tibb müəssisələrində (müxtəlif cərrahiyyə klinikaları, doğum evləri və s.) və qapalı qruplarda daşıyıcılar stafilokok infeksiyasına səbəb ola biləcəyi üçün patogen stafilokokların daşınması xüsusi əhəmiyyət kəsb edir. Patogen stafilokokların daşınması müvəqqəti və ya aralıq ola bilər, lakin onun daimi olduğu şəxslər (rezident daşıyıcılar) başqaları üçün xüsusi təhlükə yaradır. Belə insanlarda stafilokoklar uzun müddət və çoxlu sayda burun və boğazın selikli qişalarında saxlanılır. Uzunmüddətli daşımanın səbəbi tam aydın deyil. Bu, yerli toxunulmazlığın zəifləməsi (sekretor IgA çatışmazlığı), selikli qişanın disfunksiyası, stafilokokun yapışdırıcı xüsusiyyətlərinin artması və ya hər hansı digər xüsusiyyətləri ilə əlaqədar ola bilər.
Patogenezin xüsusiyyətləri və klinik mənzərəsi. Stafilokoklar dəri və selikli qişaların ən kiçik zədələnməsi ilə orqanizmə asanlıqla daxil olur və müxtəlif xəstəliklərə səbəb ola bilər - yetkinlik yaşına çatmayan sızanaqlardan (sızanaqlar) ağır peritonit, endokardit, sepsis və ya septikopiemiyaya qədər, ölüm nisbəti 80% -ə çatır. Stafilokoklar furunkul, hidradenit, abses, flegmon, osteomielit yaradır; müharibə dövründə - yaraların irinli ağırlaşmalarının tez-tez günahkarları; stafilokokklar irinli cərrahiyyədə aparıcı rol oynayır. Allergik xüsusiyyətlərə malik olmaqla, sedef, hemorragik vaskulit, qızartı, qeyri-spesifik poliartrit səbəb ola bilər. Qida stafilokok infeksiyası qida zəhərlənməsinin ümumi səbəbidir. Stafilokoklar sepsisin əsas günahkarlarıdır, o cümlədən yenidoğulmuşlarda. Xəstəliyin əlaməti olan və bir çox bakterial infeksiyalarda müşahidə olunan bakteriemiyadan (qanda bakteriya) fərqli olaraq, sepsis (septisemiya - çürümə) müəyyən klinik mənzərəyə malik müstəqil xəstəlikdir və onun əsasında bağırsaqların orqanlarının zədələnməsinə əsaslanır. retikuloendotelial sistem (birnüvəli faqositlər sistemi - SMF ). Sepsis zamanı patogenin vaxtaşırı qan dövranına daxil olduğu, bütün bədənə yayıldığı və hüceyrələrində çoxaldığı, toksinləri və allergenləri buraxdığı retikuloendotelial sistemə (SMF) təsir edən irinli bir fokus var. Bu vəziyyətdə, sepsisin klinik mənzərəsi patogenin növündən zəif asılıdır, lakin müəyyən orqanların məğlubiyyəti ilə müəyyən edilir.
Septikopemiya sepsisin bir formasıdır ki, bu zaman patogen müxtəlif orqan və toxumalarda irinli ocaqlar əmələ gətirir, yəni irinli metastazlarla mürəkkəbləşən sepsisdir.
Sepsis və septikopemiya zamanı bakteriemiya qısamüddətli və uzunmüddətli ola bilər.
İnfeksiyadan sonrakı immunitet mövcuddur, həm humoral, həm də hüceyrə faktorları ilə bağlıdır. Bunda mühüm rolu antitoksinlər, antimikrobiyal antikorlar, fermentlərə qarşı antikorlar, həmçinin T-limfositlər və faqositlər oynayır. Stafilokoklara qarşı toxunulmazlığın intensivliyi və müddəti kifayət qədər öyrənilməmişdir, çünki onların antigenik quruluşu çox müxtəlifdir və çarpaz immunitet yoxdur.
