100 رورمكافأة من الدرجة الأولى
حدد نوع العمل عمل الدبلوم عمل الفصل ملخص أطروحة ماجستير تقرير تدريبي مقال تقرير مراجعة عمل امتحاني دراسة دراسة حل المشكلات خطة العمل إجابات على الأسئلة العمل الإبداعي مقالات رسم مقالات ترجمة عروض تقديمية كتابة أخرى زيادة تفرد النص أطروحة دكتوراه العمل المخبري المساعدة عبر الإنترنت
اكتشف السعر
المكورات العنقودية في المستشفيات 40-60٪
حاليًا ، لم يعد جنس Staphylococcus ينتمي إلى عائلة Micrococcaceae (منذ أوائل التسعينيات). لا توجد عائلة Micrococcaceae (حيث لا توجد علاقة وراثية بين مكوناتها). لقد اتحدوا فقط على أساس الكوتشي الهوائية الموجبة للجرام والاختيارية اللاهوائية ، مقسمة في عدة طائرات.
المكورات الدقيقة مرتبطة وراثيا بالفطريات الشعاعية.
ترتبط المكورات العنقودية وراثيا بالكلوستريديا.
عند البحث عن البكتيريا المغزلية ، البرافوتيللا ، البكتيريا (اللاهوائية الصارمة) في بيئة خالية من الأكسجين ، إذا كنت لا تستخدم وسيطًا مع المضادات الحيوية (أمينوغليكوزيدات) ، فإن المكورات العنقودية (والبكتيريا المعوية) ستقتل كل شيء !!!
طريقة البذر النضوب
المكورات العنقودية هي اللاهوائية الاختيارية. المكورات الدقيقة - الأكياس الهوائية الصارمة
التمايز هو اختبار مع تحلل الجلوكوز الهوائي واللاهوائي. جميع جلوكوز المكورات العنقودية + لا يزال مغطى بزيت الفازلين. Micrococcus ليس كذلك.
المكورات العنقودية - أكثر من 30 نوعًا ، مع نوع فرعي - 44. تم التفريق بينها من خلال 33 اختبارًا.
حد التسامح هو بيئة تحتوي على 7.5٪ وأكثر من كلوريد الصوديوم.
المكورات الدقيقة - لا تزال تنمو بنسبة 6.5٪ ، والمكورات العنقودية فقط هي الأعلى. (LSA - 10٪ كلوريد الصوديوم). بعض الأنواع هي 15٪ كلوريد الصوديوم.
أجار ملح الحليب - تنمو المكورات الدقيقة ، لأن هناك كلوريد الصوديوم أدناه.
البرجوازية - وسط تشابمان - أجار مانيتول ملح (1٪ مانيتول) - 7.5٪ كلوريد الصوديوم. مانيتول = مانيتول مثل الجلسرين = جلسرين
العزلة المستهدفة للمكورات العنقودية (على سبيل المثال ، أثناء الدراسات الصحية والبكتريولوجية). منطقة اصفرار بسبب تكوين الحمض. كبديل لها ، لدينا - ZhSA.
أولئك. إذا عزلنا cocci على وسط بـ ≥ 7.5 NaCl ، فعندئذ يكونون دائمًا جلوكوز + ، لأن إنها Staphylococcus و Micrococcus لا تنمو
يختلف شكل المكورات الدقيقة قليلاً عن المكورات العنقودية - كل من المستعمرات والخلايا أكبرمن المكورات العنقودية.
كل شخص لديه 7-10 أنواع من المكورات الدقيقة على الجلد (ويوجد حوالي 15 نوعًا في المجموع) ، يسود M. luteus - مستعمرات صفراء كبيرة على وسائط غير مثبطة (الاسم القديم هو sarcins الهواء ، ولا تنمو السراخ الحقيقية في الظروف الهوائية !!!). يتم تلوينها بالتساوي وفقًا للجرام. في شكل أكوام ، دفاتر ، حزم. البعض الآخر أبيض ، عديم اللون ، إلخ. م ليفي - المينا الأبيض. M. كريستي - المستعمرات الحمراء.
Staphylococcus aureus حسب بقع الجرام بشكل غير متساو (لون شينتز). العناقيد - غالبًا ما تنتج S. aureus ، بالإضافة إلى أكوام ، وأجهزة كمبيوتر محمولة ، وحزم ، وما إلى ذلك. المكورات العنقودية مع السوائل - انفرادي ، أزواج ، أكوام.
على الوسائط التي لا تحتوي على صفار ، لا تتشكل صبغة S. aureus وتكون المستعمرات رمادية.
لا تذوب الكاروتينات في الماء ولا تتسبب البيئة المحيطة بالمستعمرة أبدًا في ظهور البقع في المكورات العنقودية والمكورات الدقيقة.
أنجلينا هيس - قدمت أجار إلى أيام الأربعاء في منتصف القرن التاسع عشر
المكورات الدقيقة هي أيضًا UPMF - تعفن الدم. في المختبر حساس لكل شيء. في الحيوانات ، البنسلين - 5 وحدات لكل حقنة - على مستوى اختراع البنسلين - يعالج الإنتان. لكن العلاج في الجسم الحي صعب للغاية. الإنتان في مرضى جراحة المجازة القلبية. إذا دخلوا في جهاز القلب والرئة.
Planococcus - لسنا مهتمين - فهي ليست خطرة في مياه البحر وعلى البشر
المكورات Stomatococci - نوع واحد. تنمو بشكل جيد في CA (أي شيء ينمو على CA) ، لكنها لا تنمو على وسط الملح. ليس لديهم أهمية سريرية خاصة. UPMF. نادرًا ما تسبب التهاب اللثة والتهاب الفم (ولكن غالبًا ما تحدث هذه الأمراض بسبب اللاهوائية والفيروسات).
المكورات العنقودية الذهبية المذهبة
المكورات العنقودية الذهبية اللاهوائية - لا تنمو تحت الظروف الهوائية (اللاهوائية الصارمة)
لا توجد نباتات رمية بين المكورات العنقودية - كل الانتهازية... أكثر من 86 نوعا من أمراض تصنيف الأمراض.
S. المذهبة و S. البشروية - 45٪ من جميع المكورات العنقودية. التسمم الغذائي - فقط بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية (S. البشروية - يمكن أن تسبب فقط عند الرضع). تنتج السموم المعوية فقط بواسطة بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية.
كل شخص لديه 10-12 نوع من المكورات العنقودية تعيش على الجلد.
الأجزاء الأمامية من الأنف هي المنطقة الحيوية الرئيسية. يوجد أكثر من ذلك كله لكل وحدة مساحة.
يمكن أن تسبب S. epidermidis أيضًا تفشي عدوى المستشفيات جنبًا إلى جنب مع S. aureus.
عند الأطفال حديثي الولادة: التهاب الملتحمة S. البشروية في وقت سابق في موسكو في السبعينيات ؛ مستشفى الالتهاب الرئوي S. البشروية الآن.
تنتقل البلازميدات بمعدل حوالي ساعتين (بقيت المكورات العنقودية الذهبية على جلد شخص آخر لمدة ساعتين وحصلت على بلازميد جديد).
الناقل.
في مؤسسات التوليد ، لا يتم إجراء دراسة روتينية للمكورات العنقودية (فقط في حالة تفشي المرض) - الأمر 345. الملف الجراحي لديه 720 طلب حتى الآن (لا يتم تنفيذه في أي مكان في العالم). عدد الإصابات بالمكورات العنقودية هو نفسه في كل من "البرجوازيين" وفي بلدنا ، بغض النظر عن الصرف الصحي.
وفقًا لأنظمة الاختبار ، يمكن تمييز ما يصل إلى 12-15 نوعًا من المكورات العنقودية وأنواع عديدة من المكورات الدقيقة.
691 طلبًا - تم إلغاؤها في مستشفيات الولادة. لا يحتوي الترتيب الجديد 345 على جزء بكتيريولوجي ، لذلك ، في علم الجراثيم ، لا يزال الجميع يسترشد بـ 691 طلبًا.
تم إلغاء الفحص الروتيني لحمل المكورات العنقودية.
المكورات العنقودية إيجابية المخثر هي الآن 5 أنواع.
|
تجلط الدم |
مالتوز |
التندب |
انحلال الدم على CA مع دم الإنسان |
||||
|
يوم W / w |
تقريبا 100٪ |
||||||
|
± أقل من 50٪ |
|||||||
|
W / W الليل |
نادرا جدا ما يعطي المكورات العنقودية الذهبية تجلط الدم - مع الثقافات الأولية من مريض مع العلاج بالمضادات الحيوية على نطاق واسع. لذلك ، نعيد البذر على الدعامة ثم نعيد تشغيل البلازما. إذا لم يكن كذلك ، فهو ليس بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية.
صبغة على وسائط تحتوي على نسبة عالية من البروتين والضوء (YSA ، وسط مصل اللبن مع البروتين)
من بين المكورات العنقودية السلبية المخثرة ، يمكن أن يشكل البعض أيضًا صبغة. بروماجين S - يشكل صبغة صفراء على أي وسط
Acetoin = تفاعل أسيتيل ميثيل كاربينول - VP (Voges-Proskauer)
وسيطه مع الجلوكوز شبه سائل. عند تلقيحها بمحلول ملحي ، يكون الجلوكوز موجبًا دائمًا ، على الأقل في الجزء العلوي من العمود.
الجواب السلبي النهائي للسائل شبه السائل يعطى وسيطه مع الجلوكوز فقط في اليوم الخامس.
إذا كان الغاز - نفترض أن المكورات العنقودية مختلطة أم لا على الإطلاق.
تم استبعاد الوسط شبه السائل مع المانيتول في عام 1974 - وكانت الإجابة السلبية النهائية في اليوم الخامس فقط. توضع فقط على الكوب - الجواب في الصباح.
وسط كثيف بالجلسرين (1٪) (يمكن استبداله بأي سكر وكحول). لا يتم استخدام الوسائط السائلة وشبه السائلة للتمايز داخل الأجناس Staphylococcus و Micrococcus. المؤشر - أزرق بروموثيمول ، درجة الحموضة - محايد ؛ أو أحمر برومكريسول ، أحمر بروموثيمول. نزرع باللويحات - ما يصل إلى 10 ثقافات لكل طبق. شريط شعاعي - ما يصل إلى 6 ثقافات لكل طبق. حول المكورات العنقودية - اصفرار. المكورات الدقيقة لا تستخدم الجلسرين.
S. aurecularis في أنظمة الاختبار ، يعطي تشابهًا بنسبة 95-99٪ مع S. aureus ويمكن تمييزه فقط عن طريق تفاعل تخثر البلازما.
المكورات العنقودية السلبية المخثرة
في ظل ظروف معينة ، يمكنهم إنتاج الصباغ.
في المكورات العنقودية ، من المستحيل التفريق بين الأنواع عن طريق 1-2 اختبار.
ينمو في البلازما على شكل مانيتول + رقائق ، فقط 6-7 أنواع.
|
تجلط الدم |
الفوسفاتيز القلوية |
تريهالوز |
||||
|
أكثر من 20٪ سلالات |
||||||
|
سلالات 5-10٪ |
||||||
|
95-100٪ سلالات |
||||||
|
سلالات 5٪ |
||||||
|
S. السابروفيتيكوس |
سلالات 5٪ |
100٪ من بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية لها نشاط انحلالي.
Saprophiticus نادر جدا. التهاب المثانة والتهاب الإحليل عند الفتيات - حساسة للمضادات الحيوية والعلاج الكيميائي
لا يمكن أن تصبح سلبيات التخثر موجبة لتجلط الدم.
S. البشروية لا تكون أبدًا موجبة لتجلط الدم ، مهما كان مكتوبًا بالترتيب 720
يمكن أن تعيش الخلية غير البوغية لمدة 10-12 يومًا.
الفوسفاتيز القلوي هو سمة من سمات S. البشروية فقط.
الفوسفاتيز القلوي - فوسفات البارانيتروفينول أو الفينول فثالين الفوسفات من اختبارات ALP في الكيمياء الحيوية - 50 مجم لكل 100 مل من أجار حتى 20 سلالة لكل طبق.
فوسفات بارا نيتروفينول ← بارا نيتروفينول (أصفر) ولون الوسط أصفر ليمونى.
الفينول فثالين الفوسفات → الفينول فثالين (عديم اللون). قلونة محلول الأمونيا بنسبة 3-10٪ (بالتنقيط على غطاء الكوب) مستعمرات التوت.
يمكنك شراء محلول فوسفات الفينول فثالين بنسبة 10٪. مخزنة في الثلاجة لسنوات. 0.5 مل من المحلول لكل 100 مل من أجار.
S. البشروية حساسة بشكل طبيعي للنوفوبيوسين.
Lecitovitelase (عامل صفار البيض) - لا يستخدم في التصنيف الدولي ، هنا فقط.
20-25٪ S. البشروية موجبة ليسيثيناز.
80٪ من بكتيريا S. aureus - من أصل بشري - تعطي lecitovitelase. ليسيثيناز سلبي المكورات العنقودية الذهبية - من الحيوانات.
يمكن أن تعطي المكورات العنقودية الأخرى. أي إذا كان lecitovitelase + ، فهو 80٪ S. aureus ، و 20٪ staphylococci أخرى.
أكواب ALCA اللامعة - منطقة المقاصة (البروتياز) - ليست مهمة بالنسبة لنا.
العكارة - تسود الليباز - ليست مهمة أيضًا.
وسائط الدم البرجوازية - من كريات الدم الحمراء في الأغنام. كان يُعتقد أن السلالات البشرية من العنقودية الذهبية تنتج سمًا هيميًا ألفا فقط ، ولكن يوجد الآن سم هيموتوكسين بيتا أيضًا. لا يمكن تفكيكه إلا على كريات الدم الحمراء في الأغنام.
يعطي السم الهيموتوكسين بيتا منطقة من انحلال الدم غير المكتمل في يوم واحد ، وإذا قمت بوضعه في الثلاجة حتى نهاية يوم العمل ، فستتألق المنطقة تمامًا.
تنتج بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية 2 إنزيمين
1) الدناز بالحرارة (نوكلياز) - يوجد في جميع المكورات العنقودية وفي معظم الميكروبات الأخرى.
2) DNase القابل للحرارة (نوكلياز) - متوفر فقط في S. aureus. لن تتلف بالغليان أو حتى التعقيم قصير المدى.
ووفقًا لأوامرنا ، يتم تحديد DNase القابل للحرارة فقط (لا معنى له).
في الطعام الساخن (عندما يتم إخفاء حقيقة PTI) ، يتم تدمير المكورات العنقودية ، ولكن تبقى السموم. من خلال وجود DNase القابل للحرارة ، يمكن تحديد ما إذا كانت S. aureus موجودة.
بأوامر من DNA عالي البلمرة 1-2 مجم لكل 1 مل من الوسط (pH = 8.0). زراعة البلاك (أو الحقن). 24 ساعة. نقوم بتطوير ، صب 3N HCl في كوب ، يتم تكوين راسب من DNA مع HCl ، وحيث يعمل DNase ، نرى منطقة المقاصة. في S. المذهبة ، نصف قطرها 10-12 ملم ، في S. البشروية نصف قطرها 4-5 ملم. حول الفتحة المزروعة المقتولة من S. aureus - 7-8 ملم.
تشكل S. البشروية DNase القابل للحرارة فقط ، S. aureus - كلاهما DNases - المنطقة أكبر.
صفحة 38 من 91
الأحياء الدقيقة الطبية الخاصة
مسبب المرض
المكورات الممرضة التي تسبب أمراضًا لدى البشر بمظاهر سريرية مختلفة تشمل: 1) المكورات العنقودية ، 2) المكورات العقدية ، 3) المكورات الرئوية ، 4) المكورات السحائية ، و 5) المكورات البنية.
يمكن تقسيمها إلى مجموعتين فرعيتين من خلال سمة tinctorial (التلوين): المكورات موجبة الجرام (المكورات العنقودية والمكورات العقدية والمكورات الرئوية) ، والمكورات سالبة الجرام (المكورات السحائية والمكورات البنية).
السمة المميزة لجميع المكورات الممرضة هي القدرة على التسبب في عمليات التهابية قيحية ، وهذا هو السبب في أنها تسمى أيضًا cocci (قيحي).
يتم التعبير عن الخصائص القيحية الأكثر حدة واستمرارًا في المكورات العنقودية.
ستافيلوكوكي
خصائص التشكل والتركيبة. المكورات العنقودية - المكورات العنقودية (التي عزلها باستور لأول مرة في عام 1880) لها شكل كرات عادية يبلغ متوسط قطرها 0.8-0.9 ميكرون. في مسحة من ثقافة نقية ، يتم ترتيب المكورات العنقودية في أكوام وعناقيد ، تشبه عنقود العنب (الشكل 60). في القيح والمواد المرضية الأخرى ، يمكن للمرء أن يجد غالبًا سلاسل مفردة ومزدوجة وحتى قصيرة. إنها ترسم جيدًا بدهانات الأنيلين الأساسية ، وهي موجبة الجرام ، ولا تشكل جراثيم ، ولا تشكل كبسولات ، ولا تتحرك.
الخصائص الثقافية والبيوكيميائية. تنمو المكورات العنقودية بشكل جيد على وسائط المغذيات التقليدية في وجود وغياب الأكسجين الحر. درجة الحرارة المثلى 37 درجة.
أرز. 60. المكورات العنقودية (أ) والمكورات العقدية (ب) في الثقافة النقية.
أرز. 61. مستعمرات المكورات العنقودية على أجار ميزوباتاميا. الأشعة فوق البنفسجية. عشرين.
أرز. 62. البذر عن طريق الحقن في الجيلاتين.
المستعمرات الفردية على سطح الآجار عبارة عن أقراص مستديرة ذات بنية متوسطة الحجم ، محدبة ، رطبة ، معتم ، متجانسة أو ذات بنية دقيقة الحبيبات (انظر الشكل 01). يعتمد لون المستعمرات على الصبغة التي تنتجها المكورات العنقودية ويمكن أن تكون ذهبية (Staphylococcus aureus) وأصفر ليمونى (Staphylococcus citreus) وأبيض (Staphylococcus albus). عندما يكون مائلًا على أجار مائل ، يتم تكوين نمو وفير للمكورات العنقودية الذهبية ، مصطبغة.
أصباغ المكورات العنقودية عبارة عن كروميات شحمية ، غير قابلة للذوبان في الماء وتلطيخ الثقافة فقط ، وليس وسط الثقافة. يكون تكوين الصباغ مكثفًا عندما تنمو الكائنات الحية الدقيقة في وجود الأكسجين ، في درجة حرارة الغرفة ، في الضوء.
عند البذر بالحقن في الجيلاتين في اليوم 2-3 من النمو ، تكون منطقة التسييل ملحوظة على سطح الوسط. مع تسييل المزرعة ، تسقط إلى القاع على شكل رواسب قطنية (الشكل 62).
في المرق ، تعطي المكورات العنقودية نموًا وفيرًا. بعد مرور 24 ساعة في الترموستات ، يصبح المرق عكرًا ، وتتشكل راسب في قاع أنبوب الاختبار.
تتخثر المكورات العنقودية بسرعة اللبن الرائب ، مما يعطيه تفاعلًا حمضيًا.
تخمر (بدون غاز) لاكتوز ، جلوكوز ، مالتوز ، مانيتول. عادة ما تميز القدرة على تحطيم المانيتول السلالات المسببة للأمراض من المكورات العنقودية.
تشكل المكورات العنقودية المسببة للأمراض الموجودة على ألواح أجار الدم مستعمرات محاطة بمنطقة انحلال الدم ، وتخثر بلازما الدم السيترية.
مقاومة. المكورات العنقودية الذهبية هي واحدة من الميكروبات شديدة المقاومة. إن درجة حرارة 80 درجة تقتله عندما يبتل في غضون 10 دقائق. يتم الحفاظ على درجة حرارة المكورات العنقودية 70 درجة لمدة تصل إلى ساعة واحدة. حمض الكربوليك (محلول 3-5٪) يقتلهم في غضون 15-30 دقيقة. في القيح ، تستمر المكورات العنقودية الذهبية لفترة طويلة.
السموم ، إنزيمات المكورات العنقودية ، إمراضها للحيوانات. تنتج المكورات العنقودية المسببة للأمراض عددًا من السموم والإنزيمات. المكورات العنقودية hemolichin يذيب خلايا الدم الحمراء. هذا السم قابل للتحلل بالحرارة (يتحلل عند 55 درجة) ، وينتمي إلى السموم الخارجية ، وعند تحصين الحيوانات به ، يمكن الحصول على مضاد السموم. كما أن ترشيح مستنبتات المكورات العنقودية له تأثير نخر وقاتل. لقد ثبت الآن أن الهيموليسين والسم النيكروتوكسين والسم القاتل هي مكونات لسم خارجي واحد من المكورات العنقودية. هذه السموم لا تنفصل عن بعضها البعض ، والكشف عن أحدها بمثابة دليل على الإمراضية للمكورات العنقودية المعزولة. تنتج بعض السلالات الانحلالية للمكورات العنقودية الذهبية سمًا معويًا ، والذي يسبب التهاب المعدة والأمعاء الحاد. غالبًا ما يوجد الليوكوسيدين ، وهو السم الذي يدمر الكريات البيض ، في مرشحات مزارع المكورات العنقودية. يتم عزل المكورات العنقودية المسببة للأمراض من الإنزيمات: 1) تخثر البلازما az y - بلازما التخثر ، 2) الفيبرينوليسين - إذابة جلطات الفيبرين ، 3) الهيالورونيداز - محلول حمض الهيالورونيك ، مادة تلتصق بعناصر النسيج الضام ، 4) البنسليناز - تعطيل - و 5) منطقة غائمة البنسليناز حول المستعمرات على أجار صفار الملح (وسط تشيستوفيتش).
من بين حيوانات المختبر ، تعتبر الأرانب ، وبدرجة أقل ، خنازير غينيا والفئران الأكثر حساسية للمكورات العنقودية. في الأرانب ، مع الحقن داخل الأدمة ، يظهر نخر واضح ، مع الحقن تحت الجلد ، تتطور الخراجات ، وتؤدي العدوى بسلالات شديدة الضراوة من المكورات العنقودية إلى تعفن الدم وموت الحيوانات. القطط الصغيرة والفئران الصغيرة هي الأكثر حساسية للسموم المعوية العنقودية.
تصنيف المكورات العنقودية. إن التصنيف القديم للمكورات العنقودية من خلال الصبغة التي تفرزها (الذهبي والأبيض والليموني الأصفر) لا يجعل من الممكن تحديد قدرتها المرضية بشكل صحيح. لذلك ، في الوقت الحاضر ، يعتبر تصنيف المكورات العنقودية الذي اقترحه جروس هو الأكثر صحة. وفقًا لهذا التصنيف ، يتم تقسيم جميع المكورات العنقودية إلى ثلاث مجموعات: مسببة للأمراض وممرضة قليلاً وغير مسببة للأمراض.