Laboratoriya diaqnostikası.Əsas üsul bakteriolojidir; seroloji testlər hazırlamış və tətbiq etmişdir. Zəruri hallarda (intoksikasiya zamanı) bioloji nümunə istifadə olunur. Bakterioloji tədqiqat üçün material qan, irin, boğazdan, burundan selik, yaralardan axıntı, bəlğəm (stafilokokk pnevmoniya ilə), nəcis (stafilokokk kolit ilə), qida intoksikasiyası zamanı - qusma, nəcis, mədə yuyulması, şübhəli qidalardır. . Material qanlı agarda (hemoliz), süd-duzlu (süd-sarısı-duz) agarda (NaCl hesabına yad bakteriyaların böyüməsi ləngiyir, piqment və lesitinaz daha yaxşı aşkar edilir) peyvənd edilir. İzolyasiya edilmiş kultura növ xüsusiyyətləri ilə müəyyən edilir, patogenliyin əsas əlamətlərinin və amillərinin (qızıl piqment, mannitol fermentasiyası, hemoliz, plazma koaqulaza) mövcudluğu müəyyən edilir, antibiotiklərə həssaslıq yoxlanılır, lazım olduqda fag tipləşdirilməsi aparılır. Seroloji reaksiyalar arasında RPHA və İFM irinli-septik xəstəliklərin diaqnostikasında, xüsusən teixoik turşuya və ya növə xas antigenlərə qarşı anticisimlərin müəyyən edilməsi üçün istifadə olunur.
Stafilokokların enterotoksigenliyini təyin etmək üçün üç üsuldan istifadə olunur:
1) seroloji - geldə çökmə reaksiyasında spesifik antitoksik serumların köməyi ilə enterotoksin aşkar edilir və onun növü müəyyən edilir;
2) bioloji - 1 kq bədən çəkisi üçün 3 ml - 2 dozada pişiklərə stafilokok bulyonu mədəniyyət filtratının venadaxili tətbiqi. Toksinlər pişiklərdə qusma və diareyə səbəb olur;
3) dolayı bakterioloji üsul - şübhəli məhsuldan təmiz stafilokokk mədəniyyətinin təcrid edilməsi və onun patogenlik amillərinin müəyyən edilməsi (enterotoksinin əmələ gəlməsi digər patogen amillərin, xüsusən də RNAazanın olması ilə əlaqələndirilir).
Ən sadə və ən həssas enterotoksinin aşkarlanması üçün seroloji üsuldur.
Müalicə. Stafilokok xəstəliklərinin müalicəsi üçün əsasən beta-laktam antibiotikləri istifadə olunur ki, bunlara qarşı həssaslıq ilk növbədə müəyyən edilməlidir. Şiddətli və xroniki stafilokok infeksiyalarında spesifik terapiya müsbət təsir göstərir - bir avtovaksin, toksoid, anti-stafilokok immunoqlobulinin (insan), antistafilokokk plazmasının istifadəsi.
Xüsusi profilaktika. Stafilokok infeksiyasına qarşı süni toxunulmazlıq yaratmaq üçün stafilokokk toksoidindən (maye və tablet şəklində) istifadə olunur, lakin o, yalnız I qrup faqlar tərəfindən parçalanan stafilokoklara qarşı antitoksik immunitet yaradır. Öldürülən stafilokoklardan və ya onların antigenlərindən olan peyvəndlərin istifadəsi, antimikrob antikorların yaranmasına səbəb olsa da, ancaq peyvəndin hazırlandığı serovariantlara qarşı. Patogen stafilokokların bir çox növlərinə qarşı effektiv yüksək immunogen vaksinin tapılması problemi müasir mikrobiologiyanın ən mühüm problemlərindən biridir.
STYLAB qidada və ətraf mühitdə qızıl stafilokokun tərkibini mikrobioloji üsullarla təhlil etmək, həmçinin PCR-dən istifadə etməklə bu bakteriyanın DNT-sini təyin etmək üçün test sistemlərini təklif edir.
qızıl stafilokok ( Stafilokokaureus) kokklar - globular bakteriyalara aid olan qram-müsbət hərəkətsiz, fakultativ anaerob qeyri-spor əmələ gətirən bakteriyadır. Bu mikroorqanizm sağlam insanların və heyvanların 15-50%-də dəri və selikli qişaların normal mikroflorasının bir hissəsidir.