المجموعة الأولى - المكورات العنقودية المسببة للأمراض:
أ) تتكون منطقة انحلال دم واضحة على ألواح بها نسبة 5٪ من أجار الدم ؛
ب) عندما تُعطى داخل الأدمة للأرنب ، فإنها تسبب ظاهرة نخر واضح ، تنتهي أحيانًا بموت الحيوان ؛
ج) إنتاج إنزيم البلازما ، الذي يسبب تخثر البلازما في غضون ساعتين ؛
د) يتم تخصيصها بشكل رئيسي من المرضى الذين يعانون من تعفن الدم أو عدوى قيحية حادة.
المجموعة الثانية هي المكورات العنقودية الضعيفة المسببة للأمراض:
أ) تتشكل منطقة انحلال دم خفيف غير كامل على ألواح أجار الدم ؛
ب) عند حقنها داخل الأدمة ، يتسبب الأرنب في احمرار الجلد في موقع الحقن ، وأحيانًا ارتشاح ، وغالبًا بدون نخر ؛
ج) عندما يتم تلقيحها في بلازما السترات ، فإنها تسبب التخثر في غضون 6 ساعات وما بعدها ؛
د) تفرز من سطح الجلد أثناء التهاب الجريبات ، من الأغشية المخاطية أثناء نزلات الجهاز التنفسي العلوي ، من سطح الجروح ، ولكن ليس من أعماقها.
المجموعة الثالثة هي المكورات العنقودية غير المسببة للأمراض:
أ) لم يتم الكشف عن انحلال الدم على ألواح أجار الدم ؛
ب) مع الإعطاء داخل الأدمة للأرانب ، لا يتم ملاحظة ظاهرة النخر والتسلل ، وفي بعض الحالات ، يظهر احمرار الجلد ؛
ج) تفاعل تخثر البلازما سلبي.
د) توجد باستمرار على الجلد السليم والأغشية المخاطية للبلعوم والأنف والهواء.
التسبب في الأمراض والأمراض في البشر. المكورات العنقودية هي ميكروبات شائعة جدًا. توجد في الهواء والماء والتربة عند البشر - بشكل دائم تقريبًا على الجلد والأغشية المخاطية. وهذا ما يفسر حقيقة أن المكورات العنقودية الذهبية هي العامل المسبب الأكثر شيوعًا لجميع أنواع القيح. يؤدي تلف الجلد والأغشية المخاطية أو انخفاض مقاومتها إلى فتح "البوابة" لعدوى المكورات العنقودية.
في أغلب الأحيان ، يتأثر الجلد. المكورات العنقودية هي العوامل المسببة للدمامل - التهاب صديدي لبصيلات الشعر. إذا أصبحت الدمامل متعددة في طبيعتها ، فإن المرض يسمى داء الدمامل. عندما تندمج عدة دمامل معًا ، وتشكل ارتشاحًا صديديًا أكثر اتساعًا ، يحدث الجمرة.
تم العثور على المكورات العنقودية مع الخراجات (الخراجات) ، في الجروح المتقيحة ، مع نزلات الأغشية المخاطية ، وتسمم الدم وتسمم الدم (تعفن الدم مع تشكيل بؤر صديدي في الأعضاء الداخلية). يمكن أن تسبب السلالات المعوية من المكورات العنقودية الذهبية التسمم الغذائي. لوحظ هذا الأخير نتيجة لاستهلاك الحليب ومنتجات الألبان الأخرى المصابة بالمكورات العنقودية ، والكعك بالكريمة ، وما إلى ذلك ، حيث تجد المكورات العنقودية في هذه المنتجات الظروف المثلى لتكاثرها. يمكن أن تنتقل المكورات العنقودية المسببة للأمراض إلى اللبن إما من الأبقار المصابة بالتهاب الضرع ، أو من أيدي الحلابات المصابات بتقيح الجلد.
حصانة. لا توجد مناعة فطرية للمكورات العنقودية في البشر. ومع ذلك ، فإن الشخص لديه مقاومة كبيرة لهذه الكائنات الحية الدقيقة ، والتي يفسرها الدور الوقائي للجلد ووجود الأجسام المضادة في الدم.
على ما يبدو ، يمكن أن تحدث المناعة المكتسبة ، كما يتضح من زيادة عيار الأجسام المضادة لدى المرضى وأولئك الذين تعافوا. ومع ذلك ، فإن هذه المناعة غير مستقرة. علاوة على ذلك ، فقد لوحظ أن العديد من الأشخاص الذين أصيبوا بالدماء لديهم قابلية متزايدة للإصابة بالمكورات العنقودية.
يمكن أن تضعف مقاومة المكورات العنقودية لأسباب مختلفة - مرض السكري ، والصدمات ، والأمراض المنهكة ، وما إلى ذلك.
التشخيص الميكروبيولوجي. دراسة القيح. في أغلب الأحيان ، القيح هو المادة المستخدمة في البحث الميكروبيولوجي. لهذا الغرض ، مع الآفات المفتوحة ، بعد التنظيف الأولي لسطح الجرح بقطعة قطن معقمة ، تتم إزالة التفريغ من الأجزاء العميقة من الجرح. في العمليات المغلقة (الدمل ، الخراج) ، لنفس الغرض ، بعد تطهير الجلد ، يتم إجراء ثقب في تركيز التقوية بحقنة معقمة. من القيح الناتج ، يتم عمل مسحات ، ملطخة باللون الأزرق والجرام ، وميكروسكوب.
وفقًا لموقع cocci وخصائص tinctorial ، من الصعب التفريق بين المكورات العنقودية والمكورات العقدية ، لذلك ، يشرعون في البحث البكتريولوجي ، أي تلقيح القيح على الأطباق مع أجار الدم البسيط ، على أجار صفار الملح (انظر القسم " علم الأحياء الدقيقة الصحية "، ص 454) وعلى وسط التخصيب (مرق السكر). الكؤوس المنزوعة البذور ، مقلوبة رأسًا على عقب ، وتوضع المرق في منظم حرارة عند 37 درجة لمدة يوم أو يومين.
على ألواح أجار الدم ، تشكل المستعمرات مناطق انحلال الدم ، والتي يبلغ قطرها غالبًا عدة أضعاف قطر المستعمرة. تشكلت هذه المناطق الشفافة عديمة اللون من انحلال الدم بسبب انحلال خلايا الدم الحمراء التي تسببها المكورات العنقودية الهيموتوكسين. على الأطباق مع أجار صفار الملح ، تنمو المكورات العنقودية المسببة للأمراض مع تكوين صبغة ذهبية ومنطقة غائمة - على شكل كورولا قوس قزح حول المستعمرة. يتم تحضير مستحضر من إحدى المستعمرات ملطخًا بالجرام ومجهريًا. إن اكتشاف الكوتشي الموجب للجرام في التحضير ، الموجود في شكل عناقيد عنب ، يعطي الحق في إصدار نتيجة إيجابية تقريبية. ثم تتم زراعة ما تبقى من المستعمرة على مائل أجار للحصول على ثقافة نقية. من الضروري التفريق بين المكورات العنقودية المسببة للأمراض وغير المسببة للأمراض ، أي دراسة النمو على أجار الدم ، وأجار صفار الملح ، والتلقيح في بلازما النترات وتحديد السمية في الحيوانات.
اختبار التخثر بالبلازما. لتفاعل تخثر البلازما ، يوصي G.V. Vygodchikov بالتقنية التالية. يؤخذ 10 مل من الدم من قلب أرنب ، ويوضع في أنبوب اختبار مع 1 مل من محلول 5٪ سيترات الصوديوم. يتم طرد الدم وطرد البلازما. يتم تخفيف البلازما الناتجة قبل التجربة بمحلول ملحي 1: 4 وتصب في أنابيب معقمة 0.5 مل. يتم تلقيح مستعمرات المكورات العنقودية بحلقة في أنابيب مع نترات بلازما الأرانب ، وتوضع في منظم حرارة عند 37 درجة ويتم فحص تخثر البلازما كل 2-3 ساعات. تخثر المكورات العنقودية المسببة للأمراض البلازما في غضون 2-10 ساعات ، وغالبًا في غضون 4 ساعات.
اختبار السمية. يتم تحديد سمية مستنبتات المكورات العنقودية من خلال التجربة على الأرانب ، والسم المعوي - على القطط الرضيعة. يتم تحضير معلق للميكروبات في محلول ملحي من جولة من المكورات العنقودية على أجار مائل ويتم ضبطها وفقًا لمعيار بصري مع حساب 2 مليار جسم جرثومي في 1 مل من المعلق. على جانب أو خلف الأرنب ، يتم نتف الصوف ويتم حقن الحيوان داخل الأدمة بـ 0.2 مل من المعلق الميكروبي. مع رد فعل إيجابي ، يتشكل ارتشاح في موقع الحقن ، ثم نخر.
للكشف عن السم القاتل ، يتم حقن الأرنب عن طريق الوريد مع ترشيح مرق ثقافة المكورات العنقودية بمعدل 0.75 مل لكل 1 كجم من وزن الجسم. يحدث موت الحيوان في 15 دقيقة.
لتحديد السموم المعوية ، تتغذى القطط التي يتراوح عمرها بين 1.5 و 2 شهرًا (وزنها 400 جم) على المنتج الأصلي الملوث أو مزرعة الألبان العنقودية. تظهر علامات التسمم (الإسهال والقيء أحيانًا) في غضون 30-60 دقيقة. تتم الملاحظة لمدة 4-6 ساعات ، وإذا لم يكن للقطط أي تفاعل خلال هذا الوقت ، فإن الاختبار البيولوجي يعتبر سلبيًا.
فحص الدم. إذا اشتبه المريض في تعفن الدم ، يتم أخذ 10 مل من الدم من الوريد الزندي باستخدام حقنة ويتم تلقيحها في 100-200 مل من مرق السكر. يتم وضع البذر للتخصيب لمدة 24-48 ساعة في منظم الحرارة. في الحالة الإيجابية ، يصبح الوسط غائمًا ، وفي المسحات منه ، يتم العثور على مكورات موجبة الجرام ذات شكل وموقع مميزين. يُزرع المرق في طبق مع أجار الدم ويتم إجراء مزيد من البحث على النحو الموصوف أعلاه. يتم حفظ المرق في منظم الحرارة لمدة 10 أيام ، ويتم زرع 5 ٪ من أجار الدم كل يومين.
البحث عن مواد أخرى. عند فحص المواد الملوثة بعدد كبير من الميكروبات الأجنبية (البراز ، البلغم) ، يوصى باستخدام أجار مع 7.5٪ كلوريد الصوديوم ، يضاف إليها 10٪ من الحليب الدافئ منزوع الدسم (بتروفيتش). في مثل هذا أجار ، يتم قمع نمو البكتيريا الدخيلة بشكل كبير.
كتابة Phage. تستخدم كتابة العاثيات مجموعة من لاقمات المكورات العنقودية النموذجية ، تتكون من 21 لاقمًا ، مقسمة إلى أربع مجموعات. كل فجوة نموذجية قادرة على التكاثر فقط في سلالة المكورات العنقودية المقابلة. تعد كتابة الملتهمة للمكورات العنقودية ذات أهمية خاصة في
الفحص الصحي والبكتريولوجي للمنتجات الغذائية لتحديد مصدر العدوى وربط الوباء.
العلاج النوعي والعلاج الكيميائي. يستخدم لقاح المكورات العنقودية على نطاق واسع لعلاج الالتهابات المتكررة والمزمنة مثل داء الدمامل. للوقاية من هذه الأمراض ، يتم استخدام الذيفان.
في علاج عدوى المكورات العنقودية ، يتم أيضًا استخدام الأدوية العلاجية الكيميائية لسلسلة السلفوناميد (نور سلفازول ، سلفوديميزين ، وما إلى ذلك) ، والمضادات الحيوية (البنسلين بجرعات كبيرة ، الإريثروميسين ، أوكساسيللين ، إلخ) ، جرثومة المكورات العنقودية (للآفات الجلدية) بنجاح. في حالة الإنتان العنقودي الحاد ، يوصى باستخدام بلازما المكورات العنقودية المفرطة المناعية وجلوبيولين جاما المأخوذ من متبرعين محصنين بذوفان.
يمكن أن تهاجم عدوى المكورات العنقودية المنتشرة ، بدءًا من أمراض الجهاز التنفسي العلوي ، الجسم بأكمله. بسبب الآفات السائدة في بعض الأعضاء ، يمكن أن تكون مادة البحث في عدوى المكورات العنقودية هي البلغم والقيح والدم وغسيل البلعوم الأنفي وإفرازات المسالك البولية والطعام (منتجات الألبان والحلويات بشكل رئيسي) والغسيل من الأسطح المصابة والقيء والإفرازات ، تم اختياره بما يتفق بدقة مع قواعد الجانب.
عند تحليل المواد ، يتم استخدام الطرق المجهرية والبكتريولوجية (عزل الثقافة النقية للميكروبات وتحديدها) والطرق البيولوجية.
I. طريقة الميكروسكوب
الطريقة المجهرية ذات أهمية مستقلة فقط للعمل المعقم مع المواد المعقمة في الشخص السليم (على سبيل المثال ، الدم والسائل النخاعي). الكشف عن المكورات العنقودية في هذه الحالة له قيمة تشخيصية مستقلة. في حالات أخرى ، يتم استخدام الطريقة المجهرية كأسلوب تقريبي أولي. عند استخدامه ، من الضروري الانتباه إلى عدد الكائنات الحية الدقيقة في كل مجال من مجالات الرؤية (مع أمراض المكورات العنقودية ، يمكن لمسببات الأمراض أن تحل محل بقية البكتيريا وتوجد في مسحات بكميات كبيرة) ، وحجم عناقيد (مع الإمراضية العالية ، تنقسم المكورات العنقودية بشكل مكثف ، وليس لدى الأفراد وقت للتفريق وإعطاء مجموعات كبيرة - مجموعات) ، وحجم الأفراد (المكورات العنقودية المسببة للأمراض صغيرة جدًا في الغالب).
ثانيًا. الطريقة البكتيرية
الطريقة البكتريولوجية هي عزل الثقافة النقية لمسببات الأمراض والتعرف عليها.
تعد المكورات العنقودية من أكثر الكائنات الحية الدقيقة شيوعًا. تم العثور عليها أيضًا في الشخص السليم. لذلك ، من أجل تشخيص المرض ، وإثبات طبيعته من المكورات العنقودية ، من المهم للغاية إثبات إمكانية إصابة البكتيريا المعزولة. في الوقت نفسه ، يرتبط حل مشكلة التشخيص ارتباطًا وثيقًا بتوضيح قضايا علم الأوبئة والعلاج والوقاية من هذه العدوى. على هذا الأساس ، تتكون الطريقة البكتريولوجية من عدة مراحل واتجاهات.
تنعكس جميع مراحل الدراسة المذكورة أعلاه في الرسم التخطيطي:
يجب إجراء عزل الثقافة النقية للعامل الممرض مع مراعاة الخصائص الثقافية للملح الملحي (تطور جيد في وجود محتوى فائض من ملح الطعام مع قمع متزامن للنباتات الدقيقة الأخرى) ، والحاجة العالية للبروتينات والكربوهيدرات. يتم تحقيق ذلك من خلال استخدام وسائط المغذيات الاختيارية التي تؤدي في نفس الوقت وظائف التشخيص التفريقي.
تكوين الوسيط الغذائي لـ STAPHYLOCOCCI
عند إجراء التحليل ، من الضروري مراعاة الانحرافات التالية عن الخصائص النموذجية للمكورات العنقودية.
تحديد المؤشرات الأساسية للفيروسات
المؤشرات الرئيسية لضراوة المكورات العنقودية هي النشاط الانحلالي ، وإنتاج إنزيم تجلط الدم في البلازما والسمية النخرية.
عند تقييم درجة الإمراضية للثقافات ، تُستخدم الاختبارات الإجمالية على نطاق واسع ، والتي بموجبها يمكن تقسيم جميع المكورات العنقودية إلى ثلاث مجموعات. تشتمل المجموعة الأولى من المكورات العنقودية المسببة للأمراض بلا شك على بكتيريا (نشاط تحلل دموي حاد ، بلازما سترات التخثر خلال 1-2 ساعة ولها خصائص نخرية واضحة.المجموعة الثانية من المكورات العنقودية الانتهازية أو متوسطة الأمراض هي طوابع تعطي انحلال دم ضئيل على أجار بنسبة 5 ٪ دم الأرانب أو الحمل ، تخثر البلازما بعد 6 ساعات ، وعند إعطائه داخل الأدمة إلى أرنب يسبب احمرارًا وتسللًا.تشمل المجموعة الثالثة من المكورات العنقودية غير المسببة للأمراض مزارع لا تتحلل كريات الدم الحمراء ، ولا تخثر البلازما وليس لها خصائص نخرية.
وبالتالي ، فإن تقييم ضراوة المكورات العنقودية المعزولة يعتمد على اختبار شامل لثلاثة مؤشرات للتأثير الممرض.
في الوقت نفسه ، هناك مؤشرات رسمية على أنه عندما يتم عزل المكورات العنقودية من منتجات حمض اللاكتيك ، خاصة تلك التي تم تخزينها في الثلاجة لفترة طويلة ، قد تختفي العلامات الفردية للإصابة مع الحفاظ على القدرة على تكوين السموم ككل. وبالتالي ، يجب اعتبار المكورات العنقودية التي تسقط فيها إحدى علامات الإمراضية مسببة للأمراض (رسالة تعليمات معهد إيريسمان لعام 1967).
يتم إجراء تحديد الهيموتوكسين عن طريق التلقيح المباشر للثقافة الموجودة على MPA في الدم التي تحتوي على 5-10 ٪ من دم الأرانب أو الخروف منزوع الرجفان. إن إضافة دم الإنسان أمر غير مرغوب فيه ، لأن المكورات العنقودية التي تفرز الهيموليسين ألفا لا تدمر كريات الدم الحمراء البشرية ، وبالتالي ، فإن الحكم على إمراضية هذه السلالة المعزولة عن شخص مريض لن يكون موثوقًا به.
في بعض الأحيان ، نتيجة لتنوع المكورات العنقودية ، وكذلك أثناء التخزين طويل الأمد للثقافات في ظروف غير مواتية ، يضعف النشاط الانحلالي للأخير أو يختفي تمامًا. لاستعادة قدرة البكتيريا على التحلل الدموي ، يُنصح بإضافة خليط مختزل بمعدل 0.015 جم لكل 10 مل من الوسط إلى الوسط الذي يتم اختبار السمية الدموية عليه. يتكون الخليط من جزء واحد Na 2 SO 3 (كبريتات الصوديوم) وجزئين Na HSO 3 (ثنائي كبريتات الصوديوم). يتم تخزين خليط إعادة التكوين في الظلام وإضافته إلى الوسط المنصهر ex tempore. من أجل الحفاظ على انحلال الدم للسموم الخارجية في مزرعة المكورات العنقودية ، يوصى أيضًا بإضافة 100 مل من المحلول المشبع من Na 2 S 2 0 3 (عامل الاختزال) و 250 مل من محلول مشبع من الهيدروكينون (مثبت) إلى 100 مل من المزرعة ترشيح. يقترح VI Ioffe إضافة 0.1 مل فقط من محلول 1٪ كبريتات الصوديوم Na 2 SO 3 لكل 0.4 مل لاستعادة النشاط الانحلالي.
يتم تحديد البلازموجلاز عن طريق تلقيح مزرعة من المكورات العنقودية في أنبوب ضيق مع 0.5 مل من 5 ٪ من بلازما الأرانب أو سترات الإنسان. توضع المحاصيل في منظم الحرارة لمدة 6-10 ساعات مع تسجيل النتائج بعد 1 و 2 و 3 و 6 ساعات. تعطي بلازما دم الإنسان نتائج غير متسقة ، وبلازما المتبرع بالجلوكوز والميرثيولات غير مناسبة بشكل عام. إذا كان من المستحيل استبدال البلازما البشرية ، فلا يتم استخدامها إلا بعد التخفيف بمقدار 10 أضعاف بالمحلول الملحي.
جنبًا إلى جنب مع الطريقة التقليدية لتحديد تجلط الدم في البلازما ، يتم أيضًا استخدام تفاعل تخثر البلازما على الزجاج أو "اختبار الانزلاق" المعجل. تعتمد هذه الطريقة على قدرة المكورات العنقودية النشطة في تجلط الدم على الالتصاق ببلازما الدم وتخثرها. لا تمتلك سلالات المخثرات السلبية هذه الخاصية. لإجراء التفاعل ، خذ قطرة ماء ، وعلق المزرعة الاختبارية فيها ، ثم أضف قطرة واحدة من أرنب مخفف أو بلازما دم بشري. بعد 15-60 ثانية ، تتشكل جلطة بلازما. يعتبر رد الفعل المتأخر (بعد دقيقة) مشكوكًا فيه ، والتفاعل الذي حدث بعد 3 دقائق يعتبر سلبيًا.
يتم تحديد النيكروتوكسين عن طريق الحقن داخل الأدمة بمقدار 0.2 مل من المعلق البالغ 2 مليار ، وزراعة أجار يومية من المكورات العنقودية في محلول ملحي للأرنب. تتم مراقبة الحيوان في غضون 24-48 ساعة. فقط التسلل مع مركز مصفر وحافة داكنة وحدود حمراء زاهية على طول المحيط مع ظاهرة النخر اللاحقة يعتبر رد فعل إيجابي.
تحديد المؤشرات الإضافية لمسببية الجراثيم
يتم تحديد إنزيم الهيالورونيداز عن طريق اختبار المزرعة على ركيزة تحتوي على حمض الهيالورونيك. كأخير ، يتم استخدام مستخلص من الحبل السري لحديثي الولادة. لهذا الغرض ، يتم غسل الحبال السرية بكمية 3-5 قطع ، التي تم جمعها في محلول 0.5 ٪ من حمض الكاربوليك ، جيدًا من الدم بالماء المقطر ، وتنظيف الأوعية الدموية ، وتقطيعها جيدًا وتمريرها عبر مفرمة اللحم مرتين. ثم يتم وزن اللحم المفروم الناتج وسكب بحجم ونصف من الماء المقطر ، وبعد ذلك يترك في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة ، مع الرج من حين لآخر. ثم يتم سكب كل هذه الكتلة في قمع مع 2-3 طبقات من الشاش المعقم ، مفلتر ، معصر ، وإلقائه في الماء المغلي لمدة دقيقة ، بما يتوافق من الناحية الكمية مع الوزن الأولي للحبال المكسرة. دعها تغلي. يتم ترشيح السائل بسرعة من خلال طبقة مزدوجة من الشاش المعقم في أنابيب معقمة وتضاف بضع قطرات من الكلوروفورم إلى كل منها للحفظ والركيزة. ثم تُغلق الأنابيب بسدادة قطنية وتوضع في البرد لحفظها. يبقى المستخلص دون تغيير تقريبًا في ظل هذه الظروف لعدة أشهر.