Bu bakteriyanın bəzi suşları davamlıdır. Bunlardan ən məşhuru metisillinə davamlı Staphylococcus aureusdur (MRSA). Uzun müddətdir ki, xəstəxanadaxili infeksiyaların törədicisi hesab olunurdu, lakin 1990-cı illərin ortalarından bəri xəstəxanalarda olmayan insanlarda xəstəliklər haqqında bilinir. Çox vaxt bunlar irinli dəri lezyonları idi, lakin lezyonları cızarkən MRSA qan dövranına daxil oldu və digər orqanlara təsir etdi. Metisillinə davamlı Staphylococcus aureus orqanizmi məhv edən zəhərli antibiotik olan vankomisinə həssas idi.
Digər bir antibiotikə davamlı bakteriya vankomisinə davamlı Staphylococcus aureusdur (VRSA). Həkimlər və elm adamları MRSA və vankomisinə davamlı enterokokların (VRE) bağırsaqlarda yaşayan qeyri-patogen orqanizm olduğunu öyrəndikləri vaxtdan bu orqanizmi gözləyirdilər, çünki horizontal köçürmə bu bakteriyalar arasında gen mübadiləsinə imkan verir. VRSA ilk dəfə 2002-ci ildə kəşf edildi və həqiqətən də o dövrdə mövcud olan bütün güclü antibiotiklərə davamlı idi. Lakin onun zəif nöqtəsi köhnə sulfonamid - baktrimə qarşı həssaslığı idi.
Staphylococcus aureus torpaqda və suda olur, tez-tez qidaları çirkləndirir və bütün toxuma və orqanlara yoluxa bilər: dəri, dərialtı toxuma, ağciyərlər, mərkəzi sinir sistemi, sümüklər və oynaqlar və s.Bu bakteriya sepsisə, dərinin irinli zədələnməsinə və yara infeksiyalarına səbəb ola bilər.
Staphylococcus aureus üçün optimal temperatur 30-37 ° C-dir. 20-30 dəqiqə ərzində 70-80 ° C-yə qədər istiliyə, quru istiliyə - 2 saata qədər davam edə bilər. Bu bakteriya qurumağa və şoranlaşmaya davamlıdır və tərkibində 5-10% xörək duzu olan mühitlərdə, o cümlədən balıq və ət balığı və digər məhsullarda inkişaf edə bilir. Əksər dezinfeksiyaedici maddələr Staphylococcus aureus-u öldürür.
Staphylococcus aureus müxtəlif növ toksinlər ifraz edir. Dörd növdən olan membranotoksinlər (hemolizinlər) hemolizi təmin edir, bundan əlavə, təcrübələrdə membranotoksin α dəri nekrozuna səbəb olur və venadaxili tətbiq edildikdə heyvanların ölümünə səbəb olur. İki növ exfoliatinlər dəri hüceyrələrinə zərər verir. Leykosidin (Panton-Valentinin toksini) leykositlərin, xüsusilə makrofaqların, neytrofillərin və monositlərin hüceyrələrində su-elektrolit balansının pozulmasına səbəb olur ki, bu da onların ölümünə səbəb olur.
TR CU 021/2011 və digər sənədlərə uyğun olaraq, qidada koaqulaz-pozitiv stafilokokların tərkibi də məhdudlaşdırılır. Bunlar qan plazmasının laxtalanmasına səbəb olan koaqulaz fermenti istehsal edən bakteriyalardır. Əlavə olaraq S. aureus Bunlara daxildir S. delfin, S. hiyicus, S. intermedius, S. lutrae, S. pseudintermedius və S. schleiferi alt növlər. koaqulanlar... Bəzi məlumatlara görə, S. leei həm də koaguzal müsbətdir.
Nümunələrdə qızılı stafilokoku müəyyən etmək üçün həm mikrobioloji üsullardan, o cümlədən selektiv mühitdən, həm də PCR metodundan istifadə edərək DNT analizindən istifadə olunur.