يتم إجراء اختبار الهيالورونيداز على مرحلتين. أولهما تحديد جرعة العمل لحمض الهيالورونيك (تجرى التجربة مرة واحدة فقط بعد تحضير المستخلص وتتكرر 1-2 مرات في الشهر أثناء التخزين طويل الأمد) ، والثاني هو الكشف عن الهيالورونيداز إنزيم.
| مخطط لتحديد جرعة العمل وعيار حمض الهيالورونيك | ||||||
| الكواشف | أنابيب الاختبار ومحتوياتها بالمليلتر | |||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
| مستخلص حمض الهيالورونيك | 0,1 | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0,5 | 0,6 |
| حمية. الماء أو نات. المحلول | 0,9 | 0,8 | 0,7 | 0,6 | 0,5 | 0,4 |
| في منظم الحرارة عند +37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. | ||||||
| 15٪ محلول خل. حمض (مؤشر) | من 2 إلى | من 2 إلى | من 2 إلى | من 2 إلى | من 2 إلى | من 2 إلى |
| النتيجة (تكوين الجلطة | - | + | + | + + | + + + | + + + + |
توضع الأنابيب في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، وبعد ذلك تضاف 2-3 قطرات من محلول حمض الخليك بنسبة 15٪ ، وتُرج بلطف وتُقرأ النتائج عن طريق تكوين جلطة. يعتبر عيار حمض الهيالورونيك هو الحد الأدنى من الكمية ، والذي ، تحت تأثير حمض الأسيتيك ، يعطي جلطة واضحة. في هذا المثال ، عيار طبقة الهيالورونيك هو 0.2 مل. يتم أخذ نفس الكمية كجرعة عمل.
مخططات لتحديد نشاط الهيالورونيداز للثقافات ، انظر أدناه.
يتم خلط محتويات الأنابيب بالكامل ، وتوضع أولاً في منظم حرارة لمدة 15 دقيقة ، ثم في البرد لمدة 5 دقائق ، وتضاف 2-3 قطرات من حمض الأسيتيك بنسبة 15٪. يتم تسجيل وجود الهيالورونيداز في البكتيريا من خلال عدم وجود جلطة في عينة الاختبار. يجب أن تظهر جلطة جيدة في أنبوب التحكم بسبب وجود حمض الهيالورونيك السليم.
للحصول على تحديد كمي أكثر دقة لنشاط الهيالورونيداز في ثقافة الاختبار ، يتم وضع العينة وفقًا للمخطط التفصيلي التالي.
| مخطط لتحديد نشاط الهيالورونيداز في الثقافات | ||
| عناصر | أنابيب الإختبار | |
| 1 | 2 | |
| (العينة الرئيسية) | السيطرة على حمض الهيالورونيداز | |
| مستخلص حمض الهيالورونيك بجرعة عمل (مل) | 0.2 مل | 0.2 مل |
| الترشيح - إنزيم أو 2 مليار معلق من الميكروبات في محلول ملحي (بالملليتر). | 0.3 مل | - |
| مقطر. الماء أو نات. المحلول (بالملل) | 0,2 | 0.5 مل |
| في منظم حرارة عند +37 درجة مئوية لمدة 15-30 دقيقة ، ثم في البرد لمدة 5 دقائق لإيقاف عمل الإنزيم | ||
| 15٪ محلول حمض الخليك | 2 قطرات | 2 قطرات |
| مخطط للتحديد الكمي لنشاط الهيالورونيداز | ||||||
| المكونات في مل | أنابيب الإختبار | |||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
| السيطرة على حمض الهيالورونيك | ||||||
| مستخلص حمض الهيالورونيك في الرقيق. جرعة (مل) | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 |
| تعليق البكتيريا 2 مليار (مل) | 0,5 | 0,4 | 0,3 | 0,2 | 0,1 | - |
| مقطر. الماء أو نات. محلول مل | 0,2 | 0,3 | 0,4 | 0,5 | 0,6 | 0,7 |
| احفظه في منظم الحرارة ، أضف مؤشر 15٪ حمض الأسيتيك في البرد | ||||||
| النتيجة (تكوين الجلطة) | - | - | - | + | + | + |
عيار نشاط الهيالورونيداز للثقافة في هذا المثال هو 0.3 مل.
يعتمد تحديد FIBRINOKINASE على قدرة المكورات العنقودية على تجلط الفيبرين من الدم الطازج. للاختبار ، خذ 0.5 مل من مزرعة المرق اليومية من المكورات العنقودية ، أضف إلى 0.2 مل من البلازما البشرية الطازجة أو الدم مع 0.8 مل من المحلول الملحي. ثم تخلط بلطف بعد إضافة 0.5 مل من محلول 0.25٪ من كلوريد الكالسيوم. التحكم في هذا التفاعل عبارة عن أنبوب اختبار يحتوي على جميع المكونات نفسها ، ولكن بدون بكتيريا. توضع الأنابيب في منظم حرارة عند 37 درجة مئوية. يحدث التخثر خلال أول 15 دقيقة. من هذه اللحظة ، يتم مراقبة تقدم انحلال الجلطة المتكونة. عادة ، توفر الثقافات المسببة للأمراض تحلل الفبرين الكامل في غضون 24 ساعة.
تباين المحاصيل على البيئة هو CHEPMEN. تحضير الوسط: يضاف 3.3 مل من محلول مائي 0.1٪ من الجنطيانا البنفسجي أو البنفسجي البلوري إلى 1 لتر من 3.5٪ MPA. يتم سكب الوسط المحضر في أكواب. بعد التصلب ، يكون لها لون رمادي أرجواني. تعطي المكورات العنقودية المسببة للأمراض مستعمرات أرجوانية أو برتقالية عليها ، مستعمرات غير مسببة للأمراض - بيضاء أو أرجوانية.
يتم إجراء التفريق بين ستافيلوكوكس المسبب للمرض فيما يتعلق بالمانيتول على وسط جيوس سائل يحتوي على 0.5٪ كحول متعدد الهيدروكسيل - مانيتول. مانيتول يدمر المكورات العنقودية المسببة للأمراض بعد 36 ساعة ، غير المسببة للأمراض بعد ذلك بكثير. هذه العلامة غير مستقرة للغاية وليست مؤشرًا مستقلاً على الإمراضية.
طريقة العزل البكتيرية المتسارعة
وتحديد هوية المسبب المرضي وفقًا لبيتر دانيل
تعتمد الطريقة على الاستخدام المشترك لـ MPA في الدم التقليدي مع كريات الدم الحمراء في الحمل ووسيط مع مانيتول وكلوريد الصوديوم وتيلوريت البوتاسيوم ، وقد طور بيترو دانيلا الوصفة الخاصة به.
المتوسط لبترو دانيل يحتوي على التركيب التالي: ماء مقطر - 100 مل ؛ الببتون - 0.5 جم ؛ كلوريد الصوديوم -10 جم ؛ مانيتول أو لاكتوز ، 0.5 جم ؛ تيلوريت البوتاسيوم - 0.5 جم ؛ برومتيموبلاو - 0.004 جم.
تحضير الوسط: قم بإذابة الببتون والملح في ماء دافئ ، أضف 2 مل من محلول بروموثيمولباو (0.1 جم لكل 3.2 مل من محلول هيدروكسيد الصوديوم N / 20 و 50 مل من الماء المقطر) ، عقم عند +120 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. بعد التبريد ، أضف 5 مل من محلول مائي 10٪ من مانيتول أو لاكتوز ، معقم بالغليان و 5 مل من محلول مائي 1٪ من تيلوريت الصوديوم ، معقم في الأوتوكلاف. الوسط أخضر غامق ، درجة الحموضة -7.6. عندما يكون اللون أزرق ، تضاف إليه بضع قطرات من حمض الهيدروكلوريك بنسبة 10٪. يسكب الوسط في أنابيب اختبار ، 1-2 مل.
يشير اصفرار الوسط إلى Petru Danil بعد 24 ساعة من زرع المزرعة وانحلال الدم حول مستعمرات المكورات العنقودية إلى إطلاق البكتيريا المسببة للأمراض.
التحديد الشامل المعجل للمخطط البياني المرضي وفقًا لبيتر دانيل
يتم إجراء التمايز بين المكورات العنقودية المسببة للأمراض في أنبوب اختبار واحد. تعتمد الطريقة على قدرة المكورات العنقودية المسببة للأمراض على التراص في وجود البلازما البشرية ، وتخثرها ، وكذلك تسبب تراص كريات الدم الحمراء المتجانسة. لإجراء الاختبار ، تمت إضافة 10 مل من المحلول الفسيولوجي و 0.05 مل من كتلة كرات الدم الحمراء المستقرة تحت البلازما إلى 1 مل من نترات البلازما البشرية. يتم رج الأنبوب ويصب 0.5 مل من الخليط في أنبوب آخر. يتم إدخال أكبر قدر ممكن من ثقافة المكورات العنقودية هنا ، والتي يتم فركها بعناية على جدار أنبوب الاختبار بالقرب من الركيزة السائلة ، وملامسة سطحها قليلاً. يستمر الاحتكاك حتى يتم الحصول على تعليق متجانس. تتراكم المكورات العنقودية الذهبية المسببة للأمراض بالبلازما ، ولا يحدث التجانس ، غير المسببة للأمراض - تشكل كتلة متجانسة موحدة.
المكورات العنقودية المسببة للأمراض ، عندما يتم فرك المزرعة في ركيزة بلازما ، تشكل تعليقًا حبيبيًا غير متجانس ، وبعد الحضانة في ترموستات ، فإنها تسبب تراصًا دمويًا لكريات الدم الحمراء وتخثر البلازما. في هذه الحالة ، تشكل الطوابع غير المسببة للأمراض تعليقًا عكرًا موحدًا ، ولا يحدث تخثر البلازما والالتصاق بكريات الدم الحمراء.
| فاتورة غير مدفوعة. 1. أنواع العاثيات | |
| مجموعة | العاثيات |
| أنا | 29 ، 52 ، 52 أ ، 79 ، 80 |
| ثانيًا | 3 أ ، 3 ب ، 36 ، 55 ، 71 |
| ثالثا | 6 ، 7 ، 42 هـ ، 47 ، 53 ، 54 ، 75 ، 77 ، 83 أ |
| رابعا | 42 د |
| الخامس | 81 و 187 |
تصوير الرسوم البيانية
تنتشر أنواع مختلفة من البكتيريا العنقودية في أماكن مختلفة. لذلك ، فإن تصميمهم في ثقافات المكورات العنقودية له أهمية كبيرة لتوضيح المصدر المحتمل للعدوى وطرق انتشارها.
من بين المكورات العنقودية المتخثرة بالبلازما ، وفقًا لتسمية اللجنة الدولية لتنميط Phageotyping ، يتم تمييز 22 نوعًا من العاثيات (الجدول 1):
يتم إجراء تحديد قابلية تحلل المكورات العنقودية بواسطة العاثيات المسماة على النحو التالي.
تحضير المحاصيل للتصوير الفوتوغرافي
التصوير الفوتوغرافي
تؤخذ النتيجة الإيجابية في الاعتبار إذا تم تحديد درجة التحلل بنقطتين زائدتين على الأقل. في هذه الحالة ، تكون منطقة التحلل حوالي 50٪ من المساحة في موقع تطبيق العاثية.
في كثير من الحالات ، لا يتم تحلل ثقافات المكورات العنقودية من قبل واحدة ، ولكن من خلال العديد من العاثيات ، مما يشكل نوعًا من الفغوموسيك من البقع المعقمة. تعتبر المكورات العنقودية التي تظهر نفس الفسيفساء أو تختلف بمقدار فجوة واحدة متطابقة.
الطريقة البيولوجية
يتم استخدام طريقة التشخيص البيولوجي فقط إذا كان هناك اشتباه في تسمم غذائي ناتج عن المكورات العنقودية المعوية التي تطلق السم المعوي. يتم تقليل مبدأه إلى تغذية بقايا الطعام المشتبه في إصابته بالمكورات العنقودية ، والثقافة المعزولة ، وغسل الماء. أفضل نموذج بيولوجي هو القطط التي يبلغ عمرها 1.5 إلى شهرين (لأبحاث الاستزراع) والقطط البالغة (إذا تم اكتشاف السم المعوي). مع عدوى المكورات العنقودية بالتنقيط ، لا يتم استخدام هذه الطريقة.
مصدر: Motavkina NS، Pyanova R.E. التشخيص الميكروبيولوجي لبعض أنواع العدوى بالقطيرات وداء المقوسات. التطوير المنهجي للطلاب. VSMU ، 1973
تم اكتشاف المكورات العنقودية الذهبية في عام 1878 بواسطة R. Koch وفي عام 1880 بواسطة L. Pasteur في مادة قيحية. بعد أن أصاب L. Pasteur أرنبًا ، أثبت أخيرًا دور المكورات العنقودية كعامل مسبب للالتهاب القيحي. أُطلق على اسم "المكورات العنقودية" في عام 1881 من قبل أ. أوغستون (بسبب الترتيب المميز للخلايا) ، وفي عام 1884 وصف ف. روزنباخ خصائصها بالتفصيل. المكورات العنقودية هي خلايا كروية هندسية موجبة الجرام ويبلغ قطرها 0.5 - 1.5 ميكرون ، وتقع عادة في شكل مجموعات (انظر اللون ، الشكل 92) ، موجبة الكاتلاز ، تقلل النترات إلى نيتريت ، تحلل البروتينات بشكل فعال و الدهون ، تخمر الجلوكوز تحت ظروف لاهوائية لتشكيل حامض بدون غاز. يمكن أن تنمو عادة في وجود 15٪ كلوريد الصوديوم وعند 45 درجة مئوية. محتوى G + C في DNA هو 30 - 39 مول٪. لا تحتوي المكورات العنقودية على سوط ، ولا تشكل جراثيم. هم منتشرون في الطبيعة. خزانهم الرئيسي هو جلد الإنسان والحيوان وأغشيتهم المخاطية ، والتواصل مع البيئة الخارجية. المكورات العنقودية هي اللاهوائية الاختيارية ، نوع واحد فقط ( المكورات العنقودية السكرية) هي مادة لاهوائية صارمة. لا تتطلب المكورات العنقودية وسط المغذيات ، وتنمو جيدًا على الوسائط العادية ، ودرجة الحرارة المثلى للنمو هي 35 - 37 درجة مئوية ، ودرجة الحموضة 6.2 - 8.4. المستعمرات مستديرة ، قطرها 2-4 مم ، ذات حواف ناعمة ، محدبة ، معتم ، ملونة بلون الصباغ المتكون. النمو في الثقافة السائلة مصحوب بعكارة موحدة ، وتتشكل رواسب فضفاضة بمرور الوقت. عند النمو على الوسائط التقليدية ، لا تشكل المكورات العنقودية كبسولات ، ومع ذلك ، عند حقنها في أجار شبه سائل مع البلازما أو المصل ، فإن معظم السلالات بكتريا المكورة العنقودية البرتقاليةيشكل كبسولة. سلالات خالية من الكبسولات في أجار شبه سائل تنمو في شكل مستعمرات مدمجة وسلالات كبسولة - تشكل مستعمرات منتشرة.
المكورات العنقودية لها نشاط كيميائي حيوي مرتفع: تخمر مع إطلاق الحمض (بدون غاز) الجلسرين ، الجلوكوز ، المالتوز ، اللاكتوز ، السكروز ، المانيتول ؛ تكوين إنزيمات مختلفة (تجلط الدم في البلازما ، الفيبرينوليسين ، الليسيثيناز ، الليزوزيم ، الفوسفاتاز القلوي ، الدناز ، الهيالورونيداز ، اختزال التيلوريت ، البروتيناز ، الجيلاتيناز ، إلخ). تلعب هذه الإنزيمات دورًا مهمًا في عملية التمثيل الغذائي للمكورات العنقودية وتحدد إلى حد كبير قابليتها للأمراض. إن الإنزيمات مثل الفيبرينوليسين والهيالورونيداز مسؤولة عن الغزو العالي للمكورات العنقودية. تجلط الدم في البلازما هو العامل الرئيسي في قدرتها المرضية: فهو يحمي من البلعمة ويحول البروثرومبين إلى ثرومبين ، مما يتسبب في تجلط الفيبرينوجين ، ونتيجة لذلك يتم تغطية كل خلية بغشاء بروتيني يحمي من البلعمة.
تصنيف.جنس المكورات العنقوديةيشمل أكثر من 20 نوعًا ، والتي تنقسم إلى مجموعتين - المكورات العنقودية إيجابية تجلط الدم وسلبية تجلط الدم. يتم استخدام شخصيات مختلفة للتمييز بين الأنواع (الجدول 22).
الجدول 22
العلامات التفاضلية للأنواع الرئيسية للمكورات العنقودية
ملحوظة. (+) - علامة إيجابية ؛ (-) - العلامة سلبية ؛ + (-) - هل علامة متقلبة ؛؟ - غير معروف.
I. المكورات العنقودية إيجابية المخثر:
1.بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية***.
2.S. intermedius**.
3.S. hyicusأ.
ثانيًا. المكورات العنقودية السلبية المخثرة:
* مُمْرِض للبشر فقط.
** مُمْرِض للحيوانات فقط.
*** مُمْرِض للإنسان والحيوان.
أليس كل السلالات S. hyicusلديهم تجلط الدم.
مسببات الأمراض للإنسان هي بشكل رئيسي المكورات العنقودية إيجابية التخثر ، ولكن العديد من المكورات العنقودية سلبية تخثر الدم قادرة أيضًا على التسبب في الأمراض ، خاصة عند الأطفال حديثي الولادة (التهاب الملتحمة عند الأطفال حديثي الولادة ، والتهاب الشغاف ، والإنتان ، وأمراض المسالك البولية ، والتهاب المعدة والأمعاء الحاد ، وما إلى ذلك). بكتريا المكورة العنقودية البرتقاليةاعتمادًا على من هو حاملها الرئيسي ، يتم تقسيمها إلى 10 ekovars ( هومينيس ، بوفيس ، أوفيسوإلخ.).
تم العثور على أكثر من 50 نوعًا من المستضدات في المكورات العنقودية ، وتتكون الأجسام المضادة لكل منها في الجسم ، والعديد من المستضدات لها خصائص مسببة للحساسية. حسب الخصوصية ، تنقسم المستضدات إلى عامة (مشتركة بين الجنس بأكمله المكورات العنقودية) ؛ تفاعل متقاطع - مستضدات شائعة مع مضادات التماثل المتماثل لخلايا الدم الحمراء والجلد والكلى (ترتبط أمراض المناعة الذاتية بها) ؛ الأنواع والمستضدات الخاصة بالنوع. بواسطة المستضدات الخاصة بالنوع المكتشفة في تفاعل التراص ، تنقسم المكورات العنقودية إلى أكثر من 30 من المتغيرات المصلية. ومع ذلك ، فإن الطريقة المصلية لكتابة المكورات العنقودية لم يتم استخدامها على نطاق واسع بعد. تشمل الأنواع الخاصة البروتين A ، الذي يتشكل بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية... يقع هذا البروتين بشكل سطحي ، وهو مرتبط تساهميًا بالببتيدوغليكان ، ويبلغ وزنه الجزيئي حوالي 42 كيلو دالتون. يتم تصنيع البروتين A بشكل فعال بشكل خاص في مرحلة النمو اللوغاريتمي عند 41 درجة مئوية ، وهو قابل للتحلل بالحرارة ، ولا يتم تدميره بواسطة التربسين ؛ وتتمثل خاصيته الفريدة في القدرة على الارتباط بجزء Fc من الغلوبولين المناعي IgG (IgG 1 ، IgG 2 ، IgG 4) ، بدرجة أقل بـ IgM و IgA. على سطح البروتين A ، تم تحديد العديد من المناطق التي يمكن أن ترتبط بمنطقة من سلسلة البولي ببتيد المناعي الواقعة على حدود مجالات CH 2 و CH 3. وجدت هذه الخاصية تطبيقًا واسعًا في تفاعل التراص: المكورات العنقودية ، محملة بأجسام مضادة محددة ، حيث تظل المراكز النشطة خالية ، عند التفاعل مع المستضد ، تعطي تفاعل تراص سريع.
يؤدي تفاعل البروتين A مع الغلوبولين المناعي إلى حدوث خلل في الأنظمة التكميلية والبالعات في جسم المريض. له خصائص مستضدية ، وهو من مسببات الحساسية القوية ويحث على تكاثر الخلايا اللمفاوية التائية والبائية. لم يتم بعد توضيح دورها في التسبب في أمراض المكورات العنقودية بشكل كامل.
سلالات بكتريا المكورة العنقودية البرتقاليةتختلف في الحساسية تجاه لاقمات المكورات العنقودية. للكتابة بكتريا المكورة العنقودية البرتقاليةاستخدام مجموعة دولية من 23 لاقمات معتدلة ، مقسمة إلى أربع مجموعات:
المجموعة الأولى - العاثيات 29 ، 52 ، 52 أ ، 79 ، 80 ؛
المجموعة الثانية - العاثيات 3 أ ، 3 ج ، 55 ، 71 ؛
المجموعة الثالثة - العاثيات 6 ، 42 هـ ، 47 ، 53 ، 54 ، 75 ، 77 ، 83 أ ، 84 ، 85 ؛
المجموعة الرابعة - العاثيات 94 ، 95 ، 96 ؛
81- العاثيات.
إن علاقة المكورات العنقودية بالعاقمات غريبة: يمكن تحلل سلالة واحدة ونفسها إما عن طريق ملتهمة واحدة ، أو بعدة سلالة في وقت واحد. ولكن نظرًا لأن حساسيتها تجاه العاثيات هي علامة مستقرة نسبيًا ، فإن نوع الملتهمة للمكورات العنقودية له أهمية وبائية كبيرة. عيب هذه الطريقة أنه لا يمكن كتابة أكثر من 65-70٪. بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية... في السنوات الأخيرة ، تم الحصول على مجموعات من العاثيات المحددة للطباعة S. البشرة.
عوامل إمراض المكورات العنقودية.المكورات العنقودية الذهبية هي كائن حي دقيق فريد من نوعه. يمكن أن تسبب أكثر من 100 مرض مختلف تنتمي إلى إحدى عشرة فئة وفقًا للتصنيف الدولي لعام 1968. يمكن أن تؤثر المكورات العنقودية على أي نسيج ، أي عضو. ترجع خاصية المكورات العنقودية هذه إلى وجود مجموعة كبيرة من العوامل المسببة للأمراض فيها.
1. عوامل الالتصاق - يرجع ارتباط المكورات العنقودية بخلايا الأنسجة إلى قدرتها على مقاومة الماء (كلما كانت أعلى ، كانت الخصائص اللاصقة أقوى) ، فضلاً عن الخصائص اللاصقة لعديد السكاريد ، وربما أيضًا البروتين A ، والقدرة على الارتباط فبرونيكتين (مستقبل بعض الخلايا).
2. الإنزيمات المختلفة التي تلعب دور عوامل "العدوان والدفاع": تجلط الدم في البلازما (العامل الرئيسي للإمراضية) ، الهيالورونيداز ، الفيبرينوليسين ، الدناز ، إنزيم الليزوزيم الشبيه ، الليسيثيناز ، الفوسفاتيز ، البروتيناز ، إلخ.
3 - مركب من السموم الخارجية المفرزة:
كريات الدم الحمراء ، نخر عند تناوله داخل الأدمة للأرنب ، تدمير الكريات البيض ، موت أرنب عند إعطائه عن طريق الوريد. ومع ذلك ، اتضح أن هذا التأثير ناتج عن نفس العامل - وهو مادة سامة مدمرة للغشاء. له تأثير حال للخلايا على أنواع مختلفة من الخلايا ، والذي يتجلى على النحو التالي. ترتبط جزيئات هذا السم أولاً بمستقبلات غير معروفة لغشاء الخلية المستهدفة أو يتم امتصاصها بشكل غير محدد بواسطة الدهون الموجودة في الغشاء ، ثم تشكل سباعيًا على شكل فطر مكون من 7 جزيئات ، تتكون من 3 مجالات. تقع المجالات التي تشكل "الغطاء" و "الحافة" على السطح الخارجي للأغشية ، ويعمل مجال "الجذع" كقناة مسامية عبر الغشاء. من خلاله يحدث دخول وخروج الجزيئات والأيونات الصغيرة ، مما يؤدي إلى تورم وموت الخلايا ذات النواة ، والتحلل الاسموزي لكريات الدم الحمراء. تم العثور على عدة أنواع من الأغشية التالفة من البشر ، فهي تحلل كريات الدم الحمراء للإنسان والأرانب والكباش. التأثير المميت في الأرانب ناتج عن الحقن في الوريد بعد 3-5 دقائق. ينحل كريات الدم الحمراء من البشر والعديد من الأنواع الحيوانية. تأثير مميت على الأرانب عند إعطائه عن طريق الوريد يحدث بعد 16 - 24 - 48 ساعة. في كثير من الأحيان ، في المكورات العنقودية ، ob
ب) السموم التقشيرية A و B تتميز بخصائص مستضدية ، وعلاقتها بدرجة الحرارة (أ - قابل للحرارة ، ب - قابيل حراري) ، توطين الجينات التي تتحكم في تركيبها (يتم التحكم في A بواسطة جين كروموسومي ، B - بواسطة جين بلازميد). في كثير من الأحيان في نفس السلالة بكتريا المكورة العنقودية البرتقاليةيتم تصنيع كلا من القشر. ترتبط هذه السموم بقدرة المكورات العنقودية على إحداث الفقاع عند الأطفال حديثي الولادة ، والقوباء الفقاعية ، والطفح الجلدي القرمزي.
ج) الليكوسيدين الحقيقي - سم يختلف عن الهيموليزينات في خصائص المستضدات ، يعمل بشكل انتقائي على الكريات البيض ، ويدمرها ؛
د) السموم الخارجية التي تسبب متلازمة الصدمة السامة (TSS). لها خصائص superantigen. تتميز TSS بزيادة في درجة الحرارة ، وانخفاض في ضغط الدم ، وطفح جلدي مع تقشير لاحق على اليدين والقدمين ، وقلة اللمفاويات ، وأحيانًا الإسهال ، وتلف الكلى ، وما إلى ذلك. أكثر من 50 ٪ من السلالات قادرة على إنتاج وإفراز هذا السم بكتريا المكورة العنقودية البرتقالية.
4. خصائص مسببة للحساسية قوية ، والتي تمتلكها كل من مكونات بنية الخلية والسموم الخارجية ومنتجات النفايات الأخرى التي تفرزها البكتيريا. المواد المسببة للحساسية من المكورات العنقودية قادرة على إحداث تفاعلات فرط الحساسية من النوع المتأخر (HPR) وتفاعلات فرط الحساسية من النوع الفوري (HPN). المكورات العنقودية هي السبب الرئيسي لحساسية الجلد والجهاز التنفسي (التهاب الجلد والربو القصبي وما إلى ذلك). إن خصوصية التسبب في عدوى المكورات العنقودية وميلها إلى الانتقال إلى شكل مزمن متجذرة في تأثير GHZ.
5. المستضدات المتفاعلة (مع مستضدات الكريات الحمر A و B ، الكلى والجلد - تحريض الأجسام المضادة الذاتية ، تطور أمراض المناعة الذاتية).
6. العوامل التي تثبط البلعمة. يمكن أن يتجلى وجودها في قمع الانجذاب الكيميائي ، وحماية الخلايا من الامتصاص بواسطة الخلايا البلعمية ، وفي تزويد المكورات العنقودية بالقدرة على التكاثر في البالعات ومنع "الانفجار التأكسدي". يتم تثبيط البلعمة بواسطة الكبسولة ، البروتين A ، الببتيدوغليكان ، الأحماض التيشويك ، السموم. بالإضافة إلى ذلك ، تحفز المكورات العنقودية تخليق مثبطات نشاط البلعمة بواسطة بعض خلايا الجسم (على سبيل المثال ، خلايا الطحال). لا يمنع تثبيط البلعمة الجسم من تطهير المكورات العنقودية فحسب ، بل يعطل أيضًا معالجة وعرض المستضدات للخلايا اللمفاوية التائية والبائية ، مما يؤدي إلى انخفاض قوة الاستجابة المناعية.
إن وجود كبسولة في المكورات العنقودية يزيد من ضراوتها بالنسبة للفئران البيضاء ، مما يجعلها مقاومة لعمل العاثيات ، ولا يسمح بالكتابة باستخدام الأمصال المتراصة ، ويقنع البروتين أ.
لا تحمي أحماض التييكويك المكورات العنقودية من البلعمة فحسب ، بل تلعب دورًا أساسيًا في التسبب في التهابات المكورات العنقودية. ثبت أنه في الأطفال المصابين بالتهاب الشغاف ، توجد الأجسام المضادة لأحماض التيكويك في 100٪ من الحالات.
7. التأثير المولد للمكورات العنقودية فيما يتعلق بالخلايا الليمفاوية (البروتين أ ، السموم المعوية وغيرها من المنتجات التي تفرزها المكورات العنقودية لها هذا التأثير).
8. السموم المعوية A ، B ، C1 ، C2 ، C3 ، D ، E. تتميز بخصوصية مستضد ، استقرار حراري ، مقاومة لعمل الفورمالين (لا تتحول إلى ذيفان) والإنزيمات الهاضمة (التربسين والبيبسين) ، هي مستقر في نطاق الأس الهيدروجيني من 4 ، 5 إلى 10.0. السموم المعوية عبارة عن بروتينات منخفضة الوزن الجزيئي يتراوح وزنها الجزيئي من 26 إلى 34 كيلو دالتون مع خصائص المستضدات الفائقة.
وقد ثبت أيضًا أن هناك اختلافات محددة وراثيًا في الحساسية لعدوى المكورات العنقودية وطبيعة مسارها في البشر. على وجه الخصوص ، غالبًا ما توجد أمراض الإنتان القيحي العنقودية الشديدة في الأشخاص ذوي فصائل الدم A و AB ، وغالبًا ما توجد في الأشخاص من المجموعتين 0 و B.
ترتبط قدرة المكورات العنقودية على إحداث تسمم غذائي ، مثل التسمم ، بتخليق السموم المعوية. غالبًا ما تحدث بسبب السموم المعوية A و D. آلية عمل هذه السموم المعوية غير مفهومة جيدًا ، لكنها تختلف عن عمل السموم المعوية البكتيرية الأخرى ، التي تعطل وظيفة نظام إنزيم الأدينيلات. تسبب جميع أنواع السموم المعوية العنقودية نمطًا مشابهًا من التسمم: الغثيان والقيء وآلام البنكرياس والإسهال وأحيانًا الصداع والحمى وتشنج العضلات. ترجع هذه السمات للسموم المعوية للمكورات العنقودية إلى خصائصها الفوقية: فهي تحفز التوليف المفرط للإنترلوكين 2 ، مما يسبب التسمم. تحفز السموم المعوية العضلات الملساء المعوية وتزيد من حركية الجهاز الهضمي. غالبًا ما يرتبط التسمم باستخدام منتجات الألبان المصابة بالمكورات العنقودية (الآيس كريم والمعجنات والكعك والجبن والجبن القريش وما إلى ذلك) والأطعمة المعلبة بالزبدة. يمكن أن ترتبط الإصابة بمنتجات الألبان بالتهاب الضرع في الأبقار أو بالأمراض الالتهابية للبيو في البشر المتعلقة بإنتاج الغذاء.
وبالتالي ، فإن وفرة العوامل المسببة للأمراض المختلفة في المكورات العنقودية وخصائصها المسببة للحساسية العالية تحدد خصوصيات التسبب في أمراض المكورات العنقودية وطبيعتها وتوطينها وشدة الدورة والمظاهر السريرية. يساهم داء الفيتامينات والسكري وانخفاض المناعة في تطور أمراض المكورات العنقودية.
مقاومة المكورات العنقودية.من بين البكتيريا التي لا تشكل الأبواغ ، تمتلك المكورات العنقودية ، مثل المتفطرات ، أكبر مقاومة للعوامل الخارجية. إنها تتحمل التجفيف جيدًا وتظل قابلة للحياة وخبيثة لأسابيع وشهور في الغبار الناعم الجاف ، وهو مصدر للعدوى بالغبار. تقتلهم أشعة الشمس المباشرة لساعات عديدة فقط ، بينما يعمل الضوء المنتشر بشكل ضعيف للغاية. كما أنها مقاومة لدرجات الحرارة المرتفعة: تسخين حتى 80 درجة مئوية يتحمل حوالي 30 دقيقة ، والحرارة الجافة (110 درجة مئوية) تقتلها في غضون ساعتين ؛ يتحملون درجات الحرارة المنخفضة جيدًا. تختلف الحساسية للمطهرات الكيميائية اختلافًا كبيرًا ، على سبيل المثال ، يقتلها محلول بنسبة 3٪ من الفينول في غضون 15 - 30 دقيقة ، ومحلول مائي بنسبة 1٪ من الكلورامين - في غضون 2-5 دقائق.
ملامح علم الأوبئة.نظرًا لأن المكورات العنقودية من السكان الدائمين للجلد والأغشية المخاطية ، فإن الأمراض التي تسببها يمكن أن تكون إما عدوى ذاتية (مع إصابات مختلفة للجلد والأغشية المخاطية ، بما في ذلك الصدمات الدقيقة) ، أو عدوى خارجية ناتجة عن التلامس المنزلي ، والقطرات المحمولة جواً. الغبار أو الغذاء (للتسمم الغذائي) طرق العدوى.
إن نقل المكورات العنقودية المسببة للأمراض له أهمية خاصة ، لأن الناقلين ، وخاصة في المؤسسات الطبية (عيادات جراحية مختلفة ، ومستشفيات الولادة ، وما إلى ذلك) وفي مجموعات مغلقة ، يمكن أن تسبب عدوى بالمكورات العنقودية. يمكن أن يكون نقل المكورات العنقودية المسببة للأمراض مؤقتًا أو متقطعًا ، لكن الأشخاص الذين يكونون بشكل دائم (حاملون مقيمون) يشكلون خطرًا خاصًا على الآخرين. في مثل هؤلاء الأشخاص ، تستمر المكورات العنقودية لفترة طويلة وبأعداد كبيرة على الأغشية المخاطية للأنف والحنجرة. سبب النقل طويل الأمد غير واضح تمامًا. قد يكون نتيجة لضعف المناعة المحلية (نقص إفراز IgA) ، أو خلل في الغشاء المخاطي ، أو زيادة في الخواص اللاصقة للمكورات العنقودية ، أو بسبب أي من خصائصها الأخرى.
ملامح التسبب والصورة السريرية.تدخل المكورات العنقودية الجسم بسهولة من خلال أصغر الأضرار التي تلحق بالجلد والأغشية المخاطية ويمكن أن تسبب مجموعة متنوعة من الأمراض - من حب الشباب (حب الشباب) إلى التهاب الصفاق الحاد والتهاب الشغاف والإنتان أو تسمم الدم ، حيث يصل معدل الوفيات إلى 80٪. تسبب المكورات العنقودية الدمامل ، التهاب الوريد ، الخراجات ، الفلغمون ، التهاب العظم والنقي. في زمن الحرب - المذنبون المتكررون لمضاعفات قيحية للجروح ؛ تلعب المكورات العنقودية دورًا رائدًا في الجراحة القيحية. تمتلك خصائص مسببة للحساسية ، يمكن أن تسبب الصدفية ، التهاب الأوعية الدموية النزفية ، الحمرة ، التهاب المفاصل غير المحدد. تعد عدوى المكورات العنقودية من الطعام سببًا شائعًا للتسمم الغذائي. المكورات العنقودية هي المسببات الرئيسية للإنتان ، بما في ذلك الأطفال حديثي الولادة. على عكس تجرثم الدم (البكتيريا الموجودة في الدم) ، وهو عرض من أعراض المرض ويلاحظ في العديد من الالتهابات البكتيرية ، فإن الإنتان (تسمم الدم - التعفن) هو مرض مستقل له صورة سريرية محددة ، والتي تعتمد على الأضرار التي لحقت بأعضاء الجسم. النظام الشبكي البطاني (نظام البالعات وحيدة النواة - SMF). مع الإنتان ، هناك تركيز صديدي ، يدخل منه العامل الممرض بشكل دوري إلى مجرى الدم ، وينتشر في جميع أنحاء الجسم ويؤثر على الجهاز الشبكي البطاني (SMF) ، في الخلايا التي يتكاثر فيها ، ويطلق السموم والمواد المسببة للحساسية. في هذه الحالة ، تعتمد الصورة السريرية للإنتان بشكل ضعيف على نوع العامل الممرض ، ولكن يتم تحديده من خلال هزيمة أعضاء معينة.
تسمم الدم هو شكل من أشكال الإنتان ، حيث يتسبب العامل الممرض في بؤر قيحية في الأعضاء والأنسجة المختلفة ، أي أنه تعفن الدم بسبب النقائل القيحية.
يمكن أن يكون تجرثم الدم في تعفن الدم وتسمم الدم قصير الأجل وطويل الأجل.
مناعة ما بعد العدوىموجود ، ويرجع ذلك إلى كل من العوامل الخلطية والخلوية. تلعب دورًا مهمًا في ذلك عن طريق مضادات السموم والأجسام المضادة للميكروبات والأجسام المضادة ضد الإنزيمات وكذلك الخلايا اللمفاوية التائية والبالعات. لم يتم دراسة شدة ومدة المناعة ضد المكورات العنقودية بشكل كافٍ ، لأن تركيبها المستضدي متنوع للغاية ، ولا توجد مناعة متصالبة.
التشخيصات المخبرية.الطريقة الرئيسية هي البكتريولوجية. تطوير وتنفيذ الاختبارات المصلية. إذا لزم الأمر (في حالة التسمم) ، يتم استخدام عينة بيولوجية. مادة البحث البكتريولوجي هي الدم ، القيح ، المخاط من الحلق ، الأنف ، إفرازات من الجروح ، البلغم (مع الالتهاب الرئوي العنقودي) ، البراز (مع التهاب القولون العنقودي) ، في حالة تسمم الطعام - القيء ، البراز ، غسيل المعدة ، الأطعمة المشبوهة . يتم تلقيح المادة على أجار الدم (انحلال الدم) ، وأجار ملح الحليب (صفار الحليب - الملح) (يتم منع نمو البكتيريا الغريبة بسبب كلوريد الصوديوم ، ويتم اكتشاف الصباغ والليسيثيناز بشكل أفضل). يتم تحديد الثقافة المعزولة من خلال خصائص الأنواع ، ويتم تحديد وجود العلامات والعوامل الرئيسية للإمراضية (الصباغ الذهبي ، تخمير المانيتول ، انحلال الدم ، تجلط الدم بالبلازما) ، ويتم فحص الحساسية للمضادات الحيوية ، إذا لزم الأمر ، يتم إجراء نوع الملتهمة. من بين التفاعلات المصلية ، يتم استخدام RPHA و IFM لتشخيص أمراض الإنتان القيحي ، على وجه الخصوص ، لتحديد الأجسام المضادة لحمض التيكويك أو المستضدات الخاصة بالأنواع.
لتحديد السمية المعوية للمكورات العنقودية ، يتم استخدام ثلاث طرق:
1) السيرولوجي - بمساعدة مصل مضاد للتسمم محدد في تفاعل الترسيب في الهلام ، يتم الكشف عن السم المعوي وتحديد نوعه ؛
2) الحقن الوريدي لثقافة مرق المكورات العنقودية بالترشيح للقطط بجرعة 2-3 مل لكل 1 كجم من وزن الجسم. تسبب السموم القيء والإسهال في القطط.
3) الطريقة البكتريولوجية غير المباشرة - العزل من منتج مشبوه من مزرعة نقية من المكورات العنقودية وتحديد عوامل الإمراضية الخاصة بها (يرتبط تكوين السم المعوي بوجود عوامل مسببة للأمراض أخرى ، ولا سيما RNAase).
الطريقة الأبسط والأكثر حساسية هي الطريقة المصلية للكشف عن السم المعوي.
علاج او معاملة.لعلاج أمراض المكورات العنقودية ، تستخدم المضادات الحيوية بيتا لاكتام بشكل أساسي ، والتي يجب أولاً تحديد الحساسية لها. في حالات العدوى الشديدة والمزمنة بالمكورات العنقودية ، يعطي العلاج المحدد تأثيرًا إيجابيًا - استخدام اللقاح الذاتي ، والذيفان ، والغلوبولين المناعي المضاد للمكورات العنقودية (الإنسان) ، والبلازما المضادة للمكورات العنقودية.
الوقاية النوعية.لإنشاء مناعة اصطناعية ضد عدوى المكورات العنقودية ، يتم استخدام ذوفان المكورات العنقودية (سائلة وأقراص) ، ولكنها تخلق مناعة مضادة للسموم فقط ضد المكورات العنقودية ، التي يتم تحللها بشكل أساسي من قبل العاثيات المجموعة الأولى. استخدام لقاحات المكورات العنقودية المقتولة أو مستضداتها ، على الرغم من أنها تؤدي إلى ظهور الأجسام المضادة للميكروبات ، ولكن فقط ضد تلك المتغيرات المصلية التي يصنع منها اللقاح. تعتبر مشكلة إيجاد لقاح مناعي فعال ضد العديد من أنواع المكورات العنقودية الممرضة من أهم مشاكل علم الأحياء الدقيقة الحديث.
يقدم STYLAB أنظمة اختبار لتحليل محتوى Staphylococcus aureus في الغذاء والبيئة من خلال الطرق الميكروبيولوجية ، وكذلك لتحديد الحمض النووي لهذه البكتيريا باستخدام PCR.
المكورات العنقودية الذهبية ( المكورات العنقوديةالمذهبة) هي بكتيريا لاهوائية غير مسببة للجراثيم موجبة الجرام في كل مكان تنتمي إلى البكتيريا الكروية. هذه الكائنات الحية الدقيقة هي جزء من البكتيريا الطبيعية للجلد والأغشية المخاطية في 15-50٪ من الأشخاص والحيوانات الأصحاء.
بعض سلالات هذه البكتيريا تقاوم. وأشهر هذه المكورات العنقودية الذهبية المقاومة للميثيسيلين (MRSA). لفترة طويلة ، كان يُعتبر العامل المسبب لعدوى المستشفيات ، ولكن منذ منتصف التسعينيات ، عُرف عن الأمراض لدى الأشخاص الذين لم يكونوا في المستشفيات. في أغلب الأحيان ، كانت هذه آفات جلدية قيحية ، ومع ذلك ، عند خدش الآفات ، دخلت MRSA إلى مجرى الدم وأثرت على الأعضاء الأخرى. كانت المكورات العنقودية الذهبية المقاومة للميثيسيلين عرضة للفانكومايسين ، وهو مضاد حيوي سام يقضي على الكائن الحي.
نوع آخر من البكتيريا المقاومة للمضادات الحيوية هو المكورات العنقودية الذهبية المقاومة للفانكومايسين (VRSA). كان الأطباء والعلماء يتوقعون هذا الكائن الحي منذ أن علموا بوجود بكتيريا MRSA والمكورات المعوية المقاومة للفانكومايسين (VRE) ، وهي كائن غير مُمْرِض يعيش في الأمعاء ، لأن النقل الأفقي سمح بتبادل الجينات بين هذه البكتيريا. تم اكتشاف VRSA لأول مرة في عام 2002 وكان بالفعل مقاومًا لجميع المضادات الحيوية القوية الموجودة في ذلك الوقت. ومع ذلك ، كانت نقطة ضعفه هي حساسيته تجاه السلفوناميد القديم - البكتيريا.
توجد المكورات العنقودية الذهبية في التربة والمياه ، وغالبًا ما تلوث الطعام ويمكن أن تصيب جميع الأنسجة والأعضاء: الجلد والأنسجة تحت الجلد والرئتين والجهاز العصبي المركزي والعظام والمفاصل ، إلخ. يمكن أن تسبب هذه البكتيريا تعفن الدم وآفات جلدية قيحية والتهابات الجروح.
درجة الحرارة المثلى للمكورات العنقودية الذهبية هي 30-37 درجة مئوية. يمكنه تحمل التسخين حتى 70-80 درجة مئوية لمدة 20-30 دقيقة ، حرارة جافة - حتى ساعتين. هذه البكتيريا مقاومة للجفاف والتملح ويمكن أن تنمو على وسط يحتوي على 5-10٪ من ملح الطعام ، بما في ذلك باليك الأسماك واللحوم وغيرها من المنتجات. تقتل معظم المطهرات المكورات العنقودية الذهبية.
تفرز المكورات العنقودية الذهبية مجموعة متنوعة من السموم. تتسبب السموم الغشائية (الهيموليزينات) من أربعة أنواع في انحلال الدم ؛ بالإضافة إلى أن ذيفان الأغشية ألفا في التجارب يتسبب في نخر الجلد ، وعند إعطائه عن طريق الوريد ، يتسبب في موت الحيوانات. يتلف نوعان من التقشيرات خلايا الجلد. يسبب Leukocidin (سم بانتون فالنتين) اضطرابات في توازن الماء والكهارل في خلايا الكريات البيض ، وخاصة الضامة والعَدِلات والوحيدات ، مما يؤدي إلى موتهم.
وفقًا لـ TR CU 021/2011 ومستندات أخرى ، فإن محتوى المكورات العنقودية إيجابية التخثر محدود أيضًا في الطعام. هذه هي البكتيريا التي تنتج إنزيم تجلط الدم ، وهو إنزيم يتسبب في تجلط بلازما الدم. بالإضافة إلى س. المذهبةوتشمل هذه س. دلفيني, س. hyicus, س. إنترميديوس, س. lutrae, س. pseudintermediusو س. شليفريالأنواع الفرعية. coagulans... وبحسب بعض التقارير ، س. لييهو أيضا تجلط إيجابي إيجابي.
لتحديد Staphylococcus aureus في العينات ، يتم استخدام كل من الطرق الميكروبيولوجية ، بما في ذلك الوسائط الانتقائية ، وتحليل الحمض النووي باستخدام طريقة PCR.
